具有抗肿瘤活性的4-甲基水杨酰腙铜配合物的合成方法

具有抗肿瘤活性的4-甲基水杨酰腙铜配合物的合成方法
【专利摘要】本发明涉及一种具有抗肿瘤活性的4-甲基水杨酰腙铜配合物的合成方法，具体步骤如下：(1)配体HL的合成：将无水乙醇10ml，PMBP(1-苯基-3-甲基-4-苯甲酰基-5-吡唑啉酮)1.0mmol和4-甲基水杨酰肼1.0mmol加入到50ml的圆底烧瓶中，在75℃下回流搅拌3h，冷却后有淡黄色固体生成(HL)。抽滤，乙醇重结晶(HL·EtOH)。(2)配合物4-甲基水杨酰腙铜的合成：取1mmol配体HL和1mmol的CuCl2·2H2O加入到5ml乙醇和四氢呋喃(体积比1∶1)的混合溶液中，搅拌使其溶解，常温下静置一周，出现棕色块状晶体，即为配合物4-甲基水杨酰腙铜。本发明方法找到了一种新的药物合成方法，具有较大的医学和药学价值，为抗肿瘤药物的研究开发和应用推广提供了一条重要的依据。
【专利说明】具有抗肿瘤活性的4-甲基水杨酰腙铜配合物的合成方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种具有抗肿瘤活性的4-甲基水杨酰腙铜配合物的合成方法，属于配合物合成【技术领域】。
【背景技术】
[0002]PMBP(1-苯基-3-甲基-4-苯甲酰基-5-吡唑啉酮)是优良的金属离子萃取剂，其酰腙衍生物具有抗病毒抗菌、抗肿瘤等多种药理活性。多数PMBP酰腙金属配合物的抗肿瘤活性强于配体。本发明提供一种具有抗肿瘤活性的4-甲基水杨酰腙铜配合物的合成方法。

【发明内容】

[0003]本发明的目的在于提供一种具有抗肿瘤活性的4-甲基水杨酰腙铜配合物的合成方法，以便更好地制备出具有抗肿瘤活性的4-甲基水杨酰腙铜配合物。
[0004]为了实现上述目的，本发明的技术方案如下。
[0005]一种具有抗肿瘤活性的4-甲基水杨酰腙铜配合物的合成方法，具体步骤如下:
[0006](I)配体HL的合成:将无水乙醇10ml，PMBP (1-苯基-3-甲基-4-苯甲酰基_5_批唑啉酮)1.0mmol和4-甲基水杨酰肼1.0mmol加入到50ml的圆底烧瓶中，在75°C下回流搅拌3h，冷却后有淡黄色固体生成(HL)，抽滤，乙醇重结晶(HL -EtOH)，产率为76%。熔点138-142°C。核磁共振检测结果为，1H NMR(CDCl3,400MHz)，δ (ppm):6.708-8.046 (13H, m,Ar-H) ；2.377 (3H, s’ CH3) ；1.276 (3H, s’ CH3)。
[0007](2)配合物4-甲基水杨酰腙铜的合成:取Immo配体HL和Immol的CuCl2.2H20加入到5ml乙醇和四氢呋喃(体积比1:1)的混合溶液中，搅拌使其溶解，常温下静置一周，出现棕色块状晶体，即为配合物4-甲基水杨酰腙铜，其产率为82% (基于HL计算)。
[0008]进一步地，针对上述配合物进行抗肿瘤活性测试，其具体步骤为:
[0009](I)细胞培养:将A549人肺癌细胞株和H印G2人肝癌细胞株分别培养在含10%胎牛血清液的RPM1-1640介质中，内含100U / ml青霉素(盘尼西林)和100g / ml链霉素，置于饱和湿度、37°C、5% CO2培养箱中传代培养。
[0010](2)化合物的细胞毒性采用噻唑蓝法确定。在96孔塑料培养板中进行，使每孔中细胞数为5X IO3个，次日，在每个孔中加入200L溶解在培养液中的梯度浓度的待测物溶液(含体积百分数I %的DMSO助溶)。48小时后，加入溶解于牛血清中的浓度为0.5mg / ml的20LMTT(噻唑蓝)。继续培养4小时后，在各培养孔中加入200L 二甲基亚砜用于溶解被还原的MTT的蓝紫色晶体，然后用酶标仪测定570nm的吸光度(0D值)，空白组不加待测物，按公式:细胞生长抑制率=[(空白OD值-给药组的OD值)/空白OD值]XlOO%计算细胞生长抑制率，求出各组浓度的平均抑制率，作图求出抑制率为50%时的浓度(即半数抑制浓度IC50)。结果表明，配体HL和配合物I的对A549和Hep G2抑制作用明显，IC50范围在18.39-62.55mol / ml，是潜在的抗肿瘤药物。
[0011]该发明的有益效果在于:本发明提供了具有抗肿瘤活性的4-甲基水杨酰腙铜配合物的合成方法，并进行了药理学分析，证明该化合物的具有抗肿瘤活性作用，适合在抗肿瘤领域中使用。本发明方法找到了一种新的药物合成方法，具有较大的医学和药学价值，为抗肿瘤药物的研究开发和应用推广提供了一条重要的依据。
【专利附图】

【附图说明】
[0012]图1是本发明实施例中HL.EtOH的晶体结构示意图。
[0013]图2是本发明实施例中配合物4-甲基水杨酰腙铜晶体结构示意图(形态一)。
[0014]图3是本发明实施例中配合物4-甲基水杨酰腙铜晶体结构示意图(形态二)。
【具体实施方式】
[0015]下面结合附图对本发明的【具体实施方式】进行描述，以便更好的理解本发明。
[0016]实施例
[0017]一种具有抗肿瘤活性的4-甲基水杨酰腙铜配合物的合成方法，具体步骤如下:
[0018](1)配体HL的合成:将无水乙醇10ml，PMBP(l-苯基-3-甲基-4-苯甲酰基-5-批唑啉酮)1.0mmol和4-甲基水杨酰肼1.0mmol加入到50ml的圆底烧瓶中，在75°C下回流搅拌3h，冷却后有淡黄色固体生成(HL)。抽滤，乙醇重结晶(HL*EtOH)。其产率为，76%。熔点为 138-142°C。核磁共振检测结果为，1H NMR(CDCl3,400MHz)，δ (ppm):6.708-8.046 (13H,m, Ar-H) ；2.377 (3H，s’ CH3) ；1.276 (3H，s’ CH3)。其晶体结构示意图见图1。
[0019](2)配合物4-甲基水杨酰腙铜的合成:取Immol配体HL和Immol的CuCl2.2H20加入到5ml乙醇和四氢呋喃(体积比1:1)的混合溶液中，搅拌使其溶解，常温下静置一周，出现棕色块状晶体，即为配合物4-甲基水杨酰腙铜，其产率为82% (基于HL计算)。其晶体结构不意图见图2和图3。
[0020]针对上述配合物进行抗肿瘤活性测试，其具体步骤为:
[0021](1)细胞培养:将A549人肺癌细胞株和H印G2人肝癌细胞株分别培养在含10%胎牛血清液的RPM1-1640介质中，内含100U / ml青霉素(盘尼西林)和100g / ml链霉素，置于饱和湿度、37°C、5% CO2培养箱中传代培养。
[0022](2)化合物的细胞毒性采用噻唑蓝法确定。在96孔塑料培养板中进行，使每孔中细胞数为5X IO3个，次日，在每个孔中加入200L溶解在培养液中的梯度浓度的待测物溶液(含体积百分数I %的DMSO助溶)。48小时后，加入溶解于牛血清中的浓度为0.5mg / ml的20LMTT(噻唑蓝)。继续培养4小时后，在各培养孔中加入200L 二甲基亚砜用于溶解被还原的MTT的蓝紫色晶体，然后用酶标仪测定570nm的吸光度(0D值)，空白组不加待测物，按公式:细胞生长抑制率=[(空白OD值-给药组的OD值)/空白OD值]XlOO%计算细胞生长抑制率，求出各组浓度的平均抑制率，作图求出抑制率为50%时的浓度(即半数抑制浓度IC50)。结果表明，配体HL和配合物I的对A549和Hep G2抑制作用明显，IC50范围在18.39-62.55mol / ml，是潜在的抗肿瘤药物。
[0023]以上所述是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本【技术领域】的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以做出若干改进和润饰，这些改进和润饰也视为本发明的保护范围。
【权利要求】
1.一种具有抗肿瘤活性的4-甲基水杨酰腙铜配合物的合成方法，其特征在于:具体步骤如下: (1)配体HL的合成:将无水乙醇10ml，PMBP(1-苯基_3_甲基-4-苯甲酰基-5-吡唑啉酮)1.0mmol和4-甲基水杨酰肼1.0mmol加入到50ml的圆底烧瓶中，在75°C下回流搅拌3h，冷却后有淡黄色固体生成(HL)，抽滤，乙醇重结晶(HL.EtOH)，产率为76% ;熔点138-142°C，核磁共振检测结果为:? NMR(CDCl3,400MHz)，δ (ppm):6.708-8.046 (13H, m,Ar-H) ；2.377 (3H, s’ CH3) ；1.276 (3H, s’ CH3)； (2)配合物4-甲基水杨酰腙铜的合成:取1mmol配体HL和Immol的CuCl2.2Η20加入到5ml乙醇和四氢呋喃(体积比1:1)的混合溶液中，搅拌使其溶解，常温下静置一周，出现棕色块状晶体，即为配合物4-甲基水杨酰腙铜，其产率为82% (基于HL计算)。
2.根据权利要求1所述的具有抗肿瘤活性的4-甲基水杨酰腙铜配合物的合成方法，其特征在于:针对上述配合物进行抗肿瘤活性测试，其具体步骤为: (1)细胞培养:将A549人肺癌细胞株和H印G2人肝癌细胞株分别培养在含10%胎牛血清液的RPM1-1640介质中，内含IOOU / ml青霉素(盘尼西林)和100g / ml链霉素，置于饱和湿度、37°C、5% CO2培养箱中传代培养； (2)化合物的细胞毒性采用噻唑蓝法确定:在96孔塑料培养板中进行，使每孔中细胞数为5X IO3个，次日，在每个孔中加入200L溶解在培养液中的梯度浓度的待测物溶液(含体积百分数I %的DMSO助溶)；48小时后，加入溶解于牛血清中的浓度为0.5mg / ml的20LMTT (噻唑蓝)；继续培养4小时后，在各培养孔中加入200L 二甲基亚砜用于溶解被还原的MTT的蓝紫色晶体，然后用酶标仪测定570nm的吸光度(0D值)，空白组不加待测物，按公式:细胞生长抑制率=[(空白 OD值-给药组的OD值)/空白OD值]XlOO %计算细胞生长抑制率，求出各组浓度的平均抑制率，作图求出抑制率为50%时的浓度(即半数抑制浓度IC5tl);结果表明，配体HL和配合物I的对A549和H印G2抑制作用明显，IC5tl范围在.18.39-62.55mol / ml,是潜在的抗肿瘤药物。
【文档编号】C07F1/08GK103896969SQ201410112347
【公开日】2014年7月2日 申请日期:2014年3月19日 优先权日:2014年3月19日
【发明者】李明, 蔡红新, 贾磊, 徐君, 李慧军, 杨中娟 申请人:河南理工大学