专利名称：一种高含量藤黄酸的纯化方法
技术领域：
本发明属于天然药物化学领域，尤其是涉及一种高含量藤黄酸的纯化方法。
背景技术：
藤黄酸分子式C38H44O8。分子量6 .75。理化性质金黄色粉末，其吡啶盐，橙色针状结晶。藤黄酸天然存在于藤黄科植物藤黄树的干燥树脂中。具有较强的抗癌活性。临床研究证明，对乳腺癌、淋巴瘤、皮肤癌、胃癌均有一定疗效。藤黄为藤黄科植物藤黄树干渗出的树脂。性味酸涩，有毒。用于杀虫解毒。用于痈疽、疮肿、无名肿毒。产于印度、越南等地，国内产地在云南，湖南、湖北一带。主要含有藤黄酸和新藤黄酸等有效成分。现有提取分离藤黄酸方法中国专利(申请号200410014061) “一种藤黄酸的生产工艺”，该工艺公开的方法是将原料藤黄粉碎成粗粉，用乙酸乙酯或氯仿或饱和正丁醇回流提取，抽滤，合并提取液， 浓缩得浸膏状，再用碱性溶液萃取，分取碱水层，用盐酸水溶液调，并用乙酸乙酯或氯仿或饱和正丁醇萃取酸水液，分取并合并有机溶剂层，水洗至中性，常压浓缩，得藤黄酸粗提物； 藤黄酸粗提物继续用乙醚或丙酮溶解，加入有机碱和石油醚搅拌均勻，半塞常温放置，析晶，抽滤，析出物分别用碱性溶液及蒸馏水洗涤，干燥；取上述干燥物用乙醚溶解，加入石油醚水浴析晶，抽滤，乙醚-石油醚混合溶液洗涤干燥；干燥物用乙醚溶解结晶，得橙黄色粉末状藤黄酸。此法所得产品含量较高。中国专利(申请号02148321)“藤黄酸类化合物的盐，其制备方法和以该盐为活性成份的药物组合物”，该发明以金属盐形式提高藤黄酸质量分数。此法所得含量不高。中国专利(申请号201010111243.4) “超临界流体提取中药藤黄中的藤黄酸和新藤黄酸的方法”，该专利公开的方法是将藤黄原料颗粒投入萃取釜中，连续输入超临界流体、夹带剂进行萃取，将含溶解萃取物的高压流体降压到低于临界压力以下，进入分离釜分离出溶质产品。此法设备成本高，后续还要纯化。王可等发表的“七种大孔树脂对新藤黄酸吸附分离的初步研究”，该文献采用了 AB-8树脂纯化得到了很好的效果。只是课题研究树脂纯化效果。如上所述，现有工艺存在高含量的藤黄酸工艺较少，而且现有工艺复杂繁琐。
发明内容
本发明要解决技术问题是提供一种操作简便、生产成本低的藤黄酸纯化方法。为解决上述技术问题，本发明技术方案如下一种高含量藤黄酸的纯化方法，其特征在于包含以下步骤
1)活性炭柱纯化取藤黄药材粉碎60-100目，无水甲醇回流溶解，滤去不溶物，加颗粒活性碳，回收甲醇，把活性碳烘干装柱，洗脱剂梯度洗脱，有效成分流分浓缩至 1/10-1/15体积，冷藏结晶；2)大孔树脂柱纯化过滤结晶物，加适量水溶解，加PH9-10的氨水，搅拌使之完全溶解，盐酸调节PH1-3，加入大孔树脂柱吸附，5-7倍量30-50%甲醇洗脱杂质，再取5_8倍量 70-90%甲醇洗脱藤黄酸，回收甲醇，放置结晶；3)重结晶滤出结晶物烘干，甲醇氯仿混合溶液回流溶解冷藏结晶，结晶物干燥得藤黄酸。所述步骤1)中洗脱剂梯度洗脱为依次8-15倍量石油醚一5-10倍量氯仿一6-10
倍量乙酸乙酯洗脱。所述步骤2)中的大孔树脂为NKA-II型大孔树脂。所述步骤3)中的甲醇氯仿混合比例为1 1-3。本发明采用活性柱和大孔树脂柱分离藤黄酸，与单纯结晶法相比，具有缩短生产周期和减少试剂容量的优点，同时还易工业化。下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式
具体实施例方式实施例1 取藤黄粉碎60目，取500g，投入烧瓶中，无水甲醇回流溶解，滤去不溶物，加颗粒活性碳1kg，减压回收甲醇后，把活性碳烘干装柱，依次取8L石油醚、IOL氯仿、6L乙酸乙酯洗脱，乙酸乙酯流分浓缩至600ml，冷藏结晶；过滤结晶物，加适量水溶解，加pH9的氨水，搅拌使之完全溶解，盐酸调节pHl，加入500mlNKA-II型大孔树脂柱吸附，先用3. 5L30%甲醇洗脱杂质，再取2. 5L90%甲醇洗脱藤黄酸，回收甲醇，放置结晶，滤出结晶物烘干，甲醇氯仿 (1 1)混合溶液回流溶解，冷藏结晶，结晶物滤出干燥得藤黄酸90g，含量98%。实施例2 取藤黄粉碎100目，取500g，投入烧瓶中，无水甲醇回流溶解，滤去不溶物，加颗粒活性碳lkg，减压回收甲醇后，把活性碳烘干装柱，依次取15L石油醚、5L氯仿、IOL乙酸乙酯洗脱，乙酸乙酯流分浓缩至700ml，冷藏结晶；过滤结晶物，加适量水溶解，加pHIO的氨水， 搅拌使之完全溶解，盐酸调节PH3，加入500mlNKA-II型大孔树脂柱吸附，先用25L50%甲醇洗脱杂质，再取4L70%甲醇洗脱藤黄酸，回收甲醇，放置结晶，滤出结晶物烘干，甲醇氯仿 (1 幻混合溶液回流溶解，冷藏结晶，结晶物滤出干燥得藤黄酸85g，含量99%。实施例3 取藤黄粉碎80目，取500g，投入烧瓶中，无水甲醇回流溶解，滤去不溶物，加颗粒活性碳1kg，减压回收甲醇后，把活性碳烘干装柱，依次取IOL石油醚、7L氯仿、8L乙酸乙酯洗脱，乙酸乙酯流分浓缩至600ml，冷藏结晶；过滤结晶物，加适量水溶解，加pHIO的氨水， 搅拌使之完全溶解，盐酸调节PH2，加入500mlNKA-II型大孔树脂柱吸附，先用3L40%甲醇洗脱杂质，再取3L80%甲醇洗脱藤黄酸，回收甲醇，放置结晶，滤出结晶物烘干，甲醇氯仿 (1 幻混合溶液回流溶解，冷藏结晶，结晶物滤出干燥得藤黄酸95g，含量98.3%。
实施例4:取藤黄粉碎80目，取^cg,投入烧瓶中，无水甲醇回流溶解，滤去不溶物，加颗粒活性碳4kg，减压回收甲醇后，把活性碳烘干装柱，依次取40L石油醚、28L氯仿、32L乙酸乙酯洗脱，乙酸乙酯流分浓缩至2. 4L，冷藏结晶；过滤结晶物，加适量水溶解，加pHIO的氨水，搅拌使之完全溶解，盐酸调节PH2，加入2LNKA-II型大孔树脂柱吸附，先用12L40%甲醇洗脱杂质，再取12L80%甲醇洗脱藤黄酸，回收甲醇，放置结晶，滤出结晶物烘干，甲醇氯仿 (1 幻混合溶液回流溶解，冷藏结晶，结晶物滤出干燥得藤黄酸367g，含量98.5%。实施例5 取藤黄粉碎80目，取^g，投入烧瓶中，无水甲醇回流溶解，滤去不溶物，加颗粒活性碳lkg，减压回收甲醇后，把活性碳烘干装柱，依次取100L石油醚、70L氯仿、80L乙酸乙酯洗脱，乙酸乙酯流分浓缩至6L，冷藏结晶；过滤结晶物，加适量水溶解，加pHIO的氨水，搅拌使之完全溶解，盐酸调节PH2，加入5LNKA-II型大孔树脂柱吸附，先用30L40%甲醇洗脱杂质，再取30L80%甲醇洗脱藤黄酸，回收甲醇，放置结晶，滤出结晶物烘干，甲醇氯仿(1 2) 混合溶液回流溶解，冷藏结晶，结晶物滤出干燥得藤黄酸924g，含量98%。
权利要求
1.一种高含量藤黄酸的纯化方法，其特征在于包含以下步骤1)活性炭柱纯化取藤黄药材粉碎60-100目，无水甲醇回流溶解，滤去不溶物，加颗粒活性碳，回收甲醇，把活性碳烘干装柱，洗脱剂梯度洗脱，有效成分流分浓缩至1/10-1/15 体积，冷藏结晶；2)大孔树脂柱纯化过滤结晶物，加适量水溶解，加PH9-10的氨水，搅拌使之完全溶解，盐酸调节PH1-3，加入大孔树脂柱吸附，5-7倍量30-50 %甲醇洗脱杂质，再取5_8倍量 70-90%甲醇洗脱藤黄酸，回收甲醇，放置结晶；3)重结晶滤出结晶物烘干，甲醇氯仿混合溶液回流溶解冷藏结晶，结晶物干燥得藤黄酸。
2.如权利要求1所述藤黄酸的纯化方法，其特征在于所述步骤1)中洗脱剂梯度洗脱为依次8-15倍量石油醚一5-10倍量氯仿一6-10倍量乙酸乙酯洗脱。
3.如权利要求1所述藤黄酸的纯化方法，其特征在于所述步骤2)中的大孔树脂为 NKA-II型大孔树脂。
4.如权利要求1所述藤黄酸的纯化方法，其特征在于所述步骤幻中的甲醇氯仿混合比例为1 1-3。
全文摘要
本发明公开了一种高含量藤黄酸的纯化方法，方法是取藤黄药材粉碎60-100目，无水甲醇回流溶解，滤去不溶物，加入颗粒活性碳，回收甲醇，把活性碳烘干装柱，洗脱剂梯度洗脱，有效成分流分浓缩至1/10-1/15体积，冷藏结晶，过滤结晶物，加适量水溶解，再加pH9-10的氨水，搅拌使之完全溶解，盐酸调节pH1-3，加入大孔树脂柱吸附，30-50％甲醇洗脱杂质，70-90％甲醇洗脱藤黄酸，回收甲醇，放置结晶，滤出结晶物烘干，甲醇氯仿混合溶液回流溶解冷藏结晶，干燥得藤黄酸。采用本发明生产藤黄酸，生产周期短，生产成本低，所得产品含量高达99％。本发明适合工业化生产。
文档编号C07D493/20GK102372725SQ20101026305
公开日2012年3月14日 申请日期2010年8月26日 优先权日2010年8月26日
发明者刘东锋, 李法庆, 杨成东 申请人:苏州宝泽堂医药科技有限公司