专利名称：一种提取哈巴俄苷的方法
技术领域：
本发明属于天然药物化学领域，尤其是涉及一种提取哈巴俄苷的方法。
背景技术：
哈巴俄苷，环烯醚萜苷类物质。分子式=C19H18O8；理化性质淡黄色晶体(甲醇)，mp. 189 190°C。哈巴俄苷具有抗炎、降压，抗乙肝病毒及作用。玄参为玄参科植物玄参的干燥根。其味甘、苦、咸，性微寒，归肺、胃经，具有凉血滋阴，泻火解毒的功效，用于热病伤阴，温毒发斑，津伤便秘，骨蒸痨嗽，目赤，咽痛，瘰疠，白喉，痈肿疮毒等症。其化学成分主要包括环烯醚萜苷类、苯丙素类、三萜皂苷、有机芳酸、黄酮类、脂肪酸及挥发油等。目前，现有提取哈巴俄苷方法较少，多为粗提取物。提供一种哈巴俄苷生产工艺，十分必要，更有助于对天药物单体药理的研究，有利于对中药有效成分的筛选。
发明内容
本发明要解决技术问题是提供一种操作简便、生产成本低、质量稳定的哈巴俄苷提取方法。为解决上述技术问题，本发明采用下列技术方案一种提取哈巴俄苷的方法，其特征在于包含以下步骤1)提取把玄参药材粉碎，加5-15倍量提取溶剂回流1-2小时，提取2-3次，滤过提取液减压回收试剂，得浓缩液；2)聚酰胺柱分离上述提取加适量水分散，加入聚酰胺柱吸附，水醇梯度洗脱，收集哈巴俄苷洗脱液，减压回收洗脱液至密度1. 05-1. 1，得浓缩液；3)萃取上述浓缩液加乙酸乙酯萃取4-6次，收集乙酸乙酯萃取液，减压浓缩至1/6-1/10体积，加入石油醚，搅拌均勻放置结晶；4)重结晶上述结晶物滤出，用甲醇回流溶解，冷却后加入等体积的氯仿，放置结晶，滤出低温干燥即得哈巴俄苷。所述步骤1)中的玄参为新鲜玄参。所述步骤1)中的提取溶剂为50-70%甲醇、40-80%乙醇或50-80%丙酮溶液。所述步骤2)中的梯度洗脱为5-10BV水一4-6BV20-30 %乙醇(甲醇)溶液—S-7BV5O-7O^乙醇(甲醇)溶液。所述步骤幻中的每次萃取乙酸乙酯加入量为浓缩液的2-4倍量，石油醚加入量为浓缩液的1/3-1/5。所述步骤4)中的甲醇为无水甲醇。本发明采用新鲜玄参为原料，可以减少在晾晒中哈巴俄苷的损失，提高了收率，聚
3酰胺树脂纯化和不同试剂结晶，和硅胶柱、高效液相以及逆流色谱工艺相比，具有操作简便、易于放大之优点。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式
具体实施例方式实施例1 取新鲜玄参，粉碎，取1kg，投入烧瓶中，加入5L60%甲醇，回流提取2小时，放出液体，再加等体积甲醇回流提取2次，合并提取过滤后，旋转蒸发仪中减压无醇，加适量水分散后，加入500ml聚酰胺树脂柱吸附，吸附结束，依次用5L水一2L30%甲醇溶液 —3. 5L50%甲醇溶洗脱，收集50%甲醇洗脱液减压浓缩至密度1. 1得液体50ml，放入分液漏斗中，加入IOOml乙酸乙酯充分振荡，萃取6次，合并乙酸乙酯层减压回收至IOOml放出， 倒入三角瓶中，加入20ml石油醚，搅拌均勻放置结晶，滤出结晶，用甲醇回流溶解，冷却后加入等体积的氯仿，放置结晶，滤出低温干燥得哈巴俄苷产品，含量98%。实施例2 取新鲜玄参，粉碎，取1kg，投入烧瓶中，加入5L60%乙醇，回流提取2小时，放出液体，再加等体积乙醇回流提取2次，合并提取过滤后，旋转蒸发仪中减压无醇，加适量水分散后，加入500ml聚酰胺树脂柱吸附，吸附结束，依次用5L水一2L30 %乙醇溶液 —3. 5L50%乙醇溶洗脱，收集50%乙醇洗脱液减压浓缩至密度1. 1得液体50ml，放入分液漏斗中，加入IOOml乙酸乙酯充分振荡，萃取6次，合并乙酸乙酯层减压回收至IOOml放出， 倒入三角瓶中，加入20ml石油醚，搅拌均勻放置结晶，滤出结晶，用甲醇回流溶解，冷却后加入等体积的氯仿，放置结晶，滤出低温干燥得哈巴俄苷产品，含量98.2%。实施例3 取新鲜玄参，粉碎，取1kg，投入烧瓶中，加入5L70%丙酮，回流提取2小时，放出液体，再加等体积丙酮回流提取2次，合并提取过滤后，旋转蒸发仪中减压回收，加适量水分散后，加入500ml聚酰胺树脂柱吸附，吸附结束，依次用5L水-—2L30 %甲醇溶液 —3. 5L50%甲醇溶洗脱，收集50%甲醇洗脱液减压浓缩至密度1. 1得液体50ml，放入分液漏斗中，加入IOOml乙酸乙酯充分振荡，萃取6次，合并乙酸乙酯层减压回收至IOOml放出， 倒入三角瓶中，加入20ml石油醚，搅拌均勻放置结晶，滤出结晶，用甲醇回流溶解，冷却后加入等体积的氯仿，放置结晶，滤出低温干燥得哈巴俄苷产品，含量99%。实施例4 取新鲜玄参，粉碎，取^g，投入小型多功能提取罐中，加入50L70%甲醇，回流提取2小时，放出液体，加等体积甲醇回流提取1次，合并提取过滤后，旋转蒸发仪中减压无醇，加适量水分散后，加入2500ml聚酰胺树脂柱吸附，吸附结束，依次用25L水一15L20%甲醇溶液一15L60%甲醇溶洗脱，收集60%甲醇洗脱液减压浓缩至密度1. 05得液体300ml， 放入分液漏斗中，加入1200ml乙酸乙酯充分振荡，萃取4次，合并乙酸乙酯层减压回收至 480ml放出，倒入三角瓶中，加入160ml石油醚，搅拌均勻放置结晶，滤出结晶，用甲醇回流溶解，冷却后加入等体积的氯仿，放置结晶，滤出低温干燥得哈巴俄苷产品，含量98. 5%。实施例5
取新鲜玄参，粉碎，取10kg，投入小型多功能提取罐中，加入50L50%丙酮，回流提取1小时，放出液体，加等体积丙酮回流提取2次，合并提取过滤后，旋转蒸发仪中减压回收丙酮，加适量水分散后，加入5000ml聚酰胺树脂柱吸附，吸附结束，依次用40L水一20L30%甲醇溶液一30L60%甲醇溶洗脱，收集60%甲醇洗脱液减压浓缩至密度1. 1得液体500ml，放入分液漏斗中，加入IOOOml乙酸乙酯充分振荡，萃取5次，合并乙酸乙酯层减压回收至500ml放出，倒入三角瓶中，加入IOOml石油醚，搅拌均勻放置结晶，滤出结晶，用甲醇回流溶解，冷却后加入等体积的氯仿，放置结晶，滤出低温干燥得哈巴俄苷产品，含量98%。
权利要求
1.一种提取哈巴俄苷的方法，其特征在于包含以下步骤1)提取把玄参药材粉碎，加5-15倍量提取溶剂回流1-2小时，提取2-3次，滤过提取液减压回收试剂，得浓缩液；2)聚酰胺柱分离上述提取加适量水分散，加入聚酰胺柱吸附，水醇梯度洗脱，收集哈巴俄苷洗脱液，减压回收洗脱液至密度1. 05-1. 1，得浓缩液；3)萃取上述浓缩液加乙酸乙酯萃取4-6次，收集乙酸乙酯萃取液，减压浓缩至 1/6-1/10体积，加入石油醚，搅拌均勻放置结晶；4)重结晶上述结晶物滤出，用甲醇回流溶解，冷却后加入等体积的氯仿，放置结晶， 滤出低温干燥即得哈巴俄苷。
2.如权利要求1所述提取哈巴俄苷的方法，其特征在于所述步骤1)中的玄参为新鲜玄参。
3.如权利要求1所述提取哈巴俄苷的方法，其特征在于所述步骤1)中的提取溶剂为 50-70 %甲醇、40-80 %乙醇或50-80 %丙酮溶液。
4.如权利要求1所述提取哈巴俄苷的方法，其特征在于所述步骤2)中的梯度洗脱为 5_10BV水一4-6BV20_30%乙醇(甲醇)溶液一S-7BV5O-7O^乙醇(甲醇)溶液。
5.如权利要求1所述提取哈巴俄苷的方法，其特征在于所述步骤幻中的每次萃取乙酸乙酯加入量为浓缩液的2-4倍量，石油醚加入量为浓缩液的1/3-1/5。
6.如权利要求1所述提取哈巴俄苷的方法，其特征在于所述步骤4)中的甲醇为无水甲
全文摘要
本发明公开了一种提取哈巴俄苷的方法，方法是以新鲜玄参为原料，粉碎后加入甲醇、乙醇或丙酮水溶液回流提取，提取液回收试剂后，加入聚酰胺柱分离，依次5-10BV水→4-6BV20-30％乙醇(甲醇)溶液→5-7BV50-70％乙醇(甲醇)溶液洗脱，洗脱液浓缩后加乙酸乙酯萃取4-6次，萃取液浓缩加石油醚结晶，再甲醇氯仿混合溶液重结晶，低温干燥得哈巴俄苷。本工艺重现性高，适合苷含量哈巴俄苷生产。
文档编号C07H1/08GK102372753SQ20101026307
公开日2012年3月14日 申请日期2010年8月26日 优先权日2010年8月26日
发明者刘东锋, 李法庆, 杨成东 申请人:苏州宝泽堂医药科技有限公司