一种含有水飞蓟宾、左旋肉碱的药物组合物的制作方法
【专利摘要】本发明公开了一种药物组合物，其是由下述重量比的原料药制成：水飞蓟宾8.75?60份，磷脂15?65份，普洱茶提取物25?150份，左旋肉碱10.425?60份；该药物具有治疗非酒精性脂肪肝的作用。
【专利说明】
一种含有水飞蓟宾、左旋肉碱的药物组合物
技术领域
[0001] 本发明涉及医药领域，尤其是治疗肝病的含水水飞蓟宾的药物组合物。
【背景技术】
[0002] 20世纪60-80年代末，以H.wagner为代表的西德药学家从菊科水飞蓟属植物水飞 蓟（SiIybummarianum)果实中提取分离其有效成分，称之为水飞蓟素，是一类新型的具有 C一9取代基的黄酮类化合物，即以二氢黄酮醇和苯丙素类衍生物缩合而成的黄酮木脂素 类。水飞蓟宾（Silybin，silibinin)系水飞蓟的主要成分之一。经药理和毒理研究，表明其 具有明显的保护及稳定肝细胞膜，促进肝细胞恢复，改善肝功能的作用。对各种毒物，如四 氯化碳、硫代乙酰胺、毒蕈碱、鬼笔碱、猪屎豆碱等引起的肝损伤均具有不同程度的保护治 疗作用。可用于急慢性肝炎、早期肝硬化、脂肪肝、中毒性或药物性肝病。
[0003] 由于水飞蓟宾难溶于水及一般有机溶剂，口服吸收差，其生物利用度较低，从而影 响了其临床疗效。为改善其生物利用度，国内外药学工作者作了大量的工作。改善难溶性药 物吸收的措施一般有超细粉碎、成盐，添加助溶剂等。近年来采用制成环糊精包合物、固体 分散体，合成磷脂复合物，制成不同剂型等方法，研究表明，溶出度及生物利用度大大提高。
[0004] 从固体制剂角度来看，磷脂复合物为一种较为特殊的固体分散体，他有固定的熔 点，是一种其化学本质较稳定，不同于药物和磷脂的分子化合物(络合物），该类化合物随磷 脂种类及药物磷脂比例的不同而不同，一个磷脂分子可与不同数目的药物分子结合。复合 物光谱学特征推断，药物与磷脂的极性基团部分发生了较强的相互作用，抑制了分子中单 链的自由转动，而磷脂的两个长脂肪酸链不参与复合反应，可自由移动，包裹了磷脂的极性 部分形成一个亲脂性的表面，使复合物表现出较强的脂溶性。它改变了药物的理化性质，使 药物的脂溶性增加，水溶性减少。促进药物分子与细胞膜结合而促进吸收，提高药物的生物 利用度。普洱茶是云南特有的地方名茶。产地气候温和，雨量充沛，云雾缭绕。普洱茶。是以 云南原产地的大叶种晒青茶及其再加工而成两个系列:直接再加工为成品的生普和经过人 工速成发酵后再加工而成的熟普，型制上又分散茶和紧压茶两类;成品后都还持续进行着 自然陈化过程，具有越陈越香的独特品质。
[0005] 普洱茶是惟一的后发酵型的茶，它的茶碱、茶多酚等对人体有害的物质在长期的 发酵过程中被分化掉了，因此品性温和，对人体不刺激，还能够促进新陈代谢，加速身体内 脂肪、毒素的消解和转化，现在困扰都市人的肥胖、三脂高等问题，普洱茶都能够起到很好 的缓解作用，如排毒、养胃、消炎、降低胆固醇、消脂去腻、美容减肥。现代技术表明，普洱茶 具有改善胰岛素抵抗、调节血脂和瘦素水平等作用可一定程度阻断机体胰岛素抵抗所带来 的肝脏实质细胞脂肪堆积等作用。
[0006] 非酒精性脂肪性肝病(non-alcoholic fatty liver disease,NAFLD) -种与膜岛 素抵抗和遗传易感密切相关的代谢应激性肝脏损伤，其病理学改变与酒精性脂肪肝病相 似。是一种病变主体在肝小叶以肝细胞脂肪变性和脂肪贮积为病理特征但无过量饮酒史的 临床病理综合征.NAFLD表现不同程度的肝脏病变，从没有任何炎症的单纯脂肪肝至显著纤 维化甚至肝硬化的严重炎症反应，主要包括单纯性脂肪肝、脂肪性肝炎、脂肪性肝硬化3种 类型.
[0007] 非酒精性脂肪肝病治疗方法
[0008] 1.防治原发病或相关危险因素
[0009] 2.基础治疗：制定合理的能量摄人以及饮食结构调整、中等量有氧运动、纠正不良 生活方式和行为。
[0010] 3.避免加重肝脏损害：防止体重急剧下降、滥用药物及其他可能诱发肝病恶化的 因素。
[0011] 4.减肥:所有体重超重、内脏性肥胖以及短期内体重增长迅速的NAFLD患者，都需 通过改变生活方式控制体重、减少腰围。基础治疗6个月体重下降每月〈0.45kg，或体重指数 (BMI )>27kg/m2合并血脂、血糖、血压等两项以上指标异常者，可考虑加用西布曲明或奥利 司他等减肥药物，每周体重下降不宜超过1.2Kg(儿童每周不超过0.5Kg) ;BMI>40kg/m2或 BMI>35kg/m2合并睡眠呼吸暂停综合征等肥胖相关疾病者，可考虑近端胃旁路手术减肥 (Π _1，Π _2，Π _3，m) 〇
[0012] 5.胰岛素增敏剂:合并2型糖尿病、糖耐量损害、空腹血糖增高以及内脏性肥胖者， 可考虑应用二甲双胍和噻唑烷二酮类药物，以期改善胰岛素抵抗和控制血糖（Π -1，Π -2， Π ~3) 〇
[0013] 6.降血脂药:血脂紊乱经基础治疗和(或)应用减肥降糖药物3-6个月以上，仍呈混 合性高脂血症或高脂血症合并2个以上危险因素者，需考虑加用贝特类、他汀类或普罗布考 等降血脂药物（Π -1，Π -2，Π -3)。
[0014] 7.针对肝病的药物:NAFLD伴肝功能异常、代谢综合征、经基础治疗3~6个月仍无 效，以及肝活体组织检查证实为NASH和病程呈慢性进展性经过者，可采用针对肝病的药物 辅助治疗，以抗氧化、抗炎、抗纤维化，可依药物性能以及疾病活动度和病期合理选用多烯 磷脂酞胆碱、维生素 E、水飞蓟素以及熊去氧胆酸等相关药物（11-1，11-2，11-3，111)，但不宜 同时应用多种药物。
[0015] 8.肝移植:主要用于NASH相关终末期肝病和部分隐源J睦肝硬化肝功能失代偿患 者的治疗，肝移植前应筛查代谢情况(III)。BMI>40kg/m2为肝移植的禁忌证(m)。
[0016] 在上述治疗方法还没有将几种治疗方法混合使用的方法，例如降糖和肝病药物同 用，或者降血脂和肝病药物同用的方法。因此，寻找一个能够具有多种保健功能的药物是迫 不及待的。
【发明内容】
[0017] 为了解决上述技术问题，本发明提供一种药物组合物及其制剂，对非酒精性脂肪 肝的有疗效。
[0018] 本发明提供了该药物组合物及其制剂的制备方法。
[0019] 本发明是通过以下技术方案实现的：
[0020] -种药物组合物，其是由下述重量比的原料药制成 水飞蓟宾 8. 75-60汾 憐脂 15-65份
[0021] 普洱茶提取物 25-150份 左旋肉碱 5.2-60份
[0022]优选其是由下述重量比的原料药制成： 水飞蓟宾 25-40份 磷脂 30-50份
[0023] 普洱茶提取物 80-120份 左旋肉碱 35-50份
[0024]最优选其是由下述重量份的原料制成 水飞蓟宾 35份 磷脂 42份
[0025] 普洱茶提取物 100份 左旋肉碱 41.7份
[0026] 本发明所述的磷脂是以磷脂酰胆碱为主的大豆磷脂或卵磷脂，优选大豆磷脂。
[0027] 磷脂在本发明中的作用在于:促进药物溶解与吸收，水飞蓟宾属低溶低渗药物，磷 脂与其结合形成磷脂复合物后，可提高水飞蓟宾溶解性，从而提高药物的生物利用度。
[0028] 所述的水飞蓟宾，磷脂均为现有技术，或者市购。为了更好的发挥本发明的疗效， 本发明的水飞蓟宾优选如下方法制备，取水飞蓟素，分别用80%乙醇溶解，过滤，沉淀用 95 %乙醇溶解洗脱三次，收集沉淀。沉淀用无水乙醇溶解，过滤，滤液加入一定量水使沉淀 析出，过滤，收集沉淀，减压干燥，粉碎，混合即可。
[0029] 所述的普洱茶提取物市购，优选帝泊洱普洱茶珍。还可以按照现有技术制备，为了 更好的发挥本发明的疗效，优选普洱茶珍或普洱茶提取物是按照专利公开号 CN101961061A、CN101961061B、CN101961425A、CN101961425B、CN101961060A、 CN101961059A、CN101961059B 制备。
[0030] 例如，普洱茶珍生产工艺
[0031] 步骤1，普洱茶叶加水煎煮提取2-4次，每次0.5~2小时，6-12倍体积的水，提取液 过滤，滤液在< 70°C条件下减压浓缩至茶叶重量:浓缩液体积=1:2-1:3;
[0032] 步骤2,浓缩液用离心机离心，离心液减压浓缩至45-65°C比重1.1-1.25,浓缩膏喷 雾干燥或微波干燥，即得。
[0033] 优选的，步骤如下：
[0034]步骤1，普洱茶叶加水剧烈沸腾煎煮提取3次，每次0.5~2小时，加水量6-12倍体积 的水;提取液过滤，滤液在< 70°C条件下减压浓缩至茶叶重量:浓缩液体积=1:2-1:3; [0035] 步骤2,浓缩液用三足离心机离心，三足离心液用管式离心机离心，离心液减压浓 缩至45-65 °C比重1.1-1.25，浓缩膏喷雾干燥或微波干燥，即得；
[0036]其中管式离心条件:离心机转速：15000-19000转/min;喷雾干燥条件:进风温度： 140-190 °C，出风温度：75-95 °C。
[0037]最优选的，步骤如下:普洱茶叶加水剧烈沸腾煎煮提取3次，第1次煎煮I. 5h，加水 10倍体积;第2次煎煮1.5h，加水8倍体积;第3次煎煮Ih，加水8倍体积，提取液过滤，滤液在 <70°C条件下减压浓缩至茶叶重量:浓缩液体积=1:2-1:3，浓缩液用三足离心机离心，三 足离心液用管式离心机离心，离心液减压浓缩至45-65°C比重1.1 一 1.25,浓缩膏喷雾干燥 或微波干燥，即得；
[0038]其中管式离心条件:离心机转速：15000-19000转/min;喷雾干燥条件:进风温度： 140-190 °C，出风温度：75-95 °C。
[0039] 所述的左旋肉碱，为市售可供膳食补充或药用的左旋肉碱，左旋肉碱酒石酸盐中 的任意一种。
[0040] 以上组成是按重量作为配比的，在生产时可按照相应比例增大或减少，如大规模 生产可以以kg为单位，或以t(吨)为单位;小规模制剂也可以以g为单位。重量可以增大或者 减小，但各组成之间的生药材重量配比的比例不变。
[0041] 以上重量配比的比例是经过科学筛选得到的，对于特殊病人，如重症或轻症，肥胖 或瘦小的病人，可以相应调整组成的量的配比，增加或减少不超过10%，药效基本不变。
[0042] 在制成药物制剂时可以制成任何可药用的剂型，这些剂型选自：片剂、糖衣片剂、 薄膜衣片剂、肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、丸剂、散 剂、膏剂、丹剂、混悬剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、贴剂。优选的 是口服制剂形式，最佳优选的是片剂，胶囊剂，颗粒剂。
[0043] 本发明的组合物，根据需要可以加入一些药物可接受的载体，可以采用制剂学常 规技术制备该药物制剂，如将药物活性物质与药物可接受的载体混合。所述药物可接受的 的载体选自：甘露醇、山梨醇、山梨酸或钾盐、焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、硫代硫酸钠、盐酸半 胱氨酸、巯基乙酸、蛋氨酸、维生素 A、维生素 C、维生素 E、维生素 D、氮酮、EDTA二钠、EDTA钙 钠，一价碱金属的碳酸盐、醋酸盐、磷酸盐或其水溶液、盐酸、醋酸、硫酸、磷酸、氨基酸、氯化 钠、氯化钾、乳酸钠、木糖醇、麦芽糖、葡萄糖、果糖、右旋糖苷、甘氨酸、淀粉、蔗糖、乳糖、甘 露糖醇、硅衍生物、纤维素及其衍生物、藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、甘油、丙二醇、乙醇、 土温60-80、司班-80、蜂蜡、羊毛脂、液体石蜡、十六醇、没食子酸酯类、琼脂、三乙醇胺、碱性 氨基酸、尿素、尿囊素、碳酸钙、碳酸氢钙、表面活性剂、聚乙二醇、环糊精、β-环糊精、磷脂 类材料、高岭土、滑石粉、硬脂酸钙、硬脂酸镁等。优选所述的载体为微晶纤维素、乳糖、淀 粉、羧甲基纤维素钠、低取代羟丙基纤维素、滑石粉中不含或含有一种或以上。
[0044] 本发明的组合物，在制成药剂时，单位剂量的药剂可含有本发明的药物活性物质 0.1-1000mg，其余为药学上可接受的载体。药学上可接受的载体以重量计可以是制剂总重 量的0-99.9%。优选所述的药学上可接受的载体以重量计可以是制剂总重量的40-70%。
[0045] 本发明的中药组合物或制剂在使用时根据病人的情况确定用法用量。
[0046] 本发明所述的药物组合物制剂，例如片剂、胶囊剂、颗粒剂等，在溶出条件:浆法， 转速为IOOrpm，温度为37°C，释放介质为:pHl. 2的盐酸溶液1000 ml，投药量：1粒胶囊/1片/1 袋颗粒。其体外溶出2h累积溶出度不低于80%，30min时溶出度大于等于15%。
[0047] 本发明的一种药物组合物的制备方法，包括如下步骤：
[0048] ①取处方量的原料备用；
[0049] ②水飞蓟宾复合液的制备:称取处方量水飞蓟宾、磷脂溶解到无水乙醇中，加热回 流使溶液澄清后再继续加热一定时间，再将澄清溶液减压浓缩至一定体积，得到水飞蓟宾 复合液，备用；
[0050] ③制粒:称取处方量普洱茶提取物作为底料，以②中制备得水飞蓟宾复合液为料 液，以流化床流化喷液方式制颗粒，待液态复合物全部喷入后，干燥，备用；
[0051] ④总混:取左旋肉碱与步骤③颗粒按等量递增方式混合均匀即得药物组合物。 [0052]本发明还包括制剂步骤⑤，取步骤④药物组合物与药学上可接受的载体，按照常 规制剂工艺制成药学上可接受的剂型。
[0053]进一步优选本发明的制备方法，包括如下步骤：
[0054]①取处方量的原料备用；
[0055] ②水飞蓟宾复合液的制备:称取处方量水飞蓟宾、磷脂溶解到无水乙醇中，加热回 流使溶液澄清后再继续加热一定时间，再将澄清溶液减压浓缩至一定体积，得到水飞蓟宾 复合液，备用；
[0056] ③制粒:称取处方量普洱茶提取物作为底料，以②中制备得水飞蓟宾复合液为料 液，以流化床流化喷液方式制颗粒，待液态复合物全部喷入后，干燥，备用；
[0057]④总混:左旋肉碱与步骤③颗粒按等量递增方式混合均匀即得药物组合物；
[0058]⑤制剂:取药物组合物与药学上可接受的载体制成常规制剂。
[0059] 其中步骤②中所述的加热时间为0.5~1.5小时；所述的浓缩的体积为原体积的 5 %~20 %，减压浓缩温度为60~80 °C。
[0060] 其中步骤③中流化床的参数为:物料温度40~65°C，制粒过程调节风机频率，进风 温度和输液频率等参数，保持物料良好流化状态。
[0061 ] 制粒完成后，干燥10-60分钟，干燥温度为55~65°C。
[0062]普洱茶可改善胰岛素抵抗、调节血脂和瘦素水平等作用可一定程度阻断机体胰岛 素抵抗所带来的肝脏实质细胞脂肪堆积，同时联合水飞蓟宾较强的自由基清除和抗氧化应 激能力，二者具有较好的抗NAFLD(非酒精性脂肪性肝病)效果。增加 Ve，进一步提升产品美 容养颜的功效，增加左旋肉碱，强化产品的降脂减肥功效。
[0063]试验例一体外溶出试验
[0064] 在以下条件下测定实施例17-21制得的水飞蓟宾-磷脂-普洱茶-左旋肉碱组合物 的溶出：溶出方法的选择是基于组合物中主要组份水飞蓟宾的性质而定，水飞蓟宾属生物 药剂学分类系统(BCS)中第四类，低溶低渗药物，溶出、吸收均为限速步骤，提高药物生物利 用度应当从提高药物溶出与吸收两方面同时解决。水飞蓟宾的溶出阶段主要在胃中进行， 吸收阶段主要在小肠中进行，检测药物体外溶出度有助于提高药物生物利用度。因此选择 以下溶出方法进行组合物溶出评价:浆法，转速为IOOrpm，温度为37 °C，释放介质为:pHl. 2 的盐酸溶液1000ml，投药量：1粒胶囊/1片/1袋颗粒。取样点分别为：15、30、45、60、90、 120min。测定其累积溶出度。结果如下述表1所示。
[0065] 表 1
[0067] 对参比制剂(水飞蓟宾-磷脂复合物制剂，实验室自制)进行溶出测定，与实施例17 ~21制备的水飞蓟宾-磷脂-普洱茶-左旋肉碱组合物进行比较，结果见图1。从表1的数据及 图1的曲线可以看出：
[0068] 采用本发明的制备方法制得的水飞蓟宾-磷脂-普洱茶-左旋肉碱组合物，其体外 释放均显著优于参比制剂水飞蓟宾-磷脂复合物，令人惊奇的是，组合物在PHI.2的盐酸溶 液中2h的累积溶出度达到80%，近乎完全溶出，较参比制剂溶出度提高了一倍，解决了水飞 蓟宾一直以来存在的溶解度小，生物利用度低的难题，将为后续水飞蓟宾组合物的剂量设 定及体内安全性和有效性的研究提供依据。
[0069] 综合体外溶出试验和体内药效研究的数据，本发明通过延续水飞蓟宾与磷脂复合 后提高药物与生物膜的相容性改善药物的吸收，进一步通过将水飞蓟宾-磷脂复合物与普 洱茶、左旋肉碱组合后提高药物的溶出，从提高溶出与吸收两方面共同提高主要组份水飞 蓟宾的生物利用度。
[0070] 试验例二体内药效试验
[0071] 1实验动物
[0072] 6周龄雄性C57BL/6J瘦素缺失小鼠（ob/ob)小鼠80只，SPF级，6周龄雄性C57BL/6J (ob/m)小鼠10只，SPF级，由北京华阜康生物科技股份有限公司提供，饲养于天士力研究院 药理毒理研究中心屏障动物房，温度20°C~25°C，相对湿度60%，每笼5只，照明时间12小 时，定时定量添加饲料，ob/ob小鼠采用高脂饲料喂养(HFD，D12492)，C57BL/6J小鼠采用普 通饲料喂养，均由北京华阜康生物科技股份有限公司提供，自由饮水，每日更换垫料。
[0073] 2受试物
[0074]水飞蓟宾磷脂复合物，由天士力制药集团股有限公司提供，批号500902031;普洱 茶珍，棕褐色粉末，由天士力制药集团股有限公司提供，批号Z001PE(2014)C06(H);左旋肉 碱酒石酸盐(含左旋肉碱68.4% )，由东北制药集团股份有限公司提供，批号0661504001;以 上受试物均存放于药理所供试品室样品柜内，避光室温下保存。
[0075] 3实验方法
[0076] 3.1实验剂量设计及分组
[0077]水飞蓟宾磷脂复合物按人日用量为3g(含水飞蓟宾420mg、大豆磷脂504mg、）计算 该实验动物给药剂量;普洱茶提取物按人日用量为1.2g计算该实验动物给药剂量;5种不同 组合物的配伍比例以及实验剂量设计见表1，实验动物的剂量均设为相应受试物的临床等 效剂量，计算公式如下：
[0078] 动物实验剂量=推荐人用剂量/60kg*12.3
[0079] 表1不同组合物的给药剂量
[0081] 3.2受试物给予
[0082]经适应性喂养1周后，将80只6周龄的ob/ob小鼠随机分为8组，分别为模型组、水飞 蓟宾磷脂复合物组、普洱茶提取物组、组合1组、组合2组、组合3组、组合4组、组合5组，每组 10只。另外10只6周龄的C57BL/6J小鼠为正常组。正常组小鼠给予普通饲料喂养，模型组和 给药组均以高脂饲料喂养(HFD，D12492)。另外，不同药物干预组小鼠灌胃给予相应剂量的 药物，五种组合物剂量见表1，正常组和模型组均给予等量蒸馏水，连续灌胃6周。
[0083]小鼠在实验期间自由进食和饮水，每周称体重一次，根据体重调整用药量。末次给 药后禁食不禁水12h，称量体重，摘眼球取血后断颈处死小鼠，迅速解剖摘取肝脏，生理盐水 漂洗，滤纸吸干称重后置于_20°C冰箱中保存。
[0084] 3.3检测指标及方法
[0085] 3.3.1-般情况的观察
[0086] 实验期间每周称一次各组小鼠的体重。
[0087] 3.3.2计算肝指数并观察肝脏大体形态
[0088] 实验结束后取肝脏称重，计算肝脏指数，肝指数（％ )=肝湿重/体重*100 %。3.3.3 血清生化指标检测
[0089] 所有小鼠经摘眼球取血，3000r/min离心15分钟，分离血清，收集于EP管中，置于-20 °C冰箱保存备用。采用7020全自动生化仪检测血清中谷草转氨酶（AST)、谷丙转氨酶 (ALT)、总胆固醇(TC、）、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量。
[0090] 3.3.4胰岛素抵抗指数
[0091] 采用Elisa试剂盒检测血清FINS，并通过公式计算胰岛素抵抗指数。 Γ ? , , FBG x FI NS 0092] Homo-IR=-- 22.5
[0093] 3.3.5肝脏组织病理学检测
[0094] 取冰冻肝组织制备冰冻切片，釆用油红〇染色观察肝脏脂肪变性程度。油红〇染色 操作步骤:冰冻切片-蒸馏水充分洗涤-油红〇稀释液避光染10-15分钟-取出油红0饱和 液6ml，加蒸馏水4ml，静置5-10分钟后过滤后使用-60%乙醇镜下分化至间质清晰-水洗 -苏木素复染核-水洗-中性树胶封片-显微镜观察。
[0095] 3.4数据处理
[0096]统计学方法采用SPSS 15.0统计学软件进行分析，数据以均数土标准差表示，采用 t检验，分析比较各组治疗前后以及组间各项观察指标有无差异，以P〈0.05为差异有统计学 意义。
[0097] 4实验结果
[0098] 4.1各受试物对体重的影响
[0099] 实验期间每周称一次各组小鼠的体重，考察各组药物非酒精性脂肪肝小鼠体重的 影响。如表2,正常照组小鼠体重增长缓慢，模型组小鼠体重增长较快。给药6周后，除水飞蓟 宾磷脂复合物组外，其他各给药组均能不同程度地抑制小鼠体重增长(P<〇.01)，各组间没 有明显差异。
[0100] 表2各受试物对小鼠体重的影响(g，η = 10，i±:S)
[0103] *与模型组比较P<0.05;#与模型组比较P<0.01;
[0104] 4.2各受试物对肝脏指数的影响
[0105]如表3所示，与正常组比较，模型组小鼠体重，肝脏湿重及肝脏指数均明显增大(P <〇.〇1)，各受试物均能明显降低小鼠肝脏湿重及肝脏指数(P<〇.01)。
[0106]表3各受试物对小鼠肝脏指数的影响
L0108J *与模型组比较P<0.05;#与模型组比较P<0.01;
[0109] 4.3各受试物对血脂、肝功能及胰岛素抵抗指数的影响
[0110] 如表4所示，与正常组比较，非酒精性脂肪肝模型小鼠血清1'(：、0)^1^^51'及胰岛 素抵抗指数均明显升高(P<〇.05);水飞蓟宾磷脂复合物各异常升高指标均未见明显的改 善(P>0.05);不同比例的水飞蓟宾磷脂复合物、普洱茶提取物、左旋肉碱配伍组，除组合物 5对血清AST未见明显改善外(P>0.05)，其他各组合物均可显著降低TC、LDL-C、ALT、ASI\S 胰岛素抵抗指数(P<〇.05)，且效果优于水飞蓟宾磷脂复合物、普洱茶提取物单独使用。
[0111]表4各受试物对小鼠血脂、肝功能及胰岛素抵抗指数的影响
[0114] *与模型组比较P<0.05;#与模型组比较Ρ<0·01;
[0115] 4.4各受试物对小鼠肝脏病理的影响
[0116] 油红0染色:根据肝冰冻组织油红0染色光镜下肝细胞内红色颗粒的大小与多少， 分为轻度、中度、重度三型。轻度，即光镜下每单位面积见1/3-2/3的红色颗粒，评为1分；中 度，即2/3以上的肝细胞内含红色颗粒，评为2分;重度，即几乎所有的肝细胞内均有红色颗 粒，评为3分;未见脂肪变性评为0分。
[0117] 如表5所示，模型组肝脏组织几乎所有的肝细胞均发生脂肪变性，病理评分较正常 组明显升高(Ρ<〇.01);单独使用水飞蓟宾磷脂复合物或普洱茶提取物对肝脏病理评分未 见明显改善(Ρ>〇.05);不同比例的普洱茶提取物、水飞蓟宾磷脂复合物、左旋肉碱搭配使 用可明显改善肝脏脂肪变性，降低病理评分(Ρ<〇.05)，效果优于水飞蓟宾磷脂复合物、普 洱茶提取物单独使用。
[0118] 表5各受试物对小鼠肝脏病理的影响
[0121] *与模型组比较P<0 · 05 与模型组比较P<0 · 01;
[0122] 5实验结论
[0123] 以上实验结果表明：与空白组相比，非酒精性脂肪肝模型组小鼠体重、肝脏指数、 血脂、ALT、AST、胰岛素抵抗指数均明显升高，肝脏组织重度脂肪变性。普洱茶可改善胰岛素 抵抗、调节血脂，左旋肉碱也具有较好的降血脂功效，同时联合水飞蓟宾较强的自由基清除 和抗氧化应激能力，三者配合使用对肝脏脂肪变性具有明显的改善，效果优于二者单独使 用。
【附图说明】
[0124] 图1为体外释放曲线，其中，各样品为：参比制剂水林佳，无普洱茶的水林佳，实施 例16~20制备的水飞蓟宾-磷脂-普洱茶组合物。 具体实施例
[0125] 通过以下具体实施例对本发明作进一步的说明，但不作为本发明的限制。
[0126] 实施例1
[0127] 取水飞蓟宾26.25g、大豆磷脂45g、普洱茶提取物75g、左旋肉碱15.6g。
[0128] ①水飞蓟宾复合液的制备:称取处方量水飞蓟宾、大豆磷脂溶解到无水乙醇中，加 热回流使溶液澄清后继续加热1小时，减压浓缩回收乙醇至原体积的15%，备用；
[0129] ②制粒:称取处方量普洱茶提取物作为底料，以①中制备得水飞蓟宾复合液为料 液，以流化床流化喷液方式制粒，控制物料温度为40摄氏度，待液态复合物全部喷入后，干 燥20min，干燥温度为60摄氏度，备用；
[0130]③将处方量的左旋肉碱与步骤②制得的颗粒按等量递增方式混合均匀，装袋，制 成1000袋颗粒。
[0131] 实施例2
[0132] 取水飞蓟宾180g、大豆磷脂195g、普洱茶提取物450g、左旋肉碱180g。
[0133] ①水飞蓟宾复合液的制备:称取处方量水飞蓟宾、大豆磷脂溶解到无水乙醇中，加 热回流使溶液澄清后继续加热1.5小时，减压浓缩回收乙醇至原体积的20%，备用；
[0134] ②制粒:称取处方量普洱茶提取物作为底料，以①中制备得水飞蓟宾复合液为料 液，以流化床流化喷液方式制粒，控制物料温度为65摄氏度，待液态复合物全部喷入后，干 燥60min，干燥温度为65摄氏度，备用；
[0135] ③将处方量的左旋肉碱与步骤②制得的颗粒按等量递增方式混合均匀，装袋，制 成1000袋颗粒。
[0136] 实施例3
[0137] 取水飞蓟宾26.25g、磷脂195g、普洱茶提取物450g、左旋肉碱15.6g。
[0138] ①水飞蓟宾复合液的制备:称取处方量水飞蓟宾、大豆磷脂溶解到无水乙醇中，加 热回流使溶液澄清后继续加热0.5小时，减压浓缩回收乙醇至原体积的5%，备用；
[0139] ②制粒:称取处方量普洱茶提取物作为底料，以①中制备得水飞蓟宾复合液为料 液，以流化床流化喷液方式制粒，控制物料温度为50摄氏度，待液态复合物全部喷入后，干 燥IOmin，干燥温度为55摄氏度，备用；
[0140] ③将处方量的左旋肉碱与步骤②制得的颗粒按等量递增方式混合均匀，装袋，制 成1000袋颗粒。
[0141] 实施例4
[0142] 取水飞蓟宾26.25g、磷脂195g，普洱茶提取物75g，左旋肉碱180g，按照实施例1的 方法制备，制成1 〇〇〇袋颗粒。
[0143] 实施例5
[0144] 取水飞蓟宾180g、磷脂45g、普洱茶提取物75g，左旋肉碱15.6g，按照实施例1的方 法制备，制成1000袋颗粒。
[0145] 实施例6
[0146] 取水飞蓟宾180g、磷脂45g、普洱茶提取物450g，左旋肉碱180g，按照实施例1的方 法制备，制成1000袋颗粒。
[0147] 实施例7组合物的制备
[0148] 取水飞蓟宾180g、磷脂195g、普洱茶提取物75g，左旋肉碱180g，按照实施例1的方 法制备，制成1000袋颗粒。
[0149] 实施例8组合物的制备
[0150] 取水飞蓟宾26.25g、磷脂48.75g、普洱茶提取物75g，左旋肉碱62.5g，按照实施例1 的方法制备，制成1 〇〇〇袋颗粒。
[0151] 实施例9组合物的制备
[0152] 取水飞蓟宾26.25g、磷脂48.75g、普洱茶提取物300g，左旋肉碱62.5g，按照实施例 1的方法制备，制成1 〇〇〇袋颗粒。
[0153] 实施例10组合物的制备
[0154] 取水飞蓟宾52.5g、磷脂97.5g、普洱茶提取物300g，左旋肉碱15.625g，按照实施例 1的方法制备，制成1 〇〇〇袋颗粒。
[0155] 实施例11组合物的制备
[0156] 取水飞蓟宾75g、磷脂90g、普洱茶提取物240g，左旋肉碱105g，按照实施例1的方法 制备，制成1000袋颗粒。
[0157] 实施例12组合物的制备
[0158] 取水飞蓟宾90g、磷脂108g、普洱茶提取物270g，左旋肉碱120g，按照实施例1的方 法制备，制成1000袋颗粒。
[0159] 实施例13组合物的制备
[0160]取水飞蓟宾105g、磷脂126g、普洱茶提取物300g，左旋肉碱125g，按照实施例1的方 法制备，制成1000袋颗粒。
[0161] 实施例14组合物的制备
[0162] 取水飞蓟宾105g、磷脂195g、普洱茶提取物300g，左旋肉碱125g，按照实施例1的方 法制备，制成1000袋颗粒。
[0163] 实施例15组合物的制备
[0164] 取水飞蓟宾120g、磷脂150g、普洱茶提取物360g，左旋肉碱150g，按照实施例1的方 法制备，制成1000袋颗粒。
[0165] 实施例16组合物的制备
[0166] 取水飞蓟宾105g、磷脂126g、普洱茶提取物300g，左旋肉碱酒石酸盐226.6g，按照 实施例1的方法制备，制成1000袋颗粒。
[0167] 实施例17
[0168] 取实施例8的颗粒，加入微晶纤维素523g，羧甲基淀粉钠64g，混合均匀，装入胶囊， 制成1000粒。
[0169] 实施例18
[0170]取实施例9的颗粒，加入微晶纤维素298g，羧甲基淀粉钠64g，混合均匀，装入胶囊， 制成1000粒。
[0171] 实施例19
[0172]取实施例10的颗粒，加入微晶纤维素270g，羧甲基淀粉钠64g，混合均匀，装入胶 囊，制成1000粒。
[0173] 实施例20
[0174]取实施例13的颗粒，加入微晶纤维素144g，混合均匀，装入胶囊，制成1000粒。
[0175] 实施例21
[0176] 取实施例14的颗粒，加入微晶纤维素 llg，羧甲基淀粉钠64g，混合均匀，装入胶囊， 制成1000粒。
[0177] 实施例22
[0178] 取实施例8的组合物，加入乳糖400g，淀粉123g，羧甲基淀粉钠64g，混合均匀，装入 胶囊，制成1000粒。
[0179] 实施例23
[0180]取实施例13的组合物，加入乳糖70g，滑石粉10g，低取代羟丙基纤维素64g，混合均 匀，装入胶囊，制成1000粒。
[0181] 实施例24
[0182 ]取实施例13的组合物，加入微晶纤维素144g，混合均匀，压片，制成1000片。
【主权项】
1. 一种药物组合物，其是由下述重量比的原料药制成 水飞药宾 8. 75-加份 憐脂 1日-妨化 普巧茶提取物 巧-150份 左旋巧碱 5. 2-60份。2. 如权利要求1所述的一种药物组合物，其是由下述重量比的原料药制成 水飞劑宾 25-40份 憐脂 孤-50汾 普巧茶提取物 齡-1撕份D 左旋肉碱 巧-50微3. 如权利要求2所述的一种药物组合物，其是由下述重量比的原料药制成 水飞韵宾 35份 憐脂 42份 普巧茶提取物 10日份D 左旋肉碱 41.7傲4. 如权利要求1-3任意一项所述的药物组合物，其特征在于，所述的左旋肉碱还可W是 左旋肉碱酒石酸盐。5. -种药物制剂，其特征在于，包括如权利要求1-3任意一项所述的药物组合物，和药 学上可接受的载体； 优选药学上可接受的载体W重量计可W是制剂总重量的0.1-99.9%; 优选药学上可接受的载体W重量计可W是制剂总重量的40-70%。6. 如权利要求5所述的制剂，其特征在于，所述的载体包括甘露醇、山梨醇、山梨酸或钟 盐、焦亚硫酸钢、亚硫酸氨钢、硫代硫酸钢、盐酸半脫氨酸、琉基乙酸、蛋氨酸、维生素A、维生 素C、维生素E、维生素D、氮酬、EDTA二钢、EDTA巧钢，一价碱金属的碳酸盐、醋酸盐、憐酸盐或 其水溶液、盐酸、醋酸、硫酸、憐酸、氨基酸、氯化钢、氯化钟、乳酸钢、木糖醇、麦芽糖、葡萄 糖、果糖、右旋糖巧、甘氨酸、淀粉、薦糖、乳糖、甘露糖醇、娃衍生物、纤维素及其衍生物、藻 酸盐、明胶、聚乙締化咯烧酬、甘油、丙二醇、乙醇、上溫60-80、司班-80、蜂蜡、羊毛脂、液体 石蜡、十六醇、没食子酸醋类、琼脂、=乙醇胺、碱性氨基酸、尿素、尿囊素、碳酸巧、碳酸氨 巧、表面活性剂、聚乙二醇、环糊精、e-环糊精、憐脂类材料、高岭±、滑石粉、硬脂酸巧、硬 脂酸儀、微晶中一种或W上;优选所述的载体为微晶纤维素、乳糖、淀粉、簇甲基纤维素钢、 低取代径丙基纤维素、滑石粉中一种或W上。7. 如权利要求5所述的制剂，其特征在于，所述的制剂为片剂、糖衣片剂、薄膜衣片剂、 肠溶衣片剂、胶囊剂、硬胶囊剂、软胶囊剂、口服液、口含剂、颗粒剂、丸剂、散剂、膏剂、丹剂、 混悬剂、溶液剂、注射剂、栓剂、软膏剂、硬膏剂、霜剂、喷雾剂、贴剂任意一种;优选所述的制 剂为胶囊剂、颗粒剂或片剂。8. 如权利要求5所述制剂的制备方法，其特征在于:包括如下步骤： ① 取处方量的原料备用； ② 水飞劑宾复合液的制备:称取处方量水飞劑宾、憐脂溶解到无水乙醇中，加热回流使 溶液澄清后再继续加热一定时间，再将澄清溶液减压浓缩至一定体积，得到水飞劑宾复合 液，备用； ③ 制粒:称取处方量普巧茶提取物作为底料，W②中制备得水飞劑宾复合液为料液，W 流化床流化喷液方式制颗粒，待液态复合物全部喷入后，干燥，备用； ④ 总混:左旋肉碱与步骤③颗粒按等量递增方式混合均匀即得药物组合物； ⑤ 制剂:取药物组合物与药学上可接受的载体制成常规制剂。9. 权利要求8的方法，其特征在于，步骤②中所述的加热时间为0.5~1.5小时;所述的 浓缩的体积为原体积的5%~20%，减压浓缩溫度为60~80°C ; 步骤③中流化床的参数为:物料溫度40~65°C，制粒过程调节风机频率，进风溫度和输 液频率等参数，保持物料良好流化状态；制粒完成后，干燥10-60分钟，干燥溫度为55~65 r。10. 权利要求1-3任意一项所述的药物组合物或权利要求5所述制剂在制备治疗非酒精 性脂肪肝和/或减肥降脂、美容养颜药物中的应用。
【文档编号】A61K36/82GK105983017SQ201610159763
【公开日】2016年10月5日
【申请日】2016年3月18日
【发明人】孙鹤, 闫希军, 吴迺峰, 闫凯境, 朱永宏, 章顺楠, 白晓林, 孙艳, 马晓慧, 何毅, 李婷, 李磊, 曼丽·爱德华, 李盛亭, 弗莱德·澳赫, 周王谊, 王相阳, 李欣欣, 王宝艺
【申请人】天士力制药集团股份有限公司