一种生态妇科外用药物组合物及其制备方法和应用
【技术领域】
[0001] 本发明设及一种生态妇科外用药物组合物及其制备方法，特别是设及一种经益生 菌发酵的妇科外用组合物及其制备方法，属于生物医药技术领域。 技术背景
[0002] 据世界卫生组织不完全统计，妇女中，各种妇科疾病发病率65%W上，我国有关资 料调查显示，育龄妇女妇科疾病发病率在70%W上，一生中，几乎100%的女性患过不同程度 的阴道炎。阴道炎是妇科疾病中的常见病、多发病，易感染，发病率逐年上升，其具有复发率 高、根治困难等特点。与细菌性阴道病相关的并发症已很明确，研究表明自然流产、早产、胎 膜早破、羊水感染、产后子宫内膜炎、剖腹产后的切后感染、W及胎儿宫内发育迟缓的发生 因为妊娠期感染细菌性阴道炎病而增加。目前，对于细菌性阴道炎的治疗是根据患者临床 症状使用不同的抗生素治疗，尽管见效快，但容易复发。随着现代微生态学的研究发展，发 现阴道内菌群失调、微生态环境素乱，是细菌性阴道炎发病的基础。在1892年，Dederlein首 次发表了关于人类阴道微生态菌群的研究。人们发现健康女性的阴道菌群由多种厌氧菌和 需氧菌构成。正常育龄妇女阴道分泌物中已分离到200种之多的微生物，其中最重要的是乳 杆菌，它在健康女性的阴道排出物标本中分离率高达50%~80%。现已确定定植于正常阴道 内的微生物群主要由主要是细菌、念珠菌、支原体等组成。它们主要栖居于阴道的侧壁黏膜 皱權中，其次是寫隆，部分在宫颈。细菌主要有革兰阳性需氧菌及兼性厌氧菌、革兰阴性需 氧菌及兼性厌氧菌有大肠杆菌。正常状态下，阴道内厌氧菌与需氧菌的比例为5:1，二者处 于动态平衡状态。此外，还有一些病原体，如活动弯曲杆菌、支原体及念珠菌等。在正常阴道 菌群中，乳杆菌占优势。乳杆菌为革兰阳性杆菌，微需氧，但在厌氧环境下生长更好，最适生 长溫度为35~38°C，每克阴道分泌物含有IO 7~IO8CFU乳杆菌。健康妇女阴道内可分离出20 多种乳杆菌。阴道内正常存在的乳杆菌对维持阴道正常菌群起着关键的作用。阴道鱗状上 皮细胞内的糖原经乳杆菌的作用，分解成乳酸，使阴道局部形成弱酸性环境(pH含4.5，多 在3.8~4.4)，可W抑制其他寄生菌的过度生长。此外，乳杆菌通过替代、竞争排斥机制阻止 致病微生物粘附于阴道上皮细胞。同时，分泌过氧化氨、细菌素、类细菌素和生物表面活性 剂等抑制致病微生物生长，从而维持阴道微生态环境的平衡。随着年龄的增加、衰老的出 现，阴道的酸性环境被破坏，使白色假丝酵母菌、棒状杆菌和乳杆菌减少，相反阴道内站矣链 球菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌升高，导致阴道炎的发生。通过调整妇女阴道的微生态环 境，为阴道炎的治疗提供了新的治疗方法。
【发明内容】
[0003] 本发明的一个目的是提供一种W乳酸菌发酵培养物为主要成分制备的生态妇科 外用药物组合物，该组合物由含有W下原料药的乳酸菌发酵培养物制成： 葡萄糖:2.0~4. Og/lOOml 吐溫80:0.06~0.15ml/100ml 憐酸氨二钟:0.15 ~0.30g/100ml 乙酸钢:0.3 ~0.8g/100ml 7分子结晶水硫酸儀:0. (n~0.05g/100ml 硫酸儘:0.003~0.008g/100ml 巧樣酸S锭:0.1~0.4g/100ml 可溶性淀粉:0.3~0.5g/100ml 酵母膏:0.36~1. Og/lOOml 上述原料灭菌，接种两种或两种W上益生菌菌液，经发酵后，得乳酸菌发酵培养物;在 培养物中加入一种或多种医药上可接受的添加剂，即得到所述的生态妇科外用药物组合 物。
[0004] 本发明的另一个目的是提供一种生态妇科外用药物组合物的制备方法，其步骤如 下： 上述原料调整pH值7.0并115°C灭菌40分钟，溫度降至39°C时，接种预培养的体积比各 为1.0%的两种或两种W上益生菌菌液，37±rC发酵22-26小时，抑降至4.0时，将发酵溫度 降至32 ± TC，继续发酵70-74小时，经检测，还原糖耗尽，结束发酵;将发酵液离屯、，收集离 屯、液，得乳酸菌发酵培养物;加入一种或多种医药上可接受的添加剂，即得到所述的生态妇 科外用药物组合物。
[0005] 上述药物组合物可W制成洗剂，也可W与医药上可W接受的辅料做成药学上常用 的妇科外用制剂:栓剂、凝胶剂。
[0006] 本发明的优选方案，所述的添加剂为苯扎漠锭、洗必泰、薄荷脑;医药上可接受的 辅料为径丙甲纤维素、卡波姆、泊洛沙姆、甲壳素、甘油，W及选自常规赋形剂、防腐剂的其 他常规添加剂。
[0007] 按照0.05~0.18ml/100ml的浓度加入苯扎漠锭，与乳酸菌发酵培养物的离屯、液混 合均匀，即得该药物组合物的洗剂。
[000引将离屯、液加热至90 ± 2°C，在揽拌下，加入径丙甲纤维素1.6~4. OmVlOOml，继续揽 拌并加热至微沸，保持微沸30分钟，不断揽拌冷却至55±2°C，再加入苯扎漠锭溶液0.05~ 0.18ml/100ml，薄荷脑0. . 3ml/100ml、甘油溶液 10~20ml/100ml，继续揽拌冷却至30°C W 下，即得该药物组合物的凝胶剂。
[0009] 用于本发明的益生菌是指嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌，干酪乳杆菌干酪亚种、德氏乳 杆菌保加利亚亚种，均由人体肠道菌群筛选分离得到，并在常规培养基中进行常规预培养。
[0010] 发明的再一个目的是提供本发明所述的生态妇科外用药物组合物在制备调节妇 女外生殖道生态平衡、预防和治疗妇女阴道炎的外用药物中的应用。
[0011] 为检测本发明药物组合物对引起妇科炎症的病源微生物的抑杀作用，根据卫生部 2002年版《消毒技术规范》，试验了药物组合物洗剂与凝胶剂对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、 白色念珠菌的抑菌作用。试验结果显示，本发明的药物组合物洗剂与凝胶剂对金黄色葡萄 球菌、大肠杆菌、白色念珠菌均具有抑杀作用。同时试验了对多次完整皮肤刺激试验、阴道 黏膜刺激试验、和皮肤变态反应。试验结果显示:药物组合物凝胶剂家兔多次完整皮肤刺激 试验每天每只动物积分均值为0，根据皮肤刺激反应评分和刺激强度分级标准，本发明的药 物组合物凝胶剂家兔多次完整皮肤刺激属无刺激性;药物组合物凝胶剂家兔阴道黏膜试验 刺激指数为0.89，根据阴道黏膜刺激反应评分标准和刺激强度分级标准，本发明的药物组 合物凝胶剂家兔阴道黏膜刺激属无刺激性;本发明的药物组合物凝胶剂豚鼠皮肤变态反应 试验致敏率为0%，属未见皮肤变态反应。
[0012] 实施例1生态妇科外用药物组合物A的制备 (1)乳酸菌发酵培养物A的制备 取葡萄糖3.OgAOOml、吐溫80 0. lOml/lOOml、憐酸氨二钟0.20g/100ml、乙酸钢0.5g/ 100ml、硫酸儀（7分子结晶水）0.03g/100ml、硫酸儘0.005g/100ml、巧樣酸S锭0.25g/ 100mL、可溶性淀粉0.4g/100ml、酵母膏0.68g/100ml，溶解后，调整抑7.0，115°C、40分钟灭 菌。当如上制备的发酵营养培养基的溫度降低至39°C左右时，向其中接种预培养的嗜酸乳 杆菌、植物乳杆菌菌液。两个菌种的接种量均为1.0%(体积/体积）。37± TC发酵约24小时， 再将溫度降至32±rC继续培养72小时，经检测还原糖耗尽，结束发酵，将发酵液离屯、，收集 离屯、液，得到所说的益生菌发酵培养物A。
[OOU] (2)本发明生态妇科外用药物组合物洗剂A的制备 发酵完成后加入苯扎漠锭，使苯扎漠锭的浓度为〇.115ml/100ml，揽拌均匀，即得到本 发明的药物组合物洗剂A。
[0014] (3)本发明生态妇科外用药物组合物凝胶剂A的制备 将益生菌发酵培养物800ml，加热至90 ± 2°C，在揽拌下状态下，加入径丙甲纤维素28g， 继续揽拌并加热至微沸，保持微沸30min，不断揽拌，溫度降至55±2°C时，加入苯扎漠锭溶 液，使终浓度为0.115%，取薄荷脑2g，研细，加入甘油150ml，研匀溶解，并加入到益生菌发酵 培养物中，不断揽拌，溫度降至30°C W下时，结束揽拌，即得生态妇科外用药物组合物凝胶 剂A。
[0015] 实施例2生态妇科外用药物组合物B的制备 (1)乳酸菌发酵培养物B的制备 取葡萄糖 2. OgAOOml、吐溫80 0.15ml/100ml、憐酸氨二钟 0.15g/100ml、乙酸钢 0.3g/ 100mL、硫酸儀(7分子结晶水)0.05g/100ml、硫酸儘0.003g/100ml、巧樣酸S锭0.4g/100ml、 可溶性淀粉0.3g/100ml、酵母膏1.Og/lOOml，溶解后，调整pH7.0，115°C、40分钟灭菌。当如 上制备的发酵营养培养基的溫度降低至39°C左右时，向其中接种预培养的嗜酸乳杆菌、植 物乳杆菌、德氏乳杆菌保加利亚亚种菌液，S株菌种的接种量均为1.0%(体积/体积）。37±1 °C发酵约26小时，再将溫度降至32±rC继续培养74小时，经检测还原糖耗尽，结束发酵，将 发酵液离屯、，收集离屯、液，得到所说的益生菌发酵培养物B。
[0016] (2)本发明生态妇科外用药物组合物洗剂B的制备 发酵完成后加入苯扎漠锭，使苯扎漠锭的浓度为0.OSmlAOOml，揽拌均匀，即得到本发 明的药物组合物洗剂B。
[0017] (3)本发明生态妇科外用药物组合物凝胶剂B的制备 将益生菌发酵培养物800ml，加热至90 ± 2°C，在揽拌下状态下，加入径丙甲纤维素16g， 继续揽拌并加热至微沸，保持微沸30min，不断揽拌，溫度降至55±2°C时，加入苯扎漠锭溶 液，使终浓度为0.05%，取薄荷脑1. Og，研细，加入甘油100mL，研匀溶解，并加入到益生菌发 酵培养物中，不断揽拌，溫度降至30°C W下时，结束揽拌，即得生态妇科外用药物组合物凝 胶剂B。
[0018]实施例3生态妇科外用药物组合物C的制备 (1)乳酸菌发酵培养物C的制备 取葡萄糖 4. OgAOOml、吐溫80 0.06ml/100ml、憐酸氨二钟 0.30g/100ml、乙酸钢 0. Sg/ 100mL、硫酸儀(7分子结晶水)0.0 lg/lOOml、硫酸儘0.008g/100ml、巧樣酸S锭0.1 g/lOOml、 可溶性淀粉0.5g/100ml、酵母膏0.36g/100ml，溶解后，调整抑7.0，115°C、40分钟灭菌。当如 上制备的发酵营养培养基的溫度降低至39°C左右时，向其中接种预培养的嗜酸乳杆菌、植 物乳杆菌、干酪乳杆菌干酪亚种菌液，S株菌种的