专利名称：一种提取纯化玉兰素b的方法
技术领域：
本发明属于中药提取技术领域，涉及一种提取纯化玉兰素B的方法。
背景技术：
玉兰素B (Anolignan A),分子式为C21H24O5,分子量为356. 42,是从木兰科(Magnoliaceae)玉兰Magnolia denudata Desr.叶中分离出的一种木脂素类化合物。药理研究表明，玉兰素B具有PAF受体拮抗剂，治疗风湿性关节炎和哮喘，在抑制PAF与受体结合的试验中，10μ g/ml浓度下，抑制率为100%，5μ g/ml时为80. 1% ;钙拮抗作用，在浓度28 μ M时，活性为100% ;松弛血管平滑肌，抑制Ca2+内流，增加cGMP，达到血管松弛作用；抗血小板作用，具有非特异的抗血小板作用，PAF拮抗作用，IC50为7. 5 μ M ;抑制淋巴细胞增殖，有一定免疫抑制作用。
目前，国内尚未检索到玉兰素B的制备方法报道。
发明内容
本发明的目的是提供一种提取纯化玉兰素B的方法。为实现上述目的，本发明采用以下技术方案
一种提取纯化玉兰素B的方法，其特征在于包括以下步骤以玉兰叶为原料，粉碎至60目，按一定固液体积比加入60-85%乙醇浸泡O. 5-2h，采用超高压法进行萃取，将萃取液加入硅藻土与活性炭的混合物，过滤，滤液浓缩至浸膏，用硅胶拌样上柱，石油醚-丙酮进行梯度洗脱，收集洗脱液减压回收试剂，经高速逆流色谱分离，即可获得玉兰素B。所述固液体积比为1:10-1:18。所述超高压萃取压力为400MPa，保压时间为2_4min。所述石油醚-丙酮体积比为17:1-2:1。所述高速逆流色谱分离溶剂系统为正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水，体积比为(1-2):(4-6)(3-4):(4-7)。本发明采用超高压萃取、柱层析及高速逆流色谱分离纯化，具有生产过程简单，节省能源，生产成本低，易于实现工业化等优点。
具体实施例方式 下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例I :
以玉兰叶为原料，粉碎至60目，取1kg，按固液体积比1:15加入65%乙醇浸泡lh，采用超高压法进行萃取，萃取压力为400MPa，保压时间为3min，将萃取液加入硅藻土与活性炭的混合物，过滤，滤液浓缩至浸膏，用硅胶拌样上柱，石油醚-丙酮进行梯度洗脱，收集洗脱液减压回收试剂至浸膏，将浸膏用少量硅胶混合拌样，低温烘干，上样至100目的硅胶低压柱(柱压为6bar，柱径高比为1:6)，用石油醚-丙酮按体积比17:1、12:1、7:1、2:1进行梯度洗脱，收集目标洗脱液，浓缩、干燥，得粗品；取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按体积比为2 6 4 7混合，静置分层，以上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节900r/min,取下相溶解粗品注入色谱仪，紫外在线检测，检测波长为235nm，收集目标流分，旋转蒸发浓缩干燥，得到玉兰素B产品，含量为96. 7%。实施例2:
以玉兰叶为原料，粉碎至60目，取1kg，按固液体积比1:15加入85%乙醇浸泡lh，采用超高压法进行萃取，萃取压力为400MPa，保压时间为3min，将萃取液加入硅藻土与活性炭的混合物，过滤，滤液浓缩至浸膏，用硅胶拌样上柱，石油醚-丙酮进行梯度洗脱，收集洗脱液减压回收试剂至浸膏，将浸膏用少量硅胶混合拌样，低温烘干，上样至120目的硅胶低压柱(柱压为6bar，柱径高比为1:6)，用石油醚-丙酮按体积比16:1、10:1、8:1、2:1进行梯度洗脱，收集目标洗脱液，浓缩、干燥，得粗品；取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按体积比为I :5
3.5 4混合，静置分层，以上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节900r/min，取下相溶解粗品注入色谱仪，紫外在线检测，检测波长为235nm，收集目标流分，旋转蒸发浓缩干燥，得到玉兰素B产品，含量为97. 6%。实施例3
以玉兰叶为原料，粉碎至60目，取1kg，按固液体积比1:18加入60%乙醇浸泡2h，采用超高压法进行萃取，萃取压力为400MPa，保压时间为4min，将萃取液加入硅藻土与活性炭的混合物，过滤，滤液浓缩至浸膏，用硅胶拌样上柱，石油醚-丙酮进行梯度洗脱，收集洗脱液减压回收试剂至浸膏，将浸膏用少量硅胶混合拌样，低温烘干，上样至100目的硅胶低压柱(柱压为6bar，柱径高比为1:6)，用石油醚-丙酮按体积比16: I、11: 1、7: 1、3:1进行梯度洗脱，收集目标洗脱液，浓缩、干燥，得粗品；取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按体积比为2 6 3 7混合，静置分层，以上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节900r/min,取下相溶解粗品注入色谱仪，紫外在线检测，检测波长为235nm，收集目标流分，旋转蒸发浓缩干燥，得到玉兰素B产品，含量为97. 2%。实施例4:
以玉兰叶为原料，粉碎至60目，取1kg，按固液体积比1:10加入75%乙醇浸泡O. 5h，采用超高压法进行萃取，萃取压力为400MPa，保压时间为2min，将萃取液加入硅藻土与活性炭的混合物，过滤，滤液浓缩至浸膏，用硅胶拌样上柱，石油醚-丙酮进行梯度洗脱，收集洗脱液减压回收试剂至浸膏，将浸膏用少量硅胶混合拌样，低温烘干，上样至200目的硅胶低压柱(柱压为6bar，柱径高比为1:6)，用石油醚-丙酮按体积比15:1、10:1、6:1、2:1进行梯度洗脱，收集目标洗脱液，浓缩、干燥，得粗品；取正己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按体积比为
I.5 4 3 5混合，静置分层，以上相为固定相，下相为流动相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节900r/min，取下相溶解粗品注入色谱仪，紫外在线检测，检测波长为235nm，收集目标流分，旋转蒸发浓缩干燥，得到玉兰素B产品，含量为96. 9%。
权利要求
1.ー种提取纯化玉兰素B的方法，其特征在于包括以下步骤以玉兰叶为原料，粉碎至60目，按一定固液体积比加入60-85%こ醇浸泡O. 5-2h，采用超高压法进行萃取，将萃取液加入硅藻土与活性炭的混合物，过滤，滤液浓缩至浸膏，用硅胶拌样上柱，石油醚-丙酮进行梯度洗脱，收集洗脱液减压回收试剂，经高速逆流色谱分离，即可获得玉兰素B。
2.如权利要求I所述的ー种提取纯化玉兰素B的方法，其特征在于所述固液体积比为1:10-1:18。
3.如权利要求I所述的ー种提取纯化玉兰素B的方法，其特征在于所述超高压萃取压カ为400MPa，保压时间为2-4min。
4.如权利要求I所述的ー种提取纯化玉兰素B的方法，其特征在于所述石油醚-丙酮体积比为17:1-2:1。
5.如权利要求I所述的ー种提取纯化玉兰素B的方法，其特征在于所述高速逆流色谱分离溶剂系统为正己烷-こ酸こ酷-甲醇-7K，体积比为(1-2) :(4-6) :(3-4) : (4-7)。
全文摘要
本发明公开了一种提取纯化玉兰素B的方法，该方法是将原料粉碎，用60-95%乙醇浸泡0.5-2h，采用超高压法进行萃取，将萃取液加入硅藻土与活性炭的混合物，过滤，滤液浓缩至浸膏，用硅胶拌样上柱，石油醚-丙酮进行梯度洗脱，收集洗脱液减压回收试剂，经高速逆流色谱分离，即可获得玉兰素B。本发明操作简单、快速高效、得率高、产品纯度高，适合工业化生产。
文档编号C07D307/80GK102863412SQ201210366709
公开日2013年1月9日 申请日期2012年9月28日 优先权日2012年9月28日
发明者苏刘花 申请人:南京泽朗农业发展有限公司