一种球等鞭金藻海藻油的提取方法
【专利摘要】一种球等鞭金藻海藻油的提取方法属海洋生物提取【技术领域】。按照以下步骤进行：（1）藻体冻融破碎处理：球等鞭金藻冷冻干燥成海藻粉,-20℃下冷冻,40℃温水浴中融化5min,反复2次制成海藻浆,镜检无完整藻体细胞；（2）海藻油提取：称取海藻浆,按1:(2~15)的料液比加入体积比为1:(1~3)的乙醚/石油醚浸提剂,充氮气密封后于20~40℃，以180r/min)振摇，浸提2~7h;浸提物取上层液,于旋转蒸发仪60℃,吹氮气气氛中蒸去溶剂,离心干燥得海藻油。本发明设备简单,能源消耗低,适合对光和热较敏感的活性物质的提取和较大规模的生产，海藻油得率搞到40.8%。
【专利说明】一种球等鞭金藻海藻油的提取方法
【技术领域】
[0001]本发明属海洋生物提取【技术领域】，特别涉及一种球等鞭金藻海藻油的提取方法。
[0002]
【背景技术】
[0003]微藻蕴量丰富种类繁多，地球上大约存在3万多种不同门类的微藻。近年来的研究表明，微藻中存在着丰富的结构独特的有机化合物，如多不饱和脂肪酸、多糖、抗生素、毒素等，这些代谢产物具有多种多样的生物活性。这些生物活性物质是人类及动物生长发育所必需的物质，具有抗血栓、降血脂、防止血
小板聚结、舒张血管等功能，对心脑血管疾病、关节炎、肾炎等疾病有良好的防治作用。此外，这些生物活性物质还能促进脑细胞的生长发育，改善大脑机能。作为食物链基础的海洋微藻是EPA和DHA的最初生产者，动物体内的这些物质也是从微藻中转化而来。随着海洋渔业资源的日益衰减，海洋微藻将成为人类获得这些物质的主要资源。
[0004]球等鞭金藻是一种分布广泛的海洋浮游单细胞藻类，属于金藻门，金藻纲，等鞭金藻目，等鞭金藻科，等鞭金藻属。由于其个体小，繁殖快，营养丰富，运动速度适中，又无含纤维素的细胞壁， 易被贝类幼虫捕捉、吞食和消化吸收，因而是海产经济双壳动物幼虫良好的基础饵料。近来又有相关报道表明，球等鞭金藻富含η - 3多不饱和脂肪酸，尤其富含DHA和EPA，是一种具有DHA和EPA生产潜力的藻种。
[0005]目前，常采用的藻类油脂提取方法有:酸热法、索氏提取法、超临界C02萃取法(SCF- C02 )、有机溶剂法等。有机溶剂法中常见的溶剂主要有乙醚、异丙醚、氯仿、乙醚/乙醇、石油醚、氯仿/甲醇等。
[0006]
【发明内容】
[0007]本发明提供一种新的球等鞭金藻海藻油的提取方法，本发明一种球等鞭金藻海藻油的提取方法按照以下步骤进行:
(1)藻体冻融破碎处理:球等鞭金藻冷冻干燥成海藻粉，-20°c下冷冻，40°C温水浴中融化5m in,反复2次制成海藻浆，镜检无完整藻体细胞；
(2)海藻油提取:称取海藻浆，按1:(2~15)的料液比加入体积比为1:(广3)的乙醚/石油醚浸提剂，充氮气密封后于2(T40°C，以180 r /m in)振摇，浸提7h;浸提物取上层液，于旋转蒸发仪60°C，吹氮气气氛中蒸去溶剂，离心干燥得海藻油。
[0008]微藻中的活性物质大多数存在于细胞内，如何有效地破碎海藻细胞以充分释放这些活性物质是亟需解决的一个关键性问题。目前，主要破碎方法有研磨法、酸煮法、菌体自溶法(菌体在50°C下保温3 d)、酶解法、反复冻融法、超声波法等。本实验采用反复冻融破碎藻体，具有操作简便，不受外源性杂质污染的特点，并且设备简单，能源消耗低，适合对光和热较敏感的活性物质的提取和较大规模的生产。经过2次反复冻融处理，球等鞭金藻细胞的破碎率达99%以上。
[0009]在料液比、乙醚/石油醚体积比、提取温度、提取时间4个因素中，乙醚/石油醚体积比对海藻油得率的影响最大，其次是提取温度、料液比、提取时间。
[0010]本发明设备简单，能源消耗低，适合对光和热较敏感的活性物质的提取和较大规模的生产,海藻油得率搞到40.8 %。
[0011]
【具体实施方式】
[0012]球等鞭金藻原种购于中国海洋大学藻种库，经实验室活化后用于实验藻种。石油醚、乙醚、乙醇、丙酮、尿素、氢氧化钾、盐酸均为市购。
[0013]实施例1
一种球等鞭金藻海藻油的提取方法按照以下步骤进行:
(1)藻体冻融破碎处理:球等鞭金藻冷冻干燥成海藻粉，-20°c下冷冻，40°C温水浴中融化5m in,反复2次制成海藻浆，镜检无完整藻体细胞；
(2)海藻油提取:称取海藻浆，按1:15的料液比加入体积比为1:2的乙醚/石油醚浸提剂，充氮气密封后于一定温度下于20°C,以180 r /m in速度振摇，于浸提5h;浸提物取上层液，于旋转蒸发仪60°C，吹氮气气氛中蒸去溶剂，离心干燥得海藻油。
[0014]经检测所得球等鞭金藻海藻油得率为40.8%。
[0015]实施例2
一种球等鞭金藻海藻油的提取方法按照以下步骤进行:
(1)藻体冻融破碎处理:球等鞭金藻冷冻干燥成海藻粉，-20°C下冷冻，40°C温水浴中融化5m in,反复2次制成海藻浆，镜检无完整藻体细胞；
(2)海藻油提取:称取海藻浆，按1:2的料液比加入体积比为1:1的乙醚/石油醚浸提剂，充氮气密封后于20-40°C，以180 r /m in)振摇，浸提7h;浸提物取上层液，于旋转蒸发仪60°C，吹氮气气氛中蒸去溶剂，离心干燥得海藻油。
[0016]实施例3
一种球等鞭金藻海藻油的提取方法按照以下步骤进行:
(1)藻体冻融破碎处理:球等鞭金藻冷冻干燥成海藻粉，-20°C下冷冻，40°C温水浴中融化5m in,反复2次制成海藻浆，镜检无完整藻体细胞；
(2)海藻油提取:称取海藻浆，按1:8的料液比加入体积比为1:2的乙醚/石油醚浸提剂，充氮气密封后于30°C,以180 r /m in)振摇,浸提2h;浸提物取上层液，于旋转蒸发仪60°C，吹氮气气氛中蒸去溶剂，离心干燥得海藻油。
【权利要求】
1.一种球等鞭金藻海藻油的提取方法，其特征在于按照以下步骤进行: (1)藻体冻融破碎处理:球等鞭金藻冷冻干燥成海藻粉，-20°c下冷冻，40°C温水浴中融化5m in,反复2次制成海藻浆，镜检无完整藻体细胞； (2)海藻油提取:称取海藻浆，按1:(2~15)的料液比加入体积比为1:(广3)的乙醚/石油醚浸提剂，充氮气密封后于2(T40°C，以180 r /m in)振摇，浸提7h;浸提物取上层液，于旋转蒸 发仪60°C，吹氮气气氛中蒸去溶剂，离心干燥得海藻油。
【文档编号】C11B1/04GK103725410SQ201310621831
【公开日】2014年4月16日 申请日期:2013年11月30日 优先权日:2013年11月30日
【发明者】陈宏 , 刘晶营, 时慧, 李朋 申请人:青岛海之林生物科技开发有限公司