1.一种基于生物技术提高土壤速效磷含量的方法,其特征在于,方法步骤如下:
(1)获取专性解磷菌:以缺磷土壤为基质,筛选专性解磷菌,依据无机磷培养方法经分离、驯化、富集获取,采用16srdna方法鉴定专性解磷菌菌株;
(2)制备功能性调理剂:将3g蒙脱石置于50mllb培养基中,121℃灭菌30min,以3%的接种量接入步骤(1)分离的解磷菌,35℃、150r/min条件下固定18h后取出,以5000r/min离心10min后,倒掉上清液,用质量分数为1%的生理盐水洗涤下层沉淀部分,离心并重复洗涤3次至中性,离心所得固体即为蒙脱石@解磷菌;蒙脱石@解磷菌与过磷酸钙以质量比12:1的配比制得功能性调理剂;
(3)功能性调理剂的应用:向缺磷土壤中均匀施用步骤(2)制备的功能性调理剂,缺磷土壤与功能性调理剂的质量配比为30:1。
2.根据权利要求1所述的基于生物技术提高土壤速效磷含量的方法,其特征在于:所述步骤(1)中筛选专性解磷菌的具体步骤为:取5-10cm土培的缺磷土壤10g,放入90ml无菌水中震荡制成土壤悬浊液,稀释10-3、10-4和10-5倍接种到无机磷固体培养基:5g·l-1ca3(po4)2、10g·l-1葡萄糖、0.3g·l-1nacl、0.3g·l-1mgso4、0.3g·l-1kcl,0.5g·l-1(nh4)2so4、0.03g·l-1mnso4、0.03g·l-1feso4、20g·l-1琼脂;恒温30°c培养7天,若在菌落周围形成清晰的晕圈,证明该菌具有解磷能力。
3.根据权利要求1所述的基于生物技术提高土壤速效磷含量的方法,其特征在于:所述步骤(1)中采用16srdna方法鉴定的具体方法为:选用细菌16srdna通用引27f(5'-agagtttgatcctggctcag-3),1492r(5'-ggttaccttgttacgactt-3)建立pcr扩增体系进行扩增;pcr反应体系50μl,其中灭菌水20μl,1×kodonetmpcrmaster25μl,模板2μl,1×引物(10μmeach)1.5μl;扩增程序为98°c预变性10min,98°c变性10s,55°c退火8s,68°c延伸2s,共35个循环;产物经纯化后测定基因序列,利用blast将菌株的基因序列与genbank数据库中的序列进行比较,选取相似性较高的模式菌株序列,用mega5.1中neighbor-joining法比较同源性,构建系统发育树。