专利名称：一种紫丹参甲素的制备方法
技术领域：
本发明属于中药提取分离技术领域，涉及一种从紫丹参的根中分离制备紫丹参甲素的方法。
背景技术：
紫丹参甲素，橙红色柱状结晶，来源于唇形科植物紫丹参przewalskiiMaxim, var. mandarinorum Stib.的根。紫丹参主产于安徽、河南、陕西等地。功效活血调经,祛瘀止痛,凉血消痈,清心除烦,养血安神。《滇南本草》谓“丹参，味微苦，性微寒。色赤,入心经。补心，生血,养心，定志，安神宁心,健忘怔忡,惊悸不寐，生新血,去瘀血,安生胎，落死胎。一味可抵四物汤补血之功”。紫丹参甲素具有对动物肿瘤具有活性，120或150mg/kg剂量,腹腔注射,对小鼠 Lewis肺癌，黑色素瘤B16和肉瘤180的抑制率为35. 8-67. 8%，可使白血病P388小鼠的生存时间延长100%以上；对金黄色葡萄球菌209P的抑制作用比隐丹参酮强；抗分支杆菌作用，抗人型结核杆菌H37Rv，其MIC为lmg/L。目前，紫丹参甲素的纯化方法，如专利(申请号02104328.0)“高纯度紫丹参甲素的制备方法”，该方法是采用有机溶剂浸提、硅胶柱色谱层析和高速逆流色谱分离。如上所述，现有纯化紫丹参甲素的方法存在着收率低、周期长、溶剂用量大、收率低等不足。
发明内容
本发明的目的是提供一种紫丹参甲素的制备方法。本发明的目的是通过以下技术方案实现的
一种紫丹参甲素的制备方法，其特征在于包括以下步骤
(1)取紫丹参的根，经粉碎处理，置于闪式提取器中，加5-12倍70-85%乙醇溶液，进行闪式提取，过滤得到提取液；
(2)提取液通过截留分子量为1000-3000的超滤膜超滤和截留分子量为200的纳滤膜浓缩，操作压力为O. 5-2. 5MPa，膜浓缩液减压浓缩干燥，得粗提物；
(3 )采用制备型液相色谱分离纯化粗提物中的紫丹参甲素，紫外检测器在线监测，监测波长为269nm，收集紫丹参甲素组分；
(4)将紫丹参甲素组分进行真空浓缩，析出结晶，过滤、洗涤干燥即得紫丹参甲素。所述步骤(I)中闪式提取电压为140-150V，提取时间为60s_90s。所述步骤(3)中制备型液相色谱以75-80%甲醇溶液为流动相。本方法积极效果是
(1)本方法采用闪式提取法，快速高效、低耗能、环保；
(2)本方法采用膜分离技术，能有效去除多种杂质，且不会破坏有效成分的生物活性；
(3)本方法采用制备型液相色谱，收率高、制备量大、制备周期短，解决了柱层析效率低而且污染严重的技术缺陷；(4)本方法工艺步骤操作较简单，易操作，所得产品纯度高。
具体实施例方式 下面将结合具体实施方式
进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。实施例I :
取紫丹参的根，经粉碎处理，称取1kg，加5倍85%乙醇溶液，提取电压为140V，提取时间为90s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液通过截留分子量为3000的超滤膜超滤和截留分子量为200的纳滤膜浓缩，操作压力为O. 8MPa，膜浓缩液减压浓缩干燥，得粗提物；采用制备型液相色谱分离纯化粗提物中的紫丹参甲素，以78%甲醇溶液为流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，监测波长为269nm，收集紫丹参甲素组分，进行真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，过滤、洗涤干燥即得紫丹参甲素，含量96. 3%。
实施例2:
取紫丹参的根，经粉碎处理，称取1kg，加12倍70%乙醇溶液，提取电压为140V，提取时间为80s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液通过截留分子量为1000的超滤膜超滤和截留分子量为200的纳滤膜浓缩，操作压力为I. 8MPa，膜浓缩液减压浓缩干燥，得粗提物；采用制备型液相色谱分离纯化粗提物中的紫丹参甲素，以78%甲醇溶液为流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，监测波长为269nm，收集紫丹参甲素组分，进行真空浓缩，析出结晶，过滤、洗涤干燥即得紫丹参甲素，含量97. 2%。实施例3:
取紫丹参的根，经粉碎处理，称取2kg，加10倍70%乙醇溶液，提取电压为140V，提取时间为90s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液通过截留分子量为1000的超滤膜超滤和截留分子量为200的纳滤膜浓缩，操作压力为2. OMPa，膜浓缩液减压浓缩干燥，得粗提物；采用制备型液相色谱分离纯化粗提物中的紫丹参甲素，以78%甲醇溶液为流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，监测波长为269nm，收集紫丹参甲素组分，进行真空浓缩，析出结晶，过滤、洗涤干燥即得紫丹参甲素，含量96. 2%。实施例4:
取紫丹参的根，经粉碎处理，称取5kg，加8倍80%乙醇溶液，提取电压为150V，提取时间为60s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液通过截留分子量为3000的超滤膜超滤和截留分子量为200的纳滤膜浓缩，操作压力为O. 5MPa，膜浓缩液减压浓缩干燥，得粗提物；采用制备型液相色谱分离纯化粗提物中的紫丹参甲素，以75%甲醇溶液为流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，监测波长为269nm，收集紫丹参甲素组分，进行真空浓缩，析出结晶，过滤、洗涤干燥即得紫丹参甲素，含量96. 6%。实施例5:
取紫丹参的根，经粉碎处理，称取10kg，加12倍85%乙醇溶液，提取电压为150V，提取时间为90s，进行闪式提取，过滤得到提取液，提取液通过截留分子量为1000的超滤膜超滤和截留分子量为200的纳滤膜浓缩，操作压力为2. 5MPa，膜浓缩液减压浓缩干燥，得粗提物；采用制备型液相色谱分离纯化粗提物中的紫丹参甲素，以80%甲醇溶液为流动相，流动相溶解粗提物由进样阀进样，紫外检测器在线监测，监测波长为269nm，收集紫丹参甲素组分，进行真空浓缩，析出结晶，过滤、洗涤干燥即得紫丹参甲素，含量95. 9%。
权利要求
1.一种紫丹参甲素的制备方法，其特征在于包括以下步骤 (1)取紫丹参的根，经粉碎处理，置于闪式提取器中，加5-12倍70-85%乙醇溶液，进行闪式提取，过滤得到提取液； (2)提取液通过截留分子量为1000-3000的超滤膜超滤和截留分子量为200的纳滤膜浓缩，操作压力为O. 5-2. 5MPa，膜浓缩液减压浓缩干燥，得粗提物； (3 )采用制备型液相色谱分离纯化粗提物中的紫丹参甲素，紫外检测器在线监测，监测波长为269nm，收集紫丹参甲素组分； (4)将紫丹参甲素组分进行真空浓缩，析出结晶，过滤、洗涤干燥即得紫丹参甲素。
2.根据权利要求I所述的一种紫丹参甲素的制备方法，其特征在于所述步骤(I)中闪式提取电压为140-150V，提取时间为60s-90s。
3.根据权利要求I所述的一种紫丹参甲素的制备方法，其特征在于所述步骤(3)中制备型液相色谱以75-80%甲醇溶液为流动相。
全文摘要
本发明涉及一种操作简单、污染少的紫丹参甲素的制备方法，工艺步骤为(1)取紫丹参的根，经粉碎处理，用醇类溶液进行闪式提取，过滤得到提取液；(2)提取液通过膜分离系统，浓缩干燥得粗提物；(3)采用制备型液相色谱分离纯化粗提物中的紫丹参甲素，紫外在线监测，收集紫丹参甲素组分；(4)将紫丹参甲素组分进行真空浓缩，析出结晶，滤出结晶，即得紫丹参甲素。本发明制备紫丹参甲素，产品纯度高，易于实现产业化放大。
文档编号C07D307/77GK102827117SQ201210371880
公开日2012年12月19日 申请日期2012年9月29日 优先权日2012年9月29日
发明者刘东锋, 万冬梅 申请人:南京泽朗医药科技有限公司