专利名称：丙酰－l－卡尼丁合成工艺及有关物质和含量的检测方法
技术领域：
本发明涉及丙酰-L-卡尼丁盐酸盐及其内盐的合成工艺及有关物质和含量的检测方法。
背景技术：
英国专利2048268A公布的合成方法是将L-卡尼丁溶于三氟乙酸，滴加丙酰氯，40～50摄氏度反应过滤，其中用三氟乙酸作溶剂，成本高，污染重，工人操作危险性大，而采用其他溶剂又存在难以溶解，副产物多等问题，因此溶剂选择是制约合成工艺的关键和难点。对于丙酰-L-卡尼丁盐酸盐(propionyl-L-carnitine chloride)及其内盐(base)的有关物质和含量的检测方法，尚未见有公开报道，其测定方法难度在于其含有季胺基团，且同时具有酸性基团，其紫外吸收在波长200-400纳米处吸收较弱，峰形和检测灵敏度较低，检测方法和溶剂选择存在很大难度。
发明内容
本发明的目的之一是提供原料成本低，污染小，工人操作危险性小和易于溶解并副产物少的丙酰-L-卡尼丁盐酸盐及其内盐的合成工艺，目的之二是提供该丙酰-L-卡尼丁有关物质和含量的有效检测方法。
本发明的目的之一可通过如下技术措施来实现a.先取L-卡尼丁或L-卡尼丁盐酸盐，加入对甲苯磺酸，再以丙酸为溶剂于搅拌下溶解；然后b.缓慢加入丙酰氯，经升温、保温反应后取出并冷却至室温，再加入丙酮，经搅拌和过滤后加入乙醚，然后再将经搅拌产生有白色沉淀析出液送冷藏，最后经过滤、干燥得丙酰-L-卡尼丁盐酸盐。
本发明的目的之一还可通过如下技术措施来实现将丙酰-L-卡尼丁盐酸盐溶于乙醇，通入氨气，滤除沉淀后再加入丙酮、乙醚，经过滤得丙酰-L-卡尼丁内盐。
更进一步讲，本发明丙酰-L-卡尼丁盐酸盐及其内盐的合成工艺采用L-卡尼丁与丙酰氯的酰化反应以丙酸为溶剂，在对甲苯磺酸催化条件下进行。先取15～19重量份的L-卡尼丁或L-卡尼丁盐酸盐，加入1～6重量份的对甲苯磺酸，再加入丙酸作溶剂，在搅拌下使其完全溶解，后缓慢加入3～30重量份的丙酰氯，再升温至45～50摄氏度，于保温下反应结束后再取出并冷却至室温，加入380～420重量份的丙酮，经搅拌和过滤，后向滤液中加入480～520重量份的乙醚，搅拌至有白色沉淀析出，置入冷藏设备中冷藏，最后经过滤、干燥得丙酰-L-卡尼丁盐酸盐。再将丙酰-L-卡尼丁盐酸盐溶于乙醇，通氨气约一小时，滤除沉淀，加入380～420重量份的丙酮、480～520重量份的乙醚，过滤，得丙酰-L-卡尼丁内盐。
本发明的丙酰-L-卡尼丁盐酸盐及其内盐合成工艺以丙酸为溶剂，原料成本极大的低于三氟乙酸，且操作安全，基本没有无污染，易于溶解，副产物少。
本发明的目的之二可通过如下技术措施来实现本发明丙酰-L-卡尼丁有关物质和含量的检测方法用高效液相色谱法测丙酰-L-卡尼丁含量，用薄层色谱法测丙酰-L-卡尼丁有关物质。
(1).用高效液相色谱法测定丙酰-L-卡尼丁含量，流动相配制方法是在100重量份的PH值为2.4的磷酸盐缓冲液中加入0.042重量份的庚烷磺酸钠，然后加入(2～10)重量份的正丁醇制得，流速为每分钟0.8～1毫升，在波长210～232纳米处测其吸收；(2).用薄层色谱法测丙酰-L-卡尼丁有关物质，展开剂的配制方法是将正丁醇∶丙酮或正己烷∶甲酸∶水依次按13∶(0～5)∶(4～8)∶(5～10)重量份混合，用微晶纤维素预制板点样，层析缸展开，碘蒸汽显色。
本发明丙酰-L-卡尼丁有关物质和含量的检测方法优点在于，高效液相所得图谱的峰形较好，灵敏度较高，采用的C-18柱和紫外检测器均为常用设备，操作简单，易于掌握，本发明所采用的薄层色谱法同样具有灵敏度较高，操作简单且易于掌握。
具体实施例方式
实施例1本发明丙酰-L-卡尼丁盐酸盐的合成工艺如下取L-卡尼丁16.2克，加入3克对甲苯磺酸，用40克干燥丙酸，搅拌溶解，滴加丙酰氯30克，滴毕升温至45摄氏度，保温反应20小时。反应结束后取出并冷却至室温，加入丙酮410克，搅拌2小时，过滤，滤液中加入乙醚490克，搅拌至有白色沉淀析出，放入冰箱冷藏。过滤，干燥得丙酰-L-卡尼丁盐酸盐22.5克，收率88.2％。将其溶于乙醇，通入氨气1小时，滤除沉淀，加入380克丙酮、490克乙醚，过滤，得丙酰-L-卡尼丁内盐18.3克，收率95％。
本发明丙酰-L-卡尼丁盐酸盐的有关物质和含量的检测方法如下用高效液相色谱法测丙酰-L-卡尼丁含量，用薄层色谱法测丙酰卡尼丁有关物质。(1)用高效液相色谱法测定丙酰-L-卡尼丁含量，流动相配制法是在100克PH值为2.4的磷酸盐缓冲液中加入0.042克的庚烷磺酸钠，然后加入9克正丁醇制得，在流动相流速为每分钟1毫升，波长210纳米处测其吸收；供试品溶液配制取丙酰-L-卡尼丁盐酸盐50毫克，加甲醇溶解至2毫升。对照品溶液配制取丙酰-L-卡尼丁盐酸盐对照品50毫克，加甲醇溶解至2毫升。各取20微升注入液相色谱仪，记录色谱图。(2)用薄层色谱法测丙酰-L-卡尼丁有关物质，展开剂的配制方法为将正丁醇∶正己烷∶甲酸∶水依次按13∶5∶5∶10重量份混合；供试品溶液配制取丙酰-L-卡尼丁盐酸盐50毫克，加甲醇溶解至2毫升。取1毫升加甲醇至100毫升，作为对照品溶液。分别取15微升在同一微晶纤维素预制板上点样，层析缸展开，碘蒸汽显色。供试品溶液如显杂质斑点，其颜色与对照品相比，不得更深。
实施例2本发明丙酰-L-卡尼丁盐酸盐内盐的合成工艺如下取L-卡尼丁盐酸盐18克，加入6克对甲苯磺酸，用60克干燥丙酸，搅拌溶解，滴加丙酰氯5克，滴毕升温至50摄氏度，保温反应20小时。反应结束后取出并冷却至室温，加入丙酮390克，搅拌2小时，过滤，滤液中加入乙醚510克，搅拌至有白色沉淀析出，放入冰箱冷藏。过滤，干燥得丙酰-L-卡尼丁盐酸盐24.8克，收率88.3％。将其溶于乙醇，通入氨气1小时，滤除沉淀，加入400克丙酮、500克乙醚，过滤，得丙酰-L-卡尼丁内盐20.1克，收率94.9％。
本发明丙酰-L-卡尼丁盐酸盐内盐的有关物质和含量的检测方法如下用高效液相色谱法测丙酰-L-卡尼丁含量，用薄层色谱法测丙酰卡尼丁有关物质。(1)用高效液相色谱法测定丙酰-L-卡尼丁含量，流动相配制法是在100克PH值为2.4的磷酸盐缓冲液中加入0.042克的庚烷磺酸钠，然后加入3克正丁醇制得，在流动相流速为每分钟0.8毫升，波长230纳米处测其吸收；供试品溶液配制取丙酰-L-卡尼丁盐酸盐内盐40毫克，加甲醇溶解至2毫升。对照品溶液配制取丙酰-L-卡尼丁盐酸盐内盐对照品40毫克，加甲醇溶解至2毫升。各取20微升注入液相色谱仪，记录色谱图。(2)用薄层色谱法测丙酰-L-卡尼丁有关物质，展开剂的配制方法为将正丁醇∶甲酸∶水依次按13∶8∶5重量份混合；供试品溶液配制取丙酰-L-卡尼丁盐酸盐内盐40毫克，加甲醇溶解至2毫升。取1毫升加甲醇至100毫升，作为对照品溶液。分别取15微升在同一微晶纤维素预制板上点样，层析缸展开，碘蒸汽显色。供试品溶液如显杂质斑点，其颜色与对照品相比，不得更深。
实施例3本发明丙酰-L-卡尼丁盐酸盐内盐的合成工艺如下取L-卡尼丁16克，加入2克对甲苯磺酸，用40克丙酸，搅拌溶解，滴加丙酰氯30克，滴毕升温至45摄氏度，保温反应20小时。反应结束后取出并冷却至室温，加入丙酮410克，搅拌2小时，过滤，滤液中加入乙醚490克，搅拌至有白色沉淀析出，放入冰箱冷藏。过滤，干燥得丙酰-L-卡尼丁盐酸盐22.1克，收率88.0％。将其溶于乙醇，通入氨气1小时，滤除沉淀，加入380克丙酮、520克乙醚，过滤，得丙酰-L-卡尼丁内盐18.3克，收率95％。
本发明丙酰-L-卡尼丁盐酸盐内盐的有关物质和含量的检测方法如下用高效液相色谱法测丙酰-L-卡尼丁含量，用薄层色谱法测丙酰卡尼丁有关物质。(1)用高效液相色谱法测定丙酰-L-卡尼丁含量，流动相配制法是在100克PH值为2.4的磷酸盐缓冲液中加入0.042克的庚烷磺酸钠，然后加入9克正丁醇制得，在流动相流速为每分钟0.9毫升，波长225纳米处测其吸收；供试品溶液配制取丙酰-L-卡尼丁盐酸盐50毫克，加甲醇溶解至2毫升。对照品溶液配制取丙酰-L-卡尼丁盐酸盐对照品50毫克，加甲醇溶解至2毫升。各取20微升注入液相色谱仪，记录色谱图。(2)用薄层色谱法测丙酰-L-卡尼丁有关物质，展开剂的配制方法为将正丁醇∶甲酸∶水依次按13∶7∶6重量份混合；供试品溶液配制取丙酰-L-卡尼丁盐酸盐50毫克，加甲醇溶解至2毫升。取1毫升加甲醇至100毫升，作为对照品溶液。分别取15微升在同一微晶纤维素预制板上点样，层析缸展开，碘蒸汽显色。供试品溶液如显杂质斑点，其颜色与对照品相比，不得更深。
实施例4本发明丙酰-L-卡尼丁盐酸盐的合成工艺如下取L-卡尼丁盐酸盐18克，加入5克对甲苯磺酸，用60克丙酸，搅拌溶解，滴加丙酰氯5克，滴毕升温至50摄氏度，保温反应20小时。反应结束后取出并冷却至室温，加入丙酮380克，搅拌2小时，过滤，滤液中加入乙醚510克，搅拌至有白色沉淀析出，放入冰箱冷藏。过滤，干燥得丙酰-L-卡尼丁盐酸盐24.8克，收率88.3％。将其溶于乙醇，通入氨气1小时，滤除沉淀，加入420克丙酮、480克乙醚，过滤，得丙酰-L-卡尼丁内盐20.1克，收率94.9％。
本发明丙酰-L-卡尼丁盐酸盐的有关物质和含量的检测方法如下用高效液相色谱法测丙酰-L-卡尼丁含量，用薄层色谱法测丙酰卡尼丁有关物质。(1)用高效液相色谱法测定丙酰-L-卡尼丁含量，流动相配制法是在100克PH值为2.4的磷酸盐缓冲液中加入0.042克的庚烷磺酸钠，然后加入3克正丁醇制得，在流动相流速为每分钟1毫升，波长210纳米处测其吸收；供试品溶液配制取丙酰-L-卡尼丁盐酸盐内盐40毫克，加甲醇溶解至2毫升。对照品溶液配制取丙酰-L-卡尼丁盐酸盐内盐对照品40毫克，加甲醇溶解至2毫升。各取20微升注入液相色谱仪，记录色谱图。(2)用薄层色谱法测丙酰-L-卡尼丁有关物质，展开剂的配制方法为将正丁醇∶丙酮∶甲酸∶水依次按13∶4∶4∶9重量份混合；供试品溶液配制取丙酰-L-卡尼丁盐酸盐内盐40毫克，加甲醇溶解至2毫升。取1毫升加甲醇至100毫升，作为对照品溶液。分别取15微升在同一微晶纤维素预制板上点样，层析缸展开，碘蒸汽显色。供试品溶液如显杂质斑点，其颜色与对照品相比，不得更深。
权利要求
1.丙酰-L-卡尼丁的合成工艺，其特征在于a.先取L-卡尼丁或L-卡尼丁盐酸盐，加入对甲苯磺酸，再以丙酸为溶剂于搅拌下溶解；然后b.缓慢加入丙酰氯，经升温、保温反应后取出并冷却至室温，再加入丙酮，经搅拌和过滤后加入乙醚，然后再将经搅拌产生有白色沉淀析出液送冷藏，最后经过滤、干燥得丙酰-L-卡尼丁盐酸盐。
2.根据权利要求1所述的丙酰-L-卡尼丁的合成工艺，其特征在于将丙酰-L-卡尼丁盐酸盐溶于乙醇，通入氨气，滤除沉淀后再加入丙酮、乙醚，经过滤得丙酰-L-卡尼丁内盐。
3.丙酰-L-卡尼丁有关物质和含量的检测方法，其特征在于(1).用高效液相色谱法测定丙酰卡尼丁含量，流动相配制方法是在100重量份的PH值为2.4的磷酸盐缓冲液中加入0.042重量份的庚烷磺酸钠，然后加入(2～10)重量份的正丁醇制得，流速为每分钟0.8～1毫升，在波长210～232纳米处测其吸收；(2).用薄层色谱法测丙酰卡尼丁有关物质，展开剂的配制方法是将正丁醇∶丙酮或正己烷∶甲酸∶水依次按13∶(0～5)∶(4～8)∶(5～10)重量份混合，用微晶纤维素预制板点样，层析缸展开，碘蒸汽显色。
全文摘要
本发明提供丙酰－L－卡尼丁合成工艺及有关物质和含量的检测方法，所述的合成方法是用L－卡尼丁与丙酰氯的酰化反应以干燥丙酸为溶剂，在对甲苯磺酸催化条件下进行。所述的检测方法是用高效液相色谱法测定丙酰卡尼丁含量，流动相配制方法是在pH值为2.4的磷酸盐缓冲液中加入庚烷磺酸钠和正丁醇制得，流速为每分钟0.8～1毫升，在波长210～232纳米处测其吸收；用薄层色谱法测丙酰卡尼丁有关物质，展开剂的配制方法是将正丁醇、丙酮或正己烷、甲酸、水混合，用微晶纤维素预制板点样，层析缸展开，碘蒸汽显色。
文档编号C07C227/16GK1651402SQ20041003594
公开日2005年8月10日 申请日期2004年10月15日 优先权日2004年10月15日
发明者贡肖巍, 徐文芳, 郑家晴, 张建礼, 翟海民, 王丽, 崔美兰 申请人:山东齐都药业有限公司