专利名称：5-氟-2′-脱氧尿苷的芳酸酯衍生物及其合成方法
技术领域：
本发明涉及5-氟-2'-脱氧尿苷的芳酸酯衍生物及其酶催化制备方法。
背景技术：
5-氟-2'-脱氧尿苷是一类氟代脱氧核苷，广泛用于临床治疗各种癌症。但在临床上，此抗肿瘤试剂也表现出各种毒副作用，如导致肝炎及硬化型的胆道炎等(Grem丄L. Invest, New Drugs, 2000， 18: 299-313)。类似于其它的核苷类药物，5-氟-2'-脱氧尿苷的膜渗透力较差，不易被吸收，口服生物利用度较低；并且在体内不稳定，易被核苷磷酸化酶代谢为低抗癌活性的5-氟尿嘧啶(其抗癌活性比5-氟-2'-脱氧尿昔低5000倍)。
尽管5-氟-2'-脱氧尿苷作为临床用药具有上述缺点，然而研究发现对其进行化学修饰可以显著提高其口服生物利用度、降低其毒副作用。如亲脂性核苷
前药肠胃吸收较好。Nishiz證a等合成了一系列5-氟-2'-脱氧尿苷的脂肪酸二酯衍生物，对小鼠进行口服试验，发现各种二酯衍生物的抗肿瘤活性均比亲代化合物高(NishizawaY,，CasidaJ.E.Biochem. Pharmacol., 1965, 14: 1605-1619)。研究表明利用前药设计原理不仅能有效地增强5-氟-2'-脱氧尿苷的口服吸收，而且还可以防止其糖苷键的断裂。Amidon等合成了一系列5-氟-2'-脱氧尿苷的氨基酸酯前药，发现5'-L-异亮氨酸酯前药具有高的化学和酶解稳定性；并且各种氨基酸酯前药均能有效地增强5-氟-2'-脱氧尿苷糖苷键的稳定性；5'-L-异亮氨酸及5'-L-缬氨酸酯前药的膜渗透力比5-氟-2'-脱氧尿苷分别高8和11倍，故极大地增强了其口服生物利用度(Vig B.S., Lorenzi P丄，Mittal S., et al. Pharm.Res., 2003, 20: 1381-1388; Landowski C.P,, Song X.Q., Lorenzi RL., et al. Pharm.Res" 2005, 22: 1510-1518)。
5-氟-2'-脱氧尿苷的糖环上含有两个反应活性相似的羟基。采用一般化学 方法直接酯化时，区域选择性低，易产生大量的副产物，产物分离困难；为合 成确定位置的酰化产物，需要对糖环特定羟基进行保护和去保护等操作，反应 歩骤多、工艺复杂；同时该方法采用碱性催化剂，易产生含碱废液，对环境造 成严重污染(Xia Z.R, L丄，Miller G.G., et al. Arch. Pharm., 1999, 332:
286-294)。无疑，利用酶法区域选择性酰化是一条具有前景的替代途径。
发明内容
本发明的目的在于克服母药5-氟-2'-脱氧尿苷在临床上的诸多不足，提供 一类5-氟-2'-脱氧尿苷的芳酸酯衍生物。
本发明的另一目的在于针对现有技术存在的问题，提出酶催化合成上述化 合物的方法。
本发明以芳酸乙烯酯、丙酮肟酯或酸酐为酰基供体，利用酶催化5-氟-2'-
脱氧尿苷进行酰化反应，合成如通式(i)、 (n)、 (m)所示的化合物。通过选
择不同酶可以合成5-氟-2'-脱氧尿苷的3'-酯、5'-酯及3',5'-二酯衍生物。 本发明的目的通过如下技术方案实现
5-氟-2'-脱氧尿苷芳酸酯衍生物的结构如通式(I) , (11)， (III)所示
<formula>formula see original document page 5</formula>其中，n=l、 2、 3或4; m=2、 3或4。 5-氟-2'-脱氧尿苷芳酸酯衍生物的合成方法，其特征在于 在非水介质中加入5-氟-2'-脱氧尿苷和酰基供体，酰基供体与5-氟-2'-脱氧 尿苷的摩尔比为1.1一30: 1，非水介质的加入量是使5-氟-2'-脱氧尿苷的浓度 为1.0—40 mg/mL，按5-氟-2'-脱氧尿苷与酶的质量比为O.l — lO: 1加入酶， 在温度为20 — 6(TC、振荡速度为100—300rpm、常压下进行酰化反应，分离 纯化得到5-氟-2'-脱氧尿苷芳酸酯衍生物；
所述的酶为脂肪酶、蛋白酶中的一种或多种；所述脂肪酶来源于南极假丝 酵母(Gawfifeia a"torc//cof)、 棉状卩耆热丝孢菌(77zermom少ces/am(g7."osMs)、 米 黑根毛霉(i /H'zo膽cor脂W/e)、布克霍尔氏菌(5wr^7o/fifer/" ce戶c/a)、 萤光 {叚单胞菌(i^eMcfomowos1 yZwomscem1)、 黑曲霉(^y/ erg7'〃ws m.ger)、米黑毛霉 (A^cor m/e/^')或猪胰脏；所述的蛋白酶来源于枯草芽孢杆菌(5gc/〃w w磁/s)或地衣芽孢杆菌(B腦'〃iw//c/7ewybrm^);
所述的酰基供体为芳酸乙烯酯、丙酮肟酯或酸酐；
所述的非水介质为有机溶剂、离子液、有机溶剂混合体系、有机溶剂和离 子液的混合体系；所述有机溶剂为非质子有机溶剂；所述离子液为含低亲核性 阴离子的离子液；所述有机溶剂混合体系为非质子有机溶剂中的两种按照体积 比为1一19: l混合而得；所述有机溶剂和离子液的混合体系为含低亲核性阴 离子的离子液与非质子有机溶剂的混合物，其中离子液在混合体系中体积含量 为2—95%。
为进一步实现本发明目的，所述的非质子有机溶剂优选为二甲基亚砜、 W，,二甲基甲酰胺、吡啶、乙腈、丙酮、四氢呋喃、二噁烷、乙酸乙酯、异丙 醚、甲苯、二甲苯、乙苯、正己垸、正庚烷、正辛烷、正壬垸或环己垸。所述离子液的阴离子优选为四氟硼酸根离子、六氟磷酸根离子或二 (三氟 甲基磺酰)亚胺离子或氨基酸离子。
所述的振荡速度优选为150—250 rpm;所述反应温度优选为40—60 °C 。 所述分离纯化方法为反应结束后，过滤除酶、真空浓縮，再用甲醇、乙醇 或者乙酸乙酯结晶，或者经过硅胶柱层析得到目标产物。 本发明与现有的技术相比具有如下的优点
(1) 采用高效的生物催化剂——酶催化5-氟-2'-脱氧尿苷芳酸酯衍生物合成。 酶促反应具有高度选择性，并且通过选择不同的酶可以合成5-氟-2'-脱氧 尿苷的3'-酯、5'-酯及3',5'-二酯衍生物，因此克服了传统化学方法选择 性低、易生成副产物、需要保护和脱保护操作及产率低等缺点；
(2) 本发明无需基团保护和脱保护操作，反应过程简单易控，产物易分离；
(3) 本发明是在温度为20—6(TC、振荡速度为100—300rpm、常压条件下， 利用酶催化制备5-氟-2'-脱氧尿苷的芳酸酯衍生物，反应条件温和、环境 友好。
具体实施例方式
为更好地理解本发明，下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，但 是本发明要求保护的范围并不局限于实施例表示的范围。 实施例1: 5-氟-2'-脱氧尿苷的3'-苯乙酸酯的合成
将5-氟-2'-脱氧尿苷(101 mg, 0.41 mmol)、苯乙酸乙烯酯(1.64mmo1)、
30 mL四氢呋喃加入密封具塞三角瓶中，接着加入200 mg来源于布克霍尔氏 菌。w^o/(^nV7ce; ac/a)的固定化脂肪酶，常压下置于50 。C 、 200 rpm的恒 温振荡器内振荡，利用TLC监控反应。反应结束后，过滤、真空下浓縮滤液、 最后经柱层析纯化得产物134 mg，收率为90%，白色粉末，纯度大于99%。5-氟-2'-脱氧尿苷的3'-苯乙酸酯在TLC上的Rf值及核磁数据如下Rf=0.31 (PE/EA=1/1); 'H画R (DMSO-d6) S: 2.27 (apparent d, 2H, H2')， 3.64 (s, 2H, H2〃), 3.74 (s, 2H, H5,)， 4.02 (s, 1H, H4)， 5.26 (s, 1H, H3')， 5.33 (br s, 1H, OH)， 6.17 (t， J=7.2 Hz， 1H, Hr), 7.25-7.35 (m， 5H, H0, Hp, Hm), 8.21 (d, J=7.2 Hz, 1H， H6)， 11,88 (d,戶4.0 Hz, 1H, H3); 13C NMR (DMSO-d6) S: 36.9 (C2), 40.1 (C2,')， 61.3 (C5')， 75.2 (C3,)， 84.4 (C4), 84.9 124.3， 124.6 (C6), 126.9 (Cp), 128.4 (Cm),
129.4 (C0), 134.1 (CO, 139.0, 141.3 (C5), 149.1 (C2), 156.9, 157.1 (C4)， 170.9 (Cr)。 核磁数据表明该化合物为所述的目标产物。
实施例2: 5-氟-2'-脱氧尿苷的5'- (3-苯丙酸)酯的合成 将5-氟-2'-脱氧尿苷(101 mg, 0.41 mmol)、3-苯丙酸丙酮肟酯(1.64mmo1)、 4mL正己烷/吡啶(1/6,体积比)加入密封具塞三角瓶中，接着加入100mg枯草 芽孢杆菌(&"7towto'fe)蛋白酶，常压下置于6(TC、 250rpm的恒温振荡 器内振荡，利用TLC监控反应。反应结束后，过滤、真空下浓縮滤液、最后 经柱层析纯化得产物133 mg，收率为86%，白色粉末，纯度大于99%。 5-氟-2'-脱氧尿苷的5'- (3-苯丙酸)酯在TLC上的Rf值及核磁数据如下Rf=0.33 (PE/EA=l/2); NMR (DMSO-d6) 5: 2.11-2.24 (m, 2H, H2')， 2.68 (t， /=7.6 Hz, 2H: H2〃)， 2.87 (t， 《/=7.6 Hz, 2H, H3"), 3.93 (br s， 1H, H3')， 4.20-4.25 (m, 3H, H4、 H5')， 5.34 (br s, 1H， OH), 6.15 (t， 1H， Hr), 7.19-7.90 (m, 5H, H0, Hm, Hp), 7.91 (d, /=7.2 Hz, 1H, H6), 11.89 (d,卢4.8 Hz， 1H, H3); 13C NMR (DMSO-cf6) & 30.2 (C2.,)， 35.0 (C3")， 38.7 (C2〕， 63.8 (C5), 70.0 (C3')， 83.9 (C4〕， 84.6124.6, 124.9 (C6)， 126.1 (Cp)， 128.2, 128.4 (Cm， C0)， 139.0， 141.3 (C5), 140.4 (Q)， 149.0 (C2), 156.9, 157.2 (C4), 172.1 (Cr)。核磁数据表明该化合物为所述的目标产物。 实施例3: 5-氟-2'-脱氧尿苷的3'-(3-苯丙酸)酯的合成将5-氟-2'-脱氧尿苷(101 mg, 0.41 mmol)、 3-苯丙酸乙烯酉旨(8.2mmo1)、 30 mL [C4MIm]BF4加入密封具塞三角瓶中，接着加入50 mg来源于布克霍尔 氏菌(^A/zoWm'Gce戸c,'G)的固定化脂肪酶，常压下置于40。C、 200rpm的 恒温振荡器内振荡，利用TLC监控反应。反应结束后，过滤、萃取、真空下 除去溶剂、最后经柱层析纯化得产物139 mg，收率为90%，白色粉末，纯度 大于99%。 5-氟-2'-脱氧尿苷的3'-(3-苯丙酸)酯在TLC上的Rf值及核磁数据如 下Rf=0.36 (PE/EA=1/1); !H画R (DMSO-d6) S: 2.18-2.29 (m， 2H, H2')， 2.69 (t, 7=7.6 Hz, 2H, H2')， 2.88 (t, /=7.6 Hz, 2H, H3〃)， 3.63 (br s, 2H, H5')， 3.95 (br s, 1H， H4), 5.22 (t, J^2.4 Hz, H3,)， 5.34 (br s, 1H， OH), 6.15 (t, /=6.8 Hz, 1H, H!,), 7.17-7.31 (m, 5H， H0, Hm, Hp)， 8.22 (d, /=7.2 Hz, 1H, H6), 11.89 (d, /=4.8 Hz, 1H, H3); 13C画R (DMSO-4) & 30.2 (C2〃)， 35.0 (C3〃)， 36.9 (C2,)， 61.3 (C5')， 74.8 (C3,)， 84.4 (C4〕， 84.9 124.3， 124.6 (C6), 126.2 (Cp), 128.3 (Cm), 128.4 (C0), 139.0, 141.2 (C5), 140.3 (Ci), 149.1 (C2), 156.9, 157.1 (C4), 171.9 (Cr)。核磁数据表明该
化合物为所述的目标产物。
实施例4: 5-氟-2'-脱氧尿苷的3',5'-二(5-苯戊酸)酯的合成 将5-氟-2'-脱氧尿苷(101 mg, 0.41 mmol)、 5-苯戊酸乙烯酯G.28mmo1)、 15 mL正己烷/四氢呋喃(1/3, v/v)加入密封具塞三角瓶中，接着加入200 mg来 源于棉状嗜热丝孢菌(T7zmwom少ces /""wg/"osw)的固定化脂肪酶和200 mg 来源于布克霍尔氏菌(B"A/^/^r^cepac/a)的固定化脂肪酶，常压下置于60 °C、 150rpm的恒温振荡器内振荡，利用TLC监控反应。反应结束后，过滤、 真空下浓縮滤液、最后经柱层析纯化得产物142mg，收率为61%，白色粉末， 纯度大于99%。 5-氟-2'-脱氧尿苷的3',5'-二(5-苯戊酸)酯在TLC上的Rf值及 核磁数据如下Rf=0,24 (PE/EA=2/1); 'H NMR (CDC13) S: 1.67 (br s, 8H, H3",H4'), 2.04-2.11 (m, 1H, H2')， 2.38 (apparent t, 4H, H2,〕， 2.45-2.50 (m, IH, H2), 2.63 (apparent d, 4H, H5"), 4.22 (apparent t, IH, H4), 4.26-4.43 (m, 2H, H5')， 5.16-5.18 (m, IH, H3〕， 6.28 (t, /=7.2 Hz, IH, H", 7.15-7.30 (m, 5H, H0, Hm, Hp)， 7.62 (d, 7=6.4 Hz, IH, H6), 9.64 (d, /=4.4 Hz， IH, H3); 13C NMR (CDC13) S: 25.0 (C3'〕, 31.4 (C4")， 34.5, 34.7 (C2〃)， 36.1 (C5")， 38.5 (C2')， 64.3 (C5), 74.3 (C3')， 83.3 (C4')， 85.9 123.6, 123.9 (C6), 126.5 (Cp), 129.0 (C0, Cm), 139.0, 140.2， 142.5 (C5,
Ci)， 149.5 (C2), 157.2, 157.5 (C4)， 173.4, 173.7 (Cr)。核磁数据表明该化合物为所
述的目标产物。
实施例5: 5-氟-2'-脱氧尿苷的5'-(4-苯丁酸)酯的合成
将5-氟-2'-脱氧尿苷(101 mg, 0.41 mmol)、 4-苯丁酸乙烯酯(6.15 mmol)、 40 mL [C4MIm]PF6/丙酮(l/9,v/v)加入密封具塞三角瓶中，接着加入500 mg 来源于地衣芽孢杆菌(S"cz7/^ //c/zem/orm/s)的蛋白酶，常压下置于30 °C、 250rpm的恒温振荡器内振荡，利用TLC监控反应。反应结束后，过滤、真空 下浓縮滤液、最后经柱层析纯化得产物133 mg，收率为83%，白色粉末，纯 度大于99%。 5-氟-2'-脱氧尿苷的5'-(4-苯丁酸)酯在TLC上的Rf值及核磁数据 如下Rf=0.12 (PE/EA=1/1); !H画R (DMSO-d6) S: 1.85 (apparent t, 2H， H3"), 2.16-2.26 (m， 2H， H2〕， 2.34 (t, /=6.8 Hz, 2H, H2〃)， 2.59 (t， /=7.2 Hz， 2H, Hr), 3.94 (apparent d, IH, H4〕， 4.24 (apparent d, 3H, H3'， H5〕， 5.35 (br s, IH, OH), 6.14 (apparent d, IH, Hr), 7.16-7.26 (m， 5H, H。， Hm, Hp)， 7.86 (d， /=6.8 Hz， 1H， H6), 11.76 (br s, IH, H3); l3C画R (DMSO-^) S: 26.3 (C3',)， 32.8 (C2")， 34.3 (C4,,)， 38.7 (C2〕， 63.8 (C5), 70.0 (C3), 83.9 (C4〕， 84.6 (Cr), 124.6， 124.9 (C6), 125.9 (Cp), 128.3 (C0, Cm), 139.0, 141.4 (C5， C;), 149.0 (C2), 156.9, 157.2 (C4), 172.6 (Cr)。核 磁数据表明该化合物为所述的目标产物。实施例6: 5-氟-2'-脱氧尿苷的3'-(4-苯丁酸)酯的合成
将5-氟-2'-脱氧尿苷(101 mg， 0.41 mmol)、 4-苯丁酸酐(2.46 mmol)、 50 mL 环己烷/丙酮(1/5, v/v)加入密封具塞三角瓶中，接着加入300 mg来源于萤光假 单胞菌(i^e^fomo"as/^omscms)的脂肪酶，常压下置于50。C、 300 rpm的 恒温振荡器内振荡，利用TLC监控反应。反应结束后，过滤、真空下浓縮滤 液、最后经柱层析纯化得产物153 mg，收率为95%，白色粉末，纯度大于99%。 5-氟-2'-脱氧尿苷的3'-(4-苯丁酸)酯在TLC上的Rf值及核磁数据如下RfK).36 (PE/EA=1/1); 丽R (DMSO-d6) S: 1.81-1.89 (m， 2H, H3"), 2.27-2.37 (m. 4H, H2,， H2"), 2.60 (t, /=7.4 Hz, H4")， 3.66 (apparent t， 2H, H5,)， 4.01 (apparent d， 1H, H4,)， 5.24 (apparent t， 1H, H3〕， 5.34 (t, /=5.2 Hz, 1H, OH)， 6.17 (t, /=7.2 Hz, 1H， H!'), 7.19-7.31 (m, 5H， H0, Hm, Hp)， 8.23 (d, /= 7.2 Hz, 1H, H6), 11.90 (s, 1H, H3); 13C NMR (DMSO-d6) S: 26.2 (C3")， 32.9 (C2,')， 34.3 (C4',)， 36.9 (C2〕， 61.3 (C5')， 74.7 (C3')， 84.4 (C4')， 85.0 (Cr), 124.3, 124.6 (C6)， 125.9 (Cp), 128.4 (C0， Cm), 139.0, 141.3 (C5, Ci)， 149.1 (C2), 156.9， 157.1 (C4)， 172.3 (C「)。核磁数据表明该化合物 为所述的目标产物。
实施例7: 5-氟-2'-脱氧尿苷的3'-(5-苯戊酸)酯的合成 将5-氟-2'-脱氧尿苷(101 mg， 0.41 mmol)、 5-苯戊酸乙烯酯(2.05 mmol)、 20 mL丙酮加入密封具塞三角瓶中，接着加入20 mg来源于布克霍尔氏菌 (BwA/zoWen'acepac/a)的固定化脂肪酶，常压下置于6(TC、 300 rpm的恒温 振荡器内振荡，利用TLC监控反应。反应结束后，过滤、真空下浓縮滤液、 最后经柱层析纯化得产物160mg，收率为96%，白色粉末，纯度大于99%。 5-氟-2'-脱氧尿苷的3'-(5-苯戊酸)酯在TLC上的Rf值及核磁数据如下Rfi.36 (PE/EA=1/1); 'H画R (DMSO-^) & 1.57 (br s, 4H, H3", H4〃)， 2.26-2.40 (m, 4H,H2'， H2"), 2.58 (t, J=7.2 Hz, 2H, H5"), 3.65 (apparent d, 2H， H5')， 4.00 (br s, 1H， H4')， 5.24 (apparent d, IH, H3,)， 5.36 (t,声4.8 Hz, IH, OH), 6.16 (t,风8 Hz, IH, H》， 7.15-7.29 (m, 5H, H。， Hm, Hp), 8.22-8.25 (m, 1H， H6), 11.91 (d, /=4.8 Hz, IH, H3); 13C NMR (DMSO-4) S: 23.9 (C3'〕， 30.3 (C4")， 33.3 (C2'〕， 34.8 (C5〃)， 37.0 (C2〕， 61.3 (C5,)， 74.7 (C3')， 84.5 (C4')， 85.0 (Cr), 124.3, 124.7 (C6), 125.7 (Cp), 128.3 (C0， Cm)， 139.0, 141.3 (C5), 141.9 (C;), 149.1 (C2), 156.9, 157.2 (C4), 172.5 (d')。核磁
数据表明该化合物为所述的目标产物。
实施例8: 5-氟-2'-脱氧尿苷的5'-(5-苯戊酸)酯的合成 将5-氟-2'-脱氧尿苷(101 mg， 0.41 mmol)、5-苯戊酸丙酮肟酯(0.62 mmol)、 20 mL [C4MIm]BF4/四氢呋喃(1/19, v/v)加入密封具塞三角瓶中，接着加入400 mg来源于米黑根毛霉(i /^wm/cor m/e/ze)的固定化脂肪酶，常压下置于25 °C、 300rpm的恒温振荡器内振荡，利用TLC监控反应。反应结束后，过滤、真空 下浓縮滤液、最后经柱层析纯化得产物123 mg，收率为74%，白色粉末，纯 度大于99%。 5-氟-2'-脱氧尿苷的5'-(5-苯戊酸)酯在TLC上的Rf值及核磁数 据如下RiN).12(PE/EA4/l); 画R (DMSO-^) 5: 1.56-1.61 (m, 4H, H3,,， H4"), 2.13-2.25 (m, 2H, H2〕， 2.37 (t,月.6 Hz, 2H, H2〃)， 2.57 (t， J=6.8 Hz, 2H, H5〃)， 3.94 (apparent d， 1H, H4')， 4.24 (apparent d， 3H, H5'， H3〕， 5.45 (br s, IH, OH), 6.14-6.16 (m, IH, Hr), 7.14-7.28 (m, 5H, H0, Hm, Hp), 7.90 (d, J=7.2 Hz， IH, H6), 11.89 (d, /=4.8 Hz, IH, H3); 13C画R (DMSO-4) S: 24.1 (C3")， 30.3 (Q,'), 33.3 (C2")， 34.8 (C5")， 38.8 (C2), 63.7 (C5〕， 70.0 (C3〕， 83.9 84.6 (Cr), 124.5, 124.8 (C6), 125.7 (Cp), 128.3 (C0, Cm), 139.0, 141.3 (C5), 141.9 (C;), 149.0 (C2), 156.9, 157.2 (C4), 172.7 (C^。核磁数据表明该化合物为所述的目标产物。
同时，实验结果表明来源于南极假丝酵母(Com^/a a"tor"/M)、黑曲霉mgw)或猪胰脏的脂肪酶均能高效催化合成5-氟-2'-脱氧尿苷的
5'-芳酸酯。
从上述实施例可以看出，本方法反应条件温和(20 — 60 °C， 100 — 300 rpm)，在绿色生物催化剂(酶)作用下，通过一步反应即可高效合成5-氟-2'-脱氧尿苷的各种芳酸酯衍生物。反应后，过滤即可除去酶，后续产物分离纯化 工序简单、易操作，纯化后收率达70—92%，克服了传统化学方法选择性低、 需要耗时费力的保护/脱保护歩骤、易生成副产物及产率低等缺点。
权利要求
1、5-氟-2′-脱氧尿苷芳酸酯衍生物，其特征在于其结构如通式(I)，(II)，(III)所示其中，n＝1、2、3或4；m＝2、3或4。
2、权利要求l所述5-氟-2'-脱氧尿苷芳酸酯衍生物的合成方法，其特征在于 在非水介质中加入5-氟-2'-脱氧尿苷和酰基供体，酰基供体与5-氟-2'-脱氧尿苷 的摩尔比为1.1一30: 1，非水介质的加入量是使5-氟-2'-脱氧尿苷的浓度为1.0 一40mg/mL，按5-氟-2'-脱氧尿苷与酶的质量比为0.1 _ 10: 1加入酶，在温度 为20—6(TC、振荡速度为100—300rpm、常压下进行酰化反应，分离纯化得 到5-氟-2'-脱氧尿苷芳酸酯衍生物；所述的酶为脂肪酶、蛋白酶中的一种或多种；所述脂肪酶来源于南极假丝 酵母、棉状嗜热丝孢菌、米黑根毛霉、布克霍尔氏菌、萤光假单胞菌、黑曲霉、 米黑毛霉或猪胰脏；所述的蛋白酶来源于枯草芽孢杆菌或地衣芽孢杆菌；所述的酰基供体为芳酸乙烯酯、丙酮肟酯或酸酐；所述的非水介质为有机溶剂、离子液、有机溶剂混合体系、有机溶剂和离 子液的混合体系；所述有机溶剂为非质子有机溶剂；所述离子液为含低亲核性 阴离子的离子液；所述有机溶剂混合体系为非质子有机溶剂中的两种按照体积 比为1 —19: l混合而得；所述有机溶剂和离子液的混合体系为含低亲核性阴离于的离子液与非质子有机溶剂的混合物，其中离子液在混合体系中体积含量为2 — 95%。
3、根据权利要求2所述的5-氟-2'-脱氧尿苷芳酸酯衍生物的合成方法，其 特征在于所述的非质子有机溶剂为二甲基亚砜、W，AT-二甲基甲酰胺、吡啶、 乙腈、丙酮、四氢呋喃、二噁烷、乙酸乙酯、异丙醚、甲苯、二甲苯、乙苯、 正己烷、正庚烷、正辛垸、正壬垸或环己烷。
4、 根据权利要求2所述的5-氟-2'-脱氧尿苷芳酸酯衍生物的合成方法，其特征在于所述离子液的阴离子为含四氟硼酸根离子、六氟磷酸根离子或二(三 氟甲基磺酰)亚胺离子或氨基酸离子。
5、 根据权利要求2所述的5-氟-2'-脱氧尿苷芳酸酯衍生物的合成方法，其 特征在于所述的振荡速度为150 —250rpm;所述的反应温度为40 — 60。C 。
6、 根据权利要求2所述的5-氟-2'-脱氧尿苷芳酸酯衍生物的合成方法，其 特征在于所述分离纯化方法为反应结束后，过滤除酶、真空浓缩，再用甲醇、 乙醇或者乙酸乙酯结晶，或者经过硅胶柱层析得到目标产物。
全文摘要
本发明公开了5-氟-2′-脱氧尿苷的芳酸酯衍生物及其合成方法。该合成方法是在非水介质中加入5-氟-2′-脱氧尿苷和酰基供体，5-氟-2′-脱氧尿苷的浓度为1.0-40mg/mL，酰基供体与5-氟-2′-脱氧尿苷的摩尔比为1.1-30∶1，按5-氟-2′-脱氧尿苷与酶的质量比为0.1-10∶1加入酶，在温度为20-60℃、振荡速度为100-300rpm、常压下进行酰化反应，分离得到5-氟-2′-脱氧尿苷芳酸酯衍生物。本发明合成了各种结构新颖、具有潜在药用价值的5-氟-2′-脱氧尿苷芳酸酯衍生物，该方法具有条件温和、环境友好、反应具有高度区域选择性、反应过程简单可控和产物易分离等优点。
文档编号C07H19/073GK101508714SQ20091003807
公开日2009年8月19日 申请日期2009年3月20日 优先权日2009年3月20日
发明者宗敏华, 宁 李 申请人:华南理工大学