一种从女贞子中提取齐墩果酸的新方法
【专利摘要】本发明公开了一种从女贞子中提取齐墩果酸的新方法，具体涉及一种酶解与加压技术相结合的方法，在粉碎的女贞子中加入10~15倍的70~90%的乙醇溶液，加盐酸调PH值为3~5，继续加入0.03~0.05%的纤维素酶酶解，加碱调PH值为中性，放入密闭容器内，在压力为20~30MPa条件下提取10~15min，提取液过滤，加入活性炭脱色后过滤，滤液浓缩为原溶剂体积的1/10~15，浓缩液上预处理的大孔吸附树脂，用90~100%的乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩得粗品，甲醇重结晶得针状结晶齐墩果酸。本发明反应条件温和、提取率高、提取时间短、提取成本低，适用于工业化生产。
【专利说明】一种从女贞子中提取齐墩果酸的新方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种从女贞子中提取齐墩果酸的新方法，尤其涉及一种利用酶解与加压技术相结合的方法，属于植物化学【技术领域】。
【背景技术】
[0002]女贞子为木犀科常绿乔木女贞的干燥成熟果实，具有补肝强肾，强腰膝，明目乌发的功能。齐墩果酸为其主要的有效成分，是一种齐墩果烷型五环三萜类化合物，又名庆四素，为白色结晶粉末，无臭、无味，难溶于水，可溶于乙醚、氯仿、丙酮、甲醇、乙醇等。具有消炎、增强免疫、抑制血小板降集、降糖、抗氧化和利尿作用等多方面的临床药理作用，还具有护肝、抗高血脂、抗动脉粥样硬化等生物活性。由于齐墩果酸结构复杂，难以用合成法获得，所以寻求高得率、高纯度的齐墩果酸的提取方法尤为重要。
[0003]传统的提取齐墩果酸的方法有回流提取法、超声波提取法和微波提取法等。但这些提取方法或多或少的存在着一些不足之处，如提取时间长，相对较高的溶剂消耗量和较低的提取率等。
【发明内容】
[0004]本发明针对现有技术的不足，提供一种高效、快速、纯度高、生产成本低的提取齐墩果酸的新方法。
[0005]本发明的步骤如下:
a.取女贞子粉末，在粉碎的女贞中加入10-15倍的70-90%的乙醇溶液，加盐酸调PH值为3~5，继续加入0.03、.05%的纤维素酶酶解，加碱调PH值为中性；
b.将得到的上述酶解液放入密闭容器内，在压力为2(T30MPa条件下提取l(Tl5min，提取液过滤；
c.在上述提取液中加入活性炭脱色后过滤，滤液浓缩为原溶剂体积的1/10-15，浓缩液上预处理的大孔吸附树脂，用90-100%的乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩得粗品，甲醇重结晶得针状结晶齐墩果酸。
[0006]步骤a中所述的碱液可以是氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸钠中的一种。
[0007]步骤c中所述的预处理方法为:先用5%的氢氧化钠浸泡2h，用蒸馏水洗至中性，再用5%的盐酸浸泡2h，用蒸馏水洗至中性，最后用乙醇浸泡24h，充分溶胀，后用蒸馏水反复洗至无醇味，蒸馏水浸泡待用。
[0008]步骤c中所述的大孔吸附树脂型号为AB-8、D101、ADS_17。
[0009]本发明的优点在于:首先使用酶解，将女贞子细胞壁的纤维素水解成水溶性多糖，利于胞内的齐墩果酸的溶出；再结合加压技术，通过升高压力使提取溶剂的沸点升高，使得提取过程可以在高于正常沸点的温度而溶剂仍能维持液体状态的情况下进行，从而改变溶剂的溶解性和选择性以提高样品的提取率。本发明不仅收率高，无污染，而且工艺简单，生产成本低。[0010]下面将结合【具体实施方式】对本发明作进一步阐述，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。
【具体实施方式】
[0011]实施例1
取女贞子粉末，在粉碎的女贞中加入10倍的70%的乙醇溶液，加盐酸调PH值为3，继续加入0.03%的纤维素酶酶解，加氢氧化钠调PH值为中性，将得到酶解液放入密闭容器内，在压力为20MPa条件下提取15min，提取液过滤，加入活性炭脱色，过滤，滤液浓缩为原溶剂体积的1/10，浓缩液上预处理的ADS-17大孔吸附树脂，用90%的乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩得粗品，甲醇重结晶得针状结晶齐墩果酸，得率为2.92%，纯度为98.2%。
[0012]实施例2
取女贞子粉末，在粉碎的女贞中加入15倍的90%的乙醇溶液，加盐酸调PH值为4，继续加入0.04%的纤维素酶酶解，加氢氧化钾调PH值为中性，将得到酶解液放入密闭容器内，在压力为30MPa条件下提取lOmin，提取液过滤，加入活性炭脱色，过滤，滤液浓缩为原溶剂体积的1/15，浓缩液上预处理的AB-8大孔吸附树脂，用95%的乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩得粗品，甲醇重结晶得针状结晶齐墩果酸，得率为2.98%，纯度为98.9%。
[0013]实施例3
取女贞子粉末，在粉碎的女贞中加入12倍的80%的乙醇溶液，加盐酸调PH值为5，继续加入0.05%的纤维素酶酶解，加氢氧化钾调PH值为中性，将得到酶解液放入密闭容器内，在压力为25MPa条件下提取12min，提取液过滤，加入活性炭脱色，过滤，滤液浓缩为原溶剂体积的1/12，浓缩液上预处理的`D-1Ol大孔吸附树脂，用100%的乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩得粗品，甲醇重结晶得针状结晶齐墩果酸，得率为2.82%,纯度为98.4%。
【权利要求】
1.一种从女贞子中提取齐墩果酸的新方法，其特征在于包括如下步骤: a.取女贞粉末，在粉碎的女贞子中加入10-15倍的70-90%的乙醇溶液，加盐酸调PH值为3~5，继续加入0.03、.05%的纤维素酶酶解，加碱调PH值为中性； b.将得到的上述酶解液放入密闭容器内，在压力为2(T30MPa条件下提取l(Tl5min，提取液过滤； c.在上述提取液中加入活性炭脱色后过滤，滤液浓缩为原溶剂体积的1/10-15，浓缩液上预处理的大孔吸附树脂，用90-100%的乙醇洗脱，洗脱液减压浓缩得粗品，甲醇重结晶得针状结晶齐墩果酸。
2.根据权利要求1所述的一种从女贞子中提取齐墩果酸的新方法，其特征在于，步骤a中所述的碱液可以是氢氧化钾、氢氧化钠、碳酸钠中的一种。
3.根据权利要求1所述的一种从女贞子中提取齐墩果酸的新方法，其特征在于，步骤c中所述的预处理方法为:先用5%的氢氧化钠浸泡2h，用蒸馏水洗至中性，再用5%的盐酸浸泡2h，用蒸馏水洗至中性，最后用乙醇浸泡24h，充分溶胀，后用蒸馏水反复洗至无醇味，蒸馏水浸泡待用。
4.根据权利要求1所述的一种从女贞子中提取齐墩果酸的新方法，其特征在于，步骤c中所述的大孔吸附树脂型号为`AB-8、DIO1、ADS-17。
【文档编号】C07J63/00GK103483412SQ201310425952
【公开日】2014年1月1日 申请日期:2013年9月18日 优先权日:2013年9月18日
【发明者】杨存 申请人:南京通泽农业科技有限公司