专利名称：生产胆红素的方法
技术领域：
本发明涉及生产胆红素的方法，属于生物制药领域。
背景技术：
胆红素钙盐有镇静、镇惊、解热、降压、促进红血球新生，对乙型脑炎病毒和W256 癌细胞有抑制作用是制作人工牛黄的重要原料，人工牛黄属于贵重药品，其功效包括去惊痛、寒热、中风失音、除热等。目前，生产胆红素的方法主要为有1、钙盐法将猪胆汁水解后加入氢氧化钙使胆红素和钙反应得到钙盐沉淀，沉淀加水并加入盐酸至PH值为1. 5，然后加入乙醇得到粗胆红素沉淀，加入氯仿将粗胆红素溶解，过滤，滤液蒸发得到符合药典要求的胆红素。其收率为万分之1.5左右。该方法需要用氯仿溶解胆红素，不利于人体健康，而且胆红素的收率较低，成本较高。2、萃取法利用胆红素溶于氯仿而不溶于水的特性将胆红素从胆汁中萃取而得， 收率为万分之2左右。该方法也需用氯仿，不利于人体健康，而且胆红素的收率也较低，成本较高。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种成本更低的生产胆红素的方法。本发明生产胆红素的方法包括如下步骤a、沉淀胆汁中的胆红素胆汁中加入胆汁质量0. 1 0. 4%的抗氧化剂，混勻，加热胆汁至90 100°C，调节溶液pH值为12 14，然后趁热用酸调节溶液pH值为6. 8 7. 2，所得溶液静置，使胆红素沉淀析出(一股情况下，静置IOmin左右即可)；b、除杂过滤，所得滤饼用90 100°C的水洗涤，然后将滤饼用乙醇溶液浸泡4 8h,然后过滤，干燥，得到胆红素。其中，本发明方法中所用的胆汁可以为畜类动物的胆汁，考虑到生产成本，优选猪胆汁；如果考虑药效，则优选牛胆汁。其中，本发明方法中所述的抗氧化剂可以为常用的药用抗氧化剂，如焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、硫代硫酸钠、抗坏血酸(即维生素C)、硫脲中至少一种。进一步的，综合考虑抗氧化效果和成本因素，上述a步骤中加入的抗氧化剂质量优选为胆汁质量的0. 18 0. 22%，上述a步骤中加入的抗氧化剂质量更优选为胆汁质量的 0. 2%。其中，为了使胆汁中的胆红素尽可能的以胆红素钠的形式完全沉淀而出，以提高胆红素的收率，上述a步骤中在调节溶液pH值为12 14前，溶液中还加入胆汁质量0. 5 1.5%的钠盐。进一步的，钠盐加入量优选为胆汁质量的1%。其中，所述的钠盐可以为常用的药用钠盐，优选为氯化钠。其中，上述a步骤中优选用浓度为3 5. 5mol/L的氢氧化钠溶液调节溶液pH值为12 14 ；a步骤中用浓度为3 5. 5mol/L的盐酸或醋酸溶液调节溶液pH值为6. 8 7. 2。其中，上述b步骤所得滤饼用90 100°C的水洗涤的目的是为了除去胆酸，一股情况下洗涤3 5次即可。其中，上述b步骤中滤饼用乙醇溶液浸泡的努的是为了进一步除去杂质，所述的乙醇溶液优选为乙醇质量浓度> 85%的水溶液。进一步的，考虑到高浓度乙醇溶液还有脱水作用，所述的乙醇溶液更优选为乙醇质量浓度> 95%的水溶液。其中，上述b步骤可以用常规的方法干燥胆红素，如自然干燥、真空干燥等，优选于真空60°C干燥。其中，本发明最优选的技术方案为a、沉淀胆汁中的胆红素胆汁中加入胆汁质量0.2%的亚硫酸钠作为抗氧化剂， 然后加入胆汁质量1 %的氯化钠，混勻，加热胆汁至90 100°C，调节溶液pH值为13，然后趁热用酸调节溶液pH值为6. 8 7. 2 ；b、除杂a步骤所得溶液静置8 12min，过滤，所得滤饼用90 100°C的水洗涤， 然后将滤饼用乙醇质量浓度> 95%的水溶液浸泡4 他，然后过滤，真空60°C干燥，得到胆红素。本发明主要利用胆红素的等电点将胆红素和胆汁酸分离，生产中不需要用到氯仿等有毒有机溶剂，提高了药品的安全性，本发明方法的胆红素收率可以达到万分之3以上， 明显高于现有工艺的胆红素收率(万分之1. 5 万分之2、，降低了胆红素的生产成本。本发明为胆红素的生产提供了一种新的途径，具有广阔的应用前景。
具体实施例方式本发明生产胆红素的方法包括如下步骤a、沉淀胆汁中的胆红素胆汁中加入胆汁质量0. 1 0. 4 %的抗氧化剂，混勻，加热胆汁至90 100°C，调节溶液pH值为12 14，然后趁热用酸调节溶液pH值为6. 8 7. 2，所得溶液静置，使胆红素沉淀析出(一股情况下，静置IOmin左右即可)；b、除杂过滤，所得滤饼用90 100°C的水洗涤，然后将滤饼用乙醇溶液浸泡4 8h,然后过滤，干燥，得到胆红素。其中，本发明方法中所用的胆汁可以为畜类动物的胆汁，考虑到生产成本，优选猪胆汁；如果考虑药效，则优选牛胆汁。其中，本发明方法中所述的抗氧化剂可以为常用的药用抗氧化剂，如焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、硫代硫酸钠、抗坏血酸、硫脲中至少一种。进一步的，综合考虑抗氧化效果和成本因素，上述a步骤中加入的抗氧化剂质量优选为胆汁质量的0. 18 0. 22%，上述a步骤中加入的抗氧化剂质量更优选为胆汁质量的 0. 2%。其中，为了使胆汁中的胆红素尽可能的以胆红素钠的形式完全沉淀而出，以提高胆红素的收率，上述a步骤中在调节溶液pH值为12 14前，溶液中还加入胆汁质量0. 5 1.5%的钠盐。进一步的，钠盐加入量优选为胆汁质量的1%。其中，所述的钠盐可以为常用的药用钠盐，优选为氯化钠。其中，上述a步骤中优选用浓度为3 5. 5mol/L的氢氧化钠溶液调节溶液pH值为12 14 ；a步骤中用浓度为3 5. 5mol/L的盐酸或醋酸溶液调节溶液pH值为6. 8 7. 2。其中，上述b步骤所得滤饼用90 100°C的水洗涤的目的是为了除去胆酸，一股情况下洗涤3 5次即可。其中，上述b步骤中滤饼用乙醇溶液浸泡的努的是为了进一步除去杂质，所述的乙醇溶液优选为乙醇质量浓度> 85%的水溶液。进一步的，考虑到高浓度乙醇溶液还有脱水作用，所述的乙醇溶液更优选为乙醇质量浓度> 95%的水溶液。其中，上述b步骤可以用常规的方法干燥胆红素，如自然干燥、真空干燥等，优选于真空60°C干燥。其中，本发明最优选的技术方案为a、沉淀胆汁中的胆红素胆汁中加入胆汁质量0.2%的亚硫酸钠作为抗氧化剂， 然后加入胆汁质量1 %的氯化钠，混勻，加热胆汁至90 100°C，调节溶液pH值为13，然后趁热用酸调节溶液pH值为6. 8 7. 2 ；b、除杂a步骤所得溶液静置8 12min，过滤，所得滤饼用90 100°C的水洗涤， 然后将滤饼用乙醇质量浓度> 95%的水溶液浸泡4 他，然后过滤，真空60°C干燥，得到胆红素。本发明主要利用胆红素的等电点将胆红素和胆汁酸分离，生产中不需要用到氯仿等有毒有机溶剂，提高了药品的安全性，本发明方法的胆红素收率可以达到万分之3以上， 明显高于现有工艺的胆红素收率(万分之1. 5 万分之2、，降低了胆红素的生产成本。本发明为胆红素的生产提供了一种新的途径，具有广阔的应用前景。下面结合实施例对本发明的具体实施方式
做进一步的描述，并不因此将本发明限制在所述的实施例范围之中。实施例1采用本发明方法生产胆红素IOOkg猪胆汁中加入胆汁质量0. 1的抗氧化剂亚硫酸氢钠，混勻，加热胆汁至 90°C，调节溶液pH值为12，然后趁热用浓度为5mol/L的醋酸调节溶液pH值为6. 8 7. 2， 静止8min，使胆红素沉淀析出，过滤，所得滤饼用沸水洗涤3次，然后将滤饼用乙醇质量浓度为86%的乙醇溶液浸泡8h，然后过滤，干燥，得到产品35g，经鉴定，所得产品为胆红素 (鉴定方法胆红素和重氮化试剂反应，产生偶氮染料，它在强酸中呈兰紫色，在PH2 5. 5 之间呈红色，在PH5. 5以上呈绿色)。由于胆红素在450nm处有最大的吸收度。以中国生物制品检验所购得标准品校正吸收值。取所得产品10. 5g在450nm处吸收值为0. 767。根据摩尔吸收系数法(其中0. 767 为吸收值，104. 03是胆红素分子量(584. 65)与其在三氯甲烷中的摩尔吸收系数(56200)的比值与100的乘积10为称取样品的理论值，10. 5是样品称量)，
0. 767X104. 06X10
权利要求
1.生产胆红素的方法，其特征在于包括如下步骤a、沉淀胆汁中的胆红素胆汁中加入胆汁质量0.1 0.4%的抗氧化剂，混勻，加热胆汁至90 100°C，调节溶液pH值为12 14，然后趁热用酸调节溶液pH值为6. 8 7. 2，所得溶液静置，使胆红素沉淀析出；b、除杂过滤，所得滤饼用90 100°C的水洗涤，然后将滤饼用乙醇溶液浸泡4 8h， 然后过滤，干燥，得到胆红素。
2.根据权利要求1所述的生产胆红素的方法，其特征在于所述的胆汁为牛胆汁或猪胆汁。
3.根据权利要求1或2所述的生产胆红素的方法，其特征在于a步骤所述的抗氧化剂为焦亚硫酸钠、亚硫酸氢钠、亚硫酸钠、硫代硫酸钠、抗坏血酸、硫脲中至少一种。
4.根据权利要求1 3任一项所述的生产胆红素的方法，其特征在于a步骤中加入的抗氧化剂质量为胆汁质量的0. 18 0. 22%。
5.根据权利要求1 4任一项所述的生产胆红素的方法，其特征在于a步骤中在调节溶液PH值为12 14前，溶液中还加入胆汁质量0.5 1.5%的钠盐。
6.根据权利要求5所述的生产胆红素的方法，其特征在于所述的钠盐为氯化钠。
7.根据权利要求1 6任一项所述的生产胆红素的方法，其特征在于a步骤中用浓度为3 5. 5mol/L的氢氧化钠溶液调节溶液pH值为12 14 ；a步骤中用浓度为3 5. 5mol/ L的盐酸或醋酸溶液调节溶液pH值为6. 8 7. 2。
8.根据权利要求1 7任一项所述的生产胆红素的方法，其特征在于所述的乙醇溶液为乙醇质量浓度> 85%的水溶液。
9.根据权利要求8所述的生产胆红素的方法，其特征在于所述的乙醇溶液为乙醇质量浓度> 95%的水溶液。
10.生产胆红素的方法，其特征在于包括如下步骤a、沉淀胆汁中的胆红素胆汁中加入胆汁质量0.2%的亚硫酸钠作为抗氧化剂，然后加入胆汁质量的氯化钠，混勻，加热胆汁至90 100°C，调节溶液pH值为13，然后趁热用酸调节溶液pH值为6. 8 7. 2 ；b、除杂a步骤所得溶液静置8 12min，过滤，所得滤饼用90 100°C的水洗涤，然后将滤饼用乙醇质量浓度> 95 %的水溶液浸泡4 他，然后过滤，真空60°C干燥，得到胆红
全文摘要
本发明涉及生产胆红素的方法，属于生物制药领域。本发明所解决的技术问题是提供了一种成本更低的生产胆红素的方法。本发明生产胆红素的方法包括如下步骤a、沉淀胆汁中的胆红素胆汁中加入胆汁质量0.1～0.4％的抗氧化剂，混匀，加热胆汁至90～100℃，调节溶液pH值为12～14，然后趁热用酸调节溶液pH值为6.8～7.2，所得溶液静置，使胆红素沉淀析出；b、除杂过滤，所得滤饼用90～100℃的水洗涤，然后将滤饼用乙醇溶液浸泡4～8h，然后过滤，干燥，得到胆红素。
文档编号C07D207/44GK102229556SQ20111012335
公开日2011年11月2日 申请日期2011年5月13日 优先权日2011年5月13日
发明者许均萍 申请人:四川泓乾生物科技有限公司