一种治疗肠道病毒感染的组合物和联合用药方法
【技术领域】
[0001 ]本发明属于生物医药领域，具体地说，本发明设及一种治疗肠道病毒感染的组合 物和联合用药方法。
【背景技术】
[0002] 肠道病毒是带有单股正链RNA的微小核糖核酸病毒科病毒，目前共发现多于100种 血清型。多数肠道病毒感染并不引起严重的症状或仅仅引起较轻微的疾病，但在儿童和免 疫缺陷人群中通常造成严重后果W。肠道病毒属中的肠道病毒71型化V71)和柯萨奇病毒 A16(CVA16)是引起亚太地区婴幼儿手足口病的主要病原体W。手足口病的症状通常较轻微 如发热、咽痛、腹泻、局部出疹等，但也有些病人会发展成中枢神经系统(CNS)疾病，如无菌 性脑膜炎、致死性脑炎甚至死亡而EV71是引起重症手足口病的主要病原体W。迄今为 止尚无有效针对肠道病毒感染的药物治疗手段，现有的治疗手段仅限于支持性护理、静脉 注射免疫球蛋白或利己韦林因此寻找抗病毒药物迫在眉睫。肠道病毒使用病毒自身的 RNA依赖性RNA聚合酶合成基因组，所W在RNA复制过程中，子代RNA很容易发生突变。
[0003] 因此，为了有效地预防或治疗肠道病毒感染，本领域迫切需要开发新型的预防和/ 或治疗肠道病毒感染的技术。
【发明内容】
[0004] 本发明的目的在于提供一种治疗肠道病毒感染的组分和联合用药方法。
[0005] 本发明的第一方面，提供了一种抑制肠道病毒组合物，所述组合物包括第一活性 成分和第二活性成分，
[0006] 其中，所述第一活性成分为肠道病毒(如，EV71)的3D蛋白抑制剂；
[0007] 所述第二活性成分为肠道病毒(如，EV71)的衣壳蛋白抑制剂。
[000引在另一优选例中，所述第一活性成分特异性结合肠道病毒的3D蛋白的第121位氨 基酸残基(优选为丝氨酸残基），其中氨基酸残基编号基于SEQ ID NO.1。
[0009] 在另一优选例中，所述第一活性成分包括法匹拉韦、其类似物、或其药学上可接受 的盐；
[0010] 所述第二活性成分包括苏拉明、其类似物、或其药学上可接受盐。
[0011] 在另一优选例中，所述法匹拉韦的类似物包括对肠道病毒的作用祀点与法匹拉韦 相同的物质。
[0012] 在另一优选例中，所述苏拉明的类似物包括对肠道病毒的作用祀点与苏拉明相同 的物质。
[0013] 在另一优选例中，所述肠道病毒选自下组:肠道病毒71型化V71)、柯萨奇病毒A16 (CVA16)、CVB3型、PVl型或EV68型，W及鼻病毒。
[0014] 在另一优选例中，所述第一活性成分和第二活性成分的摩尔比约为10~100:1~ 20，优选地为10~100:1~10,更更优选地为10~100:1~5。
[0015] 在另一优选例中，所述第一活性成分具有肠道病毒(如，EV71)的3D蛋白抑制活性。
[0016] 在另一优选例中，所述第二活性成分具有肠道病毒(如，EV71)的衣壳蛋白抑制活 性。
[0017] 在另一优选例中，所述组合物中还包括药学上可接受的载体或赋形剂。
[0018] 在另一优选例中，所述药物组合物的剂型包括片剂、颗粒剂、胶囊、丸剂、注射剂、 或口服液。
[0019] 在另一优选例中，所述的组合物为单元剂型，每个单元剂型中所述第一活性成分 和所述第二活性成分的含量约为日剂量的0.1至1(或0.25-1，或0.5-1)，其中所述日剂量为 20-100mg〇
[0020] 在另一优选例中，所述的日剂量为25-70mg，如25mg、40mg、50mg。
[0021] 本发明的第二方面，提供了如本发明第一方面所述的抑制肠道病毒组合物的用 途，用于制备预防和/或治疗肠道病毒感染的药物。
[0022] 本发明的第=方面，提供了一种预防和/或治疗肠道病毒感染的方法，所述方法包 括步骤：
[0023] 给需要的对象施用本发明第一方面所述的抑制肠道病毒组合物，从而抑制所述对 象体内的肠道病毒。
[0024] 在另一优选例中，所述的对象包括人和非人哺乳动物(如晒齿动物）。
[0025] 在另一优选例中，所述的施用的用量为lO-lOOmg/kg体重，较佳地15-70mg/kg体 重，更佳地10-50mg/kg体重，W所述第一活性成分的重量计。
[0026] 本发明的第四方面，提供了一种体外非治疗性地抑制肠道病毒生长或者杀灭肠道 病毒的方法，包括步骤:在需要处理的场所使用本发明的第一方面所述的抑制肠道病毒组 合物。
[0027] 本发明的第五方面，提供了法匹拉韦、其类似物、或其药学上可接受盐在制备试剂 中的用途，所述试剂用于：
[0028] (I)抑制肠道病毒3D蛋白的合成，和/或
[0029] (II)特异性结合肠道病毒3D蛋白的第121位氨基酸残基，其中氨基酸残基编号基 于沈Q ID NO. 1。
[0030] 在另一优选例中，所述肠道病毒3D蛋白的第121位氨基酸残基为丝氨酸。
[0031] 在另一优选例中，所述试剂还用于：（111)抑制肠道病毒的复制。
[0032] 在另一优选例中，所述肠道病毒为肠道病毒71型。
[0033] 本发明的第六方面，提供了一种复合物，所述复合物如式I所示
[0034] A-B (I)
[0035] 其中，A为法匹拉韦或其类似物;B为肠道病毒的3D蛋白。
[0036] 在另一优选例中，所述复合物中，A和B的结合位点包括肠道病毒3D蛋白的第121位 氨基酸残基，其中氨基酸残基编号基于SEQ ID NO.1。
[0037] 本发明的第屯方面，提供了一种肠道病毒耐药毒株，所述毒株的3D蛋白发生了突 变，并且所述突变导致所述肠道病毒产生了耐药性。
[0038] 在另一优选例中，所述突变发生在3D蛋白的第121位氨基酸残基。
[0039] 在另一优选例中，所述3D蛋白的第121位氨基酸残基由丝氨酸残基突变为天冬氨 酸残基。
[0040] 在另一优选例中，所述毒株为肠道病毒71型毒株。
[0041] 本发明的第八方面，提供了本发明第屯方面所述的耐药毒株的用途，用于筛选抑 制或杀灭肠道病毒的药剂或试剂。
[0042] 本发明的第九方面，提供了一种本发明所述的肠道病毒耐药毒株的抑制剂，所述 抑制剂能抑制或杀灭本发明第屯方面所述的的耐药毒株。
[0043] 本发明的第十方面，提供了一种筛选药物的方法，所述方法包括:将待筛选药物与 肠道病毒或者肠道病毒的3D蛋白接触，并检测是否形成式II所述的复合物，
[0044] A'-B (II)
[0045] 其中，A'为待筛选药物;B为肠道病毒的3D蛋白.
[0046] 在另一优选例中，所述复合物中，A'和B的结合位点包括肠道病毒3D蛋白的第121 位氨基酸残基，其中氨基酸残基编号基于SEQ ID NO. 1
[0047] 在另一优选例中，所述待筛选药物包括法匹拉韦、其类似物、或其药学上可接受 ±h rm. O
[004引本发明的第十一方面，提供了一种肠道病毒的抑制剂，所述抑制剂W肠道病毒3D 蛋白为祀点，抑制所述肠道病毒的生长或繁殖。
[0049] 在另一优选例中，所述抑制剂W肠道病毒3D蛋白的第121位氨基酸残基为祀点，其 中氨基酸残基编号基于SEQ ID NO. 1。
[0050] 在另一优选例中，所述抑制剂选自法匹拉韦、其类似物、或其药学上可接受盐。
[0051] 应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例）中具 体描述的各技术特征之间都可W互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在 此不再一一累述。
【附图说明】
[0化2]图1.伊曲康挫、芦平曲韦、法匹拉韦、苏拉明和GW5074抑制EV71的感染。其中，图IA 显示了各化合物对EV71的抑制效果及对细胞的毒性作用；图IB显示了显示了不同浓度的各 化合物对病毒滴度的影响.
[0053] 图2.法匹拉韦通过作用于肠道病毒71型3D蛋白抑制病毒复制。
[0054] 图3.不同药物组合在治疗EV71感染中的相互作用效果。
【具体实施方式】
[0055] 本发明人通过广泛而深入的研究，首次意外地发现了一种抑制肠道病毒组合物， 所述组合物中W法匹拉韦为第一活性成分，W苏拉明为第二活性成分，实验结果表明，此药 物组合具有显著的协同作用，而且在被测浓度组合下均未发现增强的细胞毒性。
[0056] 本发明公开了能够有效抑制肠道病毒感染的联合用药方法。针对肠道病毒的抑制 活性，本发明人经过大量的测试意外的发现法匹拉韦和苏拉明表现出显著地协同作用。而 且上述药物组合，在被测浓度组合下均未发现增强的细胞毒性。法匹拉韦和苏拉明组合能 够阻止耐药病毒的产生。此外本发明人还发现法匹拉韦通过作用于EV71的3D蛋白来抑制病 毒复制，该位点可W作为潜在的祀点用W开发抗病毒药物。
[0057] 在描述本发明之前，应当理解本发明不限于所述的具体方法和实验条件，因为运 类方法和条件可W变动。还应当理解本文所用的术语其目的仅在于描述具体实施方案，并 且不意图是限制性的，本发明的范围将仅由所附的权利要求书限制。
[0058] 除非另外定义，否则本文中所用的全部技术与科学术语均具有如本发明所属领域 的普通技术人员通常理解的相同含义。如本文所用，在提到具体列举的数值中使用时，术