一种制备缓释醋酸亮丙瑞林微球的制备方法【专利摘要】本发明的目的在于提供一种缓释醋酸亮丙瑞林微球的制备方法，其所述制备方法的步骤为：(1)将醋酸亮丙瑞林溶于注射用水中，形成醋酸亮丙瑞林注射用水溶液，醋酸亮丙瑞林浓度为1g/ml?2.5g/ml；(2)将PLA溶于二氯甲烷中，形成PLA二氯甲烷溶液，所述PLA二氯甲烷溶液中PLA浓度为280mg/ml?350mg/ml；(3)将所述步骤(1)和所述步骤(2)的醋酸亮丙瑞林注射用水溶液和PLA二氯甲烷溶液混合，超声形成初乳；(4)将步骤(3)所述初乳加入到PVA溶液中，搅拌形成复乳；(5)复乳搅拌，过滤，往微球湿品中加入甘露醇溶液，冻干，即得缓释醋酸亮丙瑞林微球。【专利说明】一种制备缓释醋酸亮丙瑞林微球的制备方法
技术领域：
[0001]本发明涉及一种缓释醋酸亮丙瑞林微球的冻干制剂的制备方法。【
背景技术：
】[0002]醋酸亮丙瑞林是高活性的LH-RH衍生物，对蛋白分解酶的抵抗力和对LH-RH受体的亲和力比LH-RH强，能有效地抑制垂体-性腺系统的功能，临床主要用于前列腺癌及子宫内膜异位症及绝经前乳腺癌的治疗。由于前列腺癌及子宫内膜症及绝经前乳腺癌的治疗通常需要数月至1年甚至一年以上，所以普通的醋酸亮丙瑞林注射剂及1个月的缓释微球制剂会给病人给药带来极大不变，而更长时间缓释制剂的研究上市成为醋酸亮丙瑞林注射剂的研发趋势。[0003]日本武田的3个月醋酸亮丙瑞林PLA缓释微球(商品名"LUPRONDEP0T-PED"）是采用可生物降解聚合物为骨架材料包裹药物形成供注射途径给药的微球制剂，可在3个月时间内以一定速率释放药物以维持有效血药浓度，达到提高治疗效果，减少给药次数，降低药物毒副作用，增加患者依从性，减轻病患痛苦和就医负担。[0004]除此之外还有的文献公布了醋酸亮丙瑞林微球3个月的方案，《亮丙瑞林缓释微球的研究》(冯岚，等.亮丙瑞林缓释微球的研究，中国新药与临床杂志，2004年10月，第23卷第10期，[0005]680-683)在水相中加入5%氯化钠使得w/o/w乳剂更加稳定，制备的3个月缓释微球平均粒径117μπι，与上市产品处方相比，增加了一种辅料氯化钠的添加，并且微球的粒径大幅增加;该文献中新增加的辅料会大幅增加工业化的难度，并且微球粒径的加大会增加临床注射时的疼痛程度。[0006]HiroakiOkada在1994年将500mg醋酸亮丙瑞林溶解在蒸馏水中，4gPLA溶解在7.5ml二氯甲烷中，分别制备水相和油相，然后制备醋酸亮丙瑞林微球，研究中披露了载药量和PLA的分子量对于3个月醋酸亮丙瑞林PLA缓释微球释放性能的影响，发现PLGA与PLA相比，后者缓释时间更长，说明对于3个月缓释微球使用PLA更合适;载药量升高会增加突释，该文献制备的经过处方和工艺优选微球可以持续释放3个月，但是在第八周都会产生一次严重的突释（H.Okada，Y.Doken，Y.Ogawa，H.Toguchi，Preparationofthree_monthdepotinjectablemicrospheresofleuprorelinacetateusingbiodegradablepolymers,Pharm.Res.il(1994)1143-1147)。[0007]HiroakiOkada在1997年将550mg醋酸亮丙瑞林溶解在蒸馏水中，4gPLA溶解在7.5ml二氯甲烷中，分别制备水相和油相，然后制备醋酸亮丙瑞林微球，增加了醋酸亮丙瑞林在水相中的浓度，而PLA在油相的浓度保持不变，研究中披露的3个月醋酸亮丙瑞林PLA缓释微球仍然存在着在第八周都会产生一次严重的突释的问题（OkadaH.OneandthreereleaseinjectablemicrospheresofLH-RHsusperagonistleuprorelinacetate[J].AdvDrugDelivRev?1997?28(l):43-70)〇[0008]PLA是聚乳酸(polylacticacid)，以乳酸为主要原料聚合得到的聚合物，是一种可降解的功能高分子有机化合物。[0009]PLGA为聚乳酸-羟基乙酸共聚物(poly(lactic-co_glycolicacid))，由两种单体-乳酸和羟基乙酸随机聚合而成，是一种可降解的功能高分子有机化合物。【
发明内容】[0010]本发明的目的在于提供一种新的醋酸亮丙瑞林PLA缓释微球，该缓释微球可以抑制醋酸亮丙瑞林初始过渡释放，降低注射后72小时内的释放速度，释放更加平稳，突释降低。[0011]本发明的目的在于提供一种新的醋酸亮丙瑞林PLA缓释微球制备方法，该方法制备获得的醋酸亮丙瑞林PLA缓释微球注射后72小时内的释放更加平稳，突释降低。[0012]为了获得释放更加平稳的醋酸亮丙瑞林PLA缓释微球，本发明的发明人深入研究，发现在制备过程中醋酸亮丙瑞林注射用水溶液的醋酸亮丙瑞林浓度与突释存在着关联，在一定的浓度范围内，制备得到的微球释放平稳，72小时内的突释被大幅降低;低于或者高于该特定的浓度，获得的微球释放在72小时后平稳，但是72小时内会出现显著的突释现象。[0013]进一步的，为了获得符合质量标准的微球，本发明的发明人也同时调整了PLA二氯甲烷中的PLA浓度，意外发现与醋酸亮丙瑞林浓度相适应的新制备微球不仅能符合质量标准，而且微球的D90粒径被降低40%左右。微球的粒径降低可以减少注射的疼痛，更加适用于临床。[0014]-种醋酸亮丙瑞林微球制备方法，其特征在于所述制备方法的步骤为：[0015](1)将醋酸亮丙瑞林溶于注射用水中，形成醋酸亮丙瑞林注射用水溶液；[0016](2)将PLA溶于二氯甲烷中，形成PLA二氯甲烷溶液；[0017](3)将所述步骤（1)和所述步骤(2)的醋酸亮丙瑞林注射用水溶液和PLA二氯甲烷溶液混合，超声形成初乳；[0018](4)将步骤(3)所述初乳加入到PVA溶液中，搅拌形成复乳；[0019](5)复乳搅拌，过滤获得微球湿品，往微球湿品中加入甘露醇溶液，冻干，既得醋酸亮丙瑞林微球。[0020]所述步骤（1)中所述醋酸亮丙瑞林注射用水溶液的醋酸亮丙瑞林浓度为lg/ml-2·5g/ml〇[0021]所述步骤(1)中所述醋酸亮丙瑞林注射用水溶液的醋酸亮丙瑞林浓度为1.5g/ml。[0022]所述步骤(2)中所述PLA二氯甲烷溶液中PLA浓度为280mg/ml-350mg/ml。[0023]所述步骤(2)中所述PLA二氯甲烷溶液中PLA浓度为320mg/ml。[0024]-种醋酸亮丙瑞林微球的制备方法，按照如下步骤制备：[0025](1)将醋酸亮丙瑞林溶于注射用水中，形成醋酸亮丙瑞林注射用水溶液；[0026](2)将PLA溶于二氯甲烷中，形成PLA二氯甲烷溶液；[0027](3)将所述步骤（1)和所述步骤(2)的醋酸亮丙瑞林注射用水溶液和PLA二氯甲烷溶液混合，超声形成初乳(〇/w);[0028](4)将步骤(3)所述初乳(o/w)加入到PVA(Polyvinylalcohol)溶液中，搅拌形成复乳(w/o/w);[0029](5)复乳(w/o/w)搅拌，形成微球；[0030](6)过滤，成微球湿品；[0031](7)往微球湿品中加入甘露醇溶液，冻干，既得醋酸亮丙瑞林微球。[0032]所述步骤(2)中所述PLA的重均分子量为12000-18000。[0033]所述步骤(7)所述的醋酸亮丙瑞林微球在体内能持续释放8周以上。[0034]所述步骤(7)所述的醋酸亮丙瑞林微球在体内能持续释放12周左右。[0035]-种缓释醋酸亮丙瑞林微球的制备方法，步骤为：[0036](1)将225mg醋酸亮丙瑞林溶于150ul注射用水中，形成亮丙瑞林浓度为1.5g/ml的亮丙瑞林注射用水溶液；[0037](2)将2gPLA溶于6.261111二氯甲烷中，形成？1^浓度为32〇11^/1111的？1^二氯甲烷溶液；[0038](3)将上述两种溶液混合，超声形成初乳(o/w);[0039](4)将初乳(o/w)加入到2L0.5%的PVA(Polyvinylalcohol)溶液中，搅拌形成复乳(w/o/w);[0040](5)复乳(w/o/w)搅拌，去除二氯甲烷，形成微球；[0041](6)过滤，去除PVA溶液，形成微球湿品；[0042](7)往微球湿品中加入甘露醇溶液，冻干，既得醋酸亮丙瑞林微球。[0043]所述步骤(2)中所述PLA的重均分子量为12000-18000。[0044]所述的三个月缓释醋酸亮丙瑞林微球是指所述醋酸亮丙瑞林微球在体内能持续释放3个月。【附图说明】[0045]图1:G1和G2在72小时内的血药浓度曲线[0046]图2:G1和G3在12周内的血药浓度曲线[0047]图3:S1、S2、S4、S5和S6在72小时内的血药浓度曲线[0048]图4:32、34、35在72小时内的血药浓度曲线[0049]图5:PLA浓度对粒径的影响曲线图[0050]图6:PLA浓度对载药量的影响曲线图具体实施例[0051]下面将通过具体例子对本发明做进一步说明，但需要指出的是，以下实施例不能构成对发明的任何限制。[0052]实施例1[0053](1)将225mg醋酸亮丙瑞林溶于150ul注射用水中，形成亮丙瑞林浓度为1.5g/ml的亮丙瑞林注射用水溶液；[0054](2)将28?1^溶于6.26!111二氯甲烷中，形成?1^浓度为32〇11^/1111的？1^二氯甲烷溶液；[0055](3)将上述两种溶液混合，超声形成初乳(o/w);[0056](4)将初乳(o/w)加入到2L0.5%的PVA(Polyvinylalcohol)溶液中，搅拌形成复乳(w/o/w);[0057](5)复乳(w/o/w)搅拌，去除二氯甲烷，形成微球；[0058](6)过滤，去除PVA溶液，形成微球湿品；[0059](7)加入适量的甘露醇溶液，冻干，既得醋酸亮丙瑞林微球。[0060]实施例2[0061](1)将225mg醋酸亮丙瑞林溶于注射用水中，形成亮丙瑞林注射用水溶液；[0062](2)将2gPLA溶于6.26ml二氯甲烷中，形成PLA浓度为320mg/ml的PLA二氯甲烷溶液；[0063](3)将上述两种溶液混合，超声形成初乳(o/w);[0064](4)将初乳(o/w)加入到2L0.5%的PVA(Polyvinylalcohol)溶液中，搅拌形成复乳(w/o/w);[0065](5)复乳(w/o/w)搅拌，去除二氯甲烷，形成微球；[0066](6)过滤，去除PVA溶液，形成微球湿品；[0067](7)加入适量的甘露醇溶液，冻干，既得醋酸亮丙瑞林微球。[0068]所述步骤（1)中的亮丙瑞林注射用水溶液中的亮丙瑞林浓度调节为0.9g/ml、1.0g/ml、1.3g/ml、1.5g/ml、2.0g/ml、2.5g/ml、2.7g/ml并依据实施例2的方法测试血药浓度，划分为S1组、S2组、S3组、S4组、S5和S6组，血药浓度结果见表1，以S1组、S2组、S4组、S5组和S6组的时间和血药浓度绘制图1;S2组、S3组、S4组和S5的时间和血药浓度绘制图2。[0069]表格1:雄性比格犬皮下注射给予0.35mg/kg亮丙瑞林制剂S1-S6后亮丙瑞林的血药浓度(ng/mL)[0070][0071]结论:从图1的结果上看，S1组、S2组、S4组、S5和S6组的亮丙瑞林微球虽然制备时都投药225mg，但是由于亮丙瑞林注射用水溶液中的亮丙瑞林浓度不同，使得制备得到的亮丙瑞林微球的释放特性存在较大的差异。其中S1组和S6组初始释放变化幅度大;而S2组、S4组、S5组的亮丙瑞林微球的释放较为平稳，因此亮丙瑞林注射用水溶液中的亮丙瑞林浓度为1.0g/ml至1.5g/ml时可以得到释放较为平稳的亮丙瑞林微球。[0072]分析S2组-S5组的亮丙瑞林释放血药浓度随时间变化的数据，亮丙瑞林注射用水溶液中的亮丙瑞林浓度低于1.5g/ml时，随着亮丙瑞林浓度上升，初始释放趋于平稳;而当亮丙瑞林注射用水溶液中的亮丙瑞林浓度高于1.5g/ml时，初始释放加快加大，经过研究模拟和分析，发明人认为当亮丙瑞林注射用水溶液中的亮丙瑞林浓度为1.5g/ml时制备得到的亮丙瑞林微球释放最为平稳。[0073]实施例3[0074]雄性比格犬两组:G1和G2,每组4只皮下注射分别给予0.35mg/kg亮丙瑞林后;于不同时间点采集血清样品，分别经固相萃取法和有机溶剂处理后采用液相色谱串联质谱法测定G1和G2组血清中亮丙瑞林的浓度。亮丙瑞林的的定量范围为0.100-50.0ng/mL及0.0200-10·Ong/mL〇[0075]G1组的雄性比格犬注射的醋酸亮丙瑞林按照本发明实施例1所述的方法制备；[0076]G2组的雄性比格犬注射的醋酸亮丙瑞林为3个月醋酸亮丙瑞林PLA缓释微球(商品名"LUPRONDEP0T-PED"）。[0077]G1组的4只雄性比格犬编号分别为G1M01、G1M02、G1M03、G1M04;[0078]G2组的4只雄性比格犬编号分别为G2M01、G2M02、G2M03、G2M04;[0079]各组亮丙瑞林的血药浓度见表2和表3。[0080]表2:雄性比格犬(n=4)皮下注射给予0.35mg/kg亮丙瑞林受试制剂(G1)后亮丙瑞林的血药浓度(ng/mL)[0081][0082]表3:雄性比格犬(n=4)皮下注射给予0.35mg/kg亮丙瑞林参比制剂(G2)后亮丙瑞林的血药浓度(ng/mL)[0083][0084]*BLQ:低于定量下限（0.100ng/mL)[0085]ND:无法检测到，以零值参与计算。[0086]结论:从表格2和以表格3绘制的图3数据看，G2组的血药浓度在注射后的0.5小时、1小时、2小时、3小时时都超过了25ng/ml，l小时时达到最高的44.4ng/ml，在第4小时以后才低于G1组的血药浓度最高值，并且4小时到24小时之间下降趋势非常明显，20个小时之内从16.9ng/ml下降到0.708ng/ml。62组的突然释放和释放减弱幅度都很大。而G1组的血药浓度在72小时内的上升和下降趋势都比较平缓，与G2组相比，初始释放和血药浓度的下降都非常缓和。因此G1组所注射的亮丙瑞林微球的释放更加平稳，初始释放特性优于已经上市的"LUPRONDEP0T-PED"。[0087]实施例4微球在30°C加速条件下的稳定性数据[0088]在30°C±2°C，RH65%±5%条件下进行加速稳定性考察，考察时间为12个月；[0089]考察样品分为G1组合G2组，其中G1组的醋酸亮丙瑞林按照本发明实施例1所述的方法制备；G2组的醋酸亮丙瑞林为3个月醋酸亮丙瑞林PLA缓释微球（商品名"LUPR0NDEP0T-PED"）。[0090]考察项目为G1组和G2组在第0个月和第12个月醋酸亮丙瑞林PLA缓释微球的有关物质，本发明用HPLC法检测有关物质。[0091]实验结果数据见以下的表格4。[0092]表格4:G1组和G2组微球在30°C加速条件下的稳定性数据[0093][0094]结论:经过在30°C±2°C，RH65%±5%条件下进行12个月加速稳定性考察，G1组的含量为99.5%，而G2组的含量为98.7%，本发明的醋酸亮丙瑞林PLA缓释微球的稳定性良好。[0095]实施例5微球的二氯甲烷残留[0096]取G1组的醋酸亮丙瑞林PLA缓释微球约50mg，精密称定，置顶空瓶中，精密量取2ml二甲基亚砜溶液摇匀使其溶解，密封，作为供试品溶液;另取二氯甲烷适量，精密称定，加二甲基亚砜定量稀释制成每lml含0.825yg的溶液，精密量取2ml，置顶空瓶中，密封，作为对照品溶液。依法测定（中国药典2015年版四部通则0521)，用6%氰丙苯基-94%二甲基聚硅氧烷(或极性相近)为固定液，E⑶检测器，柱温起始温度40°C，维持6分钟，以100°C/min的速率升至200°C，维持2分钟；进样口温度250°C;检测器温度300°C;分流比2:1顶空平衡温度90°C;平衡时间20分钟，取供试品溶液与对照品溶液分别顶空进样，记录色谱图，按外标法以峰面积计算。其中G1组的醋酸亮丙瑞林按照本发明实施例1所述的方法制备。[0097]日本武田的3个月醋酸亮丙瑞林PLA缓释微球(商品名"LUPRONDEP0T-PED"）公开的二氯甲烷残留标准为不高于0.06%。[0098]根据本发明实施例1方法制备的G1组醋酸亮丙瑞林PLA缓释微球的二氯甲烷残留量为0.0010%，并且发明人根据本发明实施例1所述的方法制备了多批次的醋酸亮丙瑞林PLA缓释微球二氯甲烷残留，将本发明的醋酸亮丙瑞林PLA缓释微球二氯甲烷残留标准设定为不高于0.0015%，远远低于原研厂家规定的安全限度。[0099]实施例6[0?00](1)将225mg醋酸亮丙瑞林溶于150ul注射用水中，形成亮丙瑞林浓度为1.5g/ml的亮丙瑞林注射用水溶液；[0101](2)将2gPLA溶于二氯甲烷中，形成PLA二氯甲烷溶液；[0102](3)将上述两种溶液混合，超声形成初乳(o/w);[0103](4)将初乳(o/w)加入到2L0.5%的PVA(Polyvinylalcohol)溶液中，搅拌形成复乳(w/o/w);[0104](5)复乳(w/o/w)搅拌，去除二氯甲烷，形成微球；[0105](6)过滤，去除PVA溶液，形成微球湿品；[0106](7)加入适量的甘露醇溶液，冻干，既得醋酸亮丙瑞林微球。[0107]所述步骤（1)中的PLA二氯甲烷溶液中的PLA浓度调节为250mg/ml、280mg/ml、300mg/ml、320mg/ml、350mg/ml、360mg/ml、400mg/ml，制备得到亮丙瑞林微球S7、S8、S9、S10、S11和S12,取S7-12的亮丙瑞林微球和日本武田的3个月醋酸亮丙瑞林PLA缓释微球(商品名"LUPR0NDEP0T-PED"），测定其粒径和载药量。[0108]粒径测定:取样品约30mg，加入10ml纯化水，超声3~8min使分散均勾，向粒度仪中加样，直至遮光度达到5%~15%，测定并记录结果见表5。[0109]表格5:PLA浓度对粒径的影响[0110][0111]结论:粒径和载药量的测量结果见表格5。当PLA浓度为360mg/ml和400mg/ml时，亮丙瑞林微球的D90粒径为36·492μπι和40·855μπι，粒径大于30·ΟΟΟμπι，而当PLA浓度不高于350mg/ml时，亮丙瑞林微球的D90粒径大约为30μπι或小于30μπι。当PLA浓度为250mg/ml时，亮丙瑞林微球的载药量为5.3%，PLA浓度为280mg/ml时，载药量为6.5%，PLA浓度高于280mg/ml时，载药量不低于7.0%。[0112]微球粒径大会容易引起注射疼痛，而载药量低会加大注射量，因此需要选择粒径和载药量都比较均衡的亮丙瑞林微球，根据表格5的PLA浓度对粒径和载药量的影响数据，发明人优选的PLA浓度范围为280mg/ml-350mg/ml，最佳的PLA浓度为320mg/ml。[0113]当PLA浓度范围为280mg/ml-350mg/ml时，本发明获得的亮丙瑞林微球的D90粒径低于日本武田的3个月醋酸亮丙瑞林PLA缓释微球(商品名"LUPRONDEP0T-PED"）；PLA浓度为320mg/ml时，本发明获得的亮丙瑞林微球的D90粒径仅21.106μπι，比已上市的原研日本武田的亮丙瑞林微球D90粒径缩小了34.0%，同时载药量略高于已上市的原研日本武田的亮丙瑞林微球载药量。[0114]实施例7[0115]雄性比格犬两组:G1和G3,每组4只皮下注射分别给予0.35mg/kg亮丙瑞林后;于不同时间点采集血清样品，分别经固相萃取法和有机溶剂处理后采用液相色谱串联质谱法测定G1和G3组血清中亮丙瑞林的浓度。亮丙瑞林的的定量范围为0.100-50.0ng/mL及0.0200-10·Ong/mL〇[0116]G1组的雄性比格犬注射的醋酸亮丙瑞林按照本发明实施例1所述的方法制备；[0117]G3组的雄性比格犬注射的醋酸亮丙瑞林为3个月醋酸亮丙瑞林PLA缓释微球，根据OkadaH.OneandthreereleaseinjectablemicrospheresofLH-RHsusperagonistleuprorelinacetate[J].AdvDrugDelivRev，1997,28(1):43-70所述方法制备，使用PLA分子量为14100。结果见表6。[0118]表格6:雄性比格犬皮下注射给予0.35mg/kg亮丙瑞林制剂G1和G3后亮丙瑞林的血药浓度(ng/mL)[0119][0120]结论:从表格3绘制的图2数据，G1组和G3组的血药浓度在注射后的第1周、第2周和第4周都比较平稳，但是G3组的血药浓度在第8周出现一个突然的上升，在接下来的第10周和12周血药浓度又恢复至平稳的状态。而G1组的血药浓度在12周内的上升和下降趋势都比较平缓，与G3组相比，亮丙瑞林释放和血药浓度的整体趋势都比较平稳。因此G1组所注射的亮丙瑞林微球的释放更加平稳，释放特性优于OkadaΗ文献中公开的亮丙瑞林微球。[0121]实施例8[0122](1)将225mg醋酸亮丙瑞林溶于注射用水中，形成亮丙瑞林浓度为2.5g/ml的亮丙瑞林注射用水溶液；[0123](2)将2gPLA溶于7.141111二氯甲烷中，形成?1^浓度为28〇11^/1111的？1^二氯甲烷溶液；[0124](3)将上述两种溶液混合，超声形成初乳(o/w);[0125](4)将初乳(o/w)加入到2L0.5%的PVA(Polyvinylalcohol)溶液中，搅拌形成复乳(w/o/w);[0126](5)复乳(w/o/w)搅拌，去除二氯甲烷，形成微球；[0127](6)过滤，去除PVA溶液，形成微球湿品；[0128](7)加入适量的甘露醇溶液，冻干，既得醋酸亮丙瑞林微球。[0129]实施例9[0130](1)将225mg醋酸亮丙瑞林溶于注射用水中，形成亮丙瑞林浓度为2.0g/ml的亮丙瑞林注射用水溶液；[0131](2)将2gPLA溶于6·26ml二氯甲烷中，形成PLA浓度为320mg/ml的PLA二氯甲烷溶液；[0132](3)将上述两种溶液混合，超声形成初乳(o/w);[0133](4)将初乳(o/w)加入到2L0.5%的PVA(Polyvinylalcohol)溶液中，搅拌形成复乳(w/o/w);[0134](5)复乳(w/o/w)搅拌，去除二氯甲烷，形成微球；[0135](6)过滤，去除PVA溶液，形成微球湿品；[0136](7)加入适量的甘露醇溶液，冻干，既得醋酸亮丙瑞林微球。[0137]实施例10[0138](1)将225mg醋酸亮丙瑞林溶于注射用水中，形成亮丙瑞林浓度为1.0g/ml的亮丙瑞林注射用水溶液；[0139](2)将2gPLA溶于6·26ml二氯甲烷中，形成PLA浓度为320mg/ml的PLA二氯甲烷溶液；[0140](3)将上述两种溶液混合，超声形成初乳(o/w);[0141](4)将初乳(o/w)加入到2L0.5%的PVA(Polyvinylalcohol)溶液中，搅拌形成复乳(w/o/w);[0142](5)复乳(w/o/w)搅拌，去除二氯甲烷，形成微球；[0143](6)过滤，去除PVA溶液，形成微球湿品；[0144](7)加入适量的甘露醇溶液，冻干，既得醋酸亮丙瑞林微球。[0145]实施例11[0146](1)将225mg醋酸亮丙瑞林溶于150ul注射用水中，形成亮丙瑞林浓度为1.5g/ml的亮丙瑞林注射用水溶液；[0147](2)将2gPLA溶于6.671111二氯甲烷中，形成?1^浓度为30〇11^/1111的？1^二氯甲烷溶液；[0148](3)将上述两种溶液混合，超声形成初乳(o/w);[0149](4)将初乳(o/w)加入到2L0.5%的PVA(Polyvinylalcohol)溶液中，搅拌形成复乳(w/o/w);[0150](5)复乳(w/o/w)搅拌，去除二氯甲烷，形成微球；[0151](6)过滤，去除PVA溶液，形成微球湿品；[0152](7)加入适量的甘露醇溶液，冻干，既得醋酸亮丙瑞林微球。[0153]实施例12[0154](1)将225mg醋酸亮丙瑞林溶于150ul注射用水中，形成亮丙瑞林浓度为1.5g/ml的亮丙瑞林注射用水溶液；[0155](2)将2gPLA溶于5.891111二氯甲烷中，形成?1^浓度为34〇11^/1111的？1^二氯甲烷溶液；[0156](3)将上述两种溶液混合，超声形成初乳(o/w);[0157](4)将初乳(o/w)加入到2L0.5%的PVA(Polyvinylalcohol)溶液中，搅拌形成复乳(w/o/w);[0158](5)复乳(w/o/w)搅拌，去除二氯甲烷，形成微球；[0159](6)过滤，去除PVA溶液，形成微球湿品；[0160](7)加入适量的甘露醇溶液，冻干，既得醋酸亮丙瑞林微球。[0161]实施例13[0162](1)将225mg醋酸亮丙瑞林溶于注射用水中，形成亮丙瑞林浓度为2.5g/ml的亮丙瑞林注射用水溶液；[0163](2)将2gPLA溶于5.711111二氯甲烷中，形成?1^浓度为35〇11^/1111的？1^二氯甲烷溶液；[0164](3)将上述两种溶液混合，超声形成初乳(o/w);[0165](4)将初乳(o/w)加入到2L0.5%的PVA(Polyvinylalcohol)溶液中，搅拌形成复乳(w/o/w);[0166](5)复乳(w/ow)搅拌，去除二氯甲烷，形成微球；[0167](6)过滤，去除PVA溶液，形成微球湿品；【主权项】1.一种缓释醋酸亮丙瑞林微球的制备方法，其特征在于所述制备方法的步骤为：(1)将醋酸亮丙瑞林溶于注射用水中，形成醋酸亮丙瑞林注射用水溶液；(2)将PLA溶于二氯甲烷中，形成PLA二氯甲烷溶液；(3)将所述步骤（1)和所述步骤(2)的醋酸亮丙瑞林注射用水溶液和PLA二氯甲烷溶液混合，超声形成初乳；(4)将步骤(3)所述初乳加入到PVA溶液中，搅拌形成复乳；(5)复乳搅拌，过滤，往微球湿品中加入甘露醇溶液，冻干，即得缓释醋酸亮丙瑞林微球；所述步骤（1)中所述醋酸亮丙瑞林注射用水溶液的醋酸亮丙瑞林浓度为lg/ml-2.5g/ml;所述步骤(2)中所述PLA二氯甲烧溶液中PLA浓度为280mg/ml-350mg/ml。2.如权利要求1所述的缓释醋酸亮丙瑞林微球的制备方法，其特征在于所述步骤（1)中所述醋酸亮丙瑞林注射用水溶液的醋酸亮丙瑞林浓度为1.5g/ml。3.如权利要求1所述的缓释醋酸亮丙瑞林微球的制备方法，其特征在于所述步骤(2)中所述PLA二氯甲烷溶液中PLA浓度为320mg/ml。4.如权利要求1所述的缓释醋酸亮丙瑞林微球的制备方法，其特征在于所述步骤(2)中所述PLA的重均分子量为12000-18000。5.如权利要求1所述的缓释醋酸亮丙瑞林微球的制备方法，其特征在于所述步骤(7)所述的醋酸亮丙瑞林微球在体内能持续释放8周以上。6.如权利要求5所述的缓释醋酸亮丙瑞林微球的制备方法，其特征在于所述步骤(7)所述的醋酸亮丙瑞林微球在体内能持续释放12周左右。7.如权利要求1所述的缓释醋酸亮丙瑞林微球的制备方法，其特征在于所述制备方法的步骤为：(1)将醋酸亮丙瑞林溶于注射用水中，形成醋酸亮丙瑞林注射用水溶液；(2)将PLA溶于二氯甲烷中，形成PLA二氯甲烷溶液；(3)将所述步骤（1)和所述步骤(2)的醋酸亮丙瑞林注射用水溶液和PLA二氯甲烷溶液混合，超声形成初乳(ο/w);(4)将步骤(3)所述初乳(o/w)加入到PVA(Polyvinylalcohol)溶液中，搅拌形成复乳(w/o/w)；(5)复乳(w/o/w)搅拌，去除二氯甲烷，形成微球；(6)过滤，去除PVA溶液，形成微球湿品；(7)往微球湿品中加入甘露醇溶液，冻干，即得缓释醋酸亮丙瑞林微球；所述步骤（1)中所述醋酸亮丙瑞林注射用水溶液的醋酸亮丙瑞林浓度为1.5g/ml;所述步骤(2)中所述PLA二氯甲烷溶液中PLA浓度为320mg/ml。8.如权利要求1或7所述的缓释醋酸亮丙瑞林微球的制备方法，其特征在于所述步骤(2)中所述PLA的重均分子量为12000-18000。【文档编号】A61K47/32GK106038492SQ201610349226【公开日】2016年10月26日【申请日】2016年5月19日【发明人】陆文岐,王燕清,孔祥生,徐鹏,刘智慧,蔡诗敏,高田宇,陈斌【申请人】丽珠医药集团股份有限公司