本发明属于医药技术领域，涉及一种奥贝胆酸的制备方法及相关化合物。
背景技术：
奥贝胆酸是鹅去氧胆酸的结构修饰物6-乙基鹅去氧胆酸，它是interceptpharmaceuticals开发的一种法尼酯x受体激动剂，可通过活化法尼醇x受体，间接抑制胆酸生物合成的限速酶细胞色素7a1(cyp7a1)的基因表达，进而抑制胆酸合成，可用于治疗原发性胆汁性肝硬化和非酒精性脂肪性肝病。
已完成的一项用于pbc的iii期poise临床试验结果显示，奥贝胆酸可以显著降低血清碱性磷酸酶的含量，而该酶是pbc进步进展的生物标志前兆，安慰剂组中碱性磷酸酶平均较基线下降5％，而10mg奥贝胆酸组及5-10mg奥贝胆酸组分别下降39％及33％。12个月的治疗后，安慰剂组达到主要终点指标的患者比例为10％，而10mg奥贝胆酸组及5-10mg奥贝胆酸组分别为47％和46％。
另一项针对nash为期72周的flint试验，2014年1月半数患者的中期数据分析，效果具有统计学意义，预先设定的终止试验的统计学意义阈值为p＜0.0031，而中期结果的统计学意义超出预期，p＝0.0024。该试验因中期分析结果达到主要临床终点，已提前终止。
奥贝胆酸(obeticholicacid)由universityofperugia(授权interceptpharmaceuticals开发，日本中国权益为日本住友)研究开发，结构如下式所示：
目前奥贝胆酸的公开工艺路线有伊莱吉尔瑞公司的专利申请cn101203526(公开日2008年6月18日)，英特塞普特医药品公司的专利申请cn104781272(公开日2015年7月15日)也采用该工艺路线。cn101203526报道的路线如下：
该路线化合物vii加氢还原过程中生成的中间体化合物viii，在含水的碱性环境中热处理后生成化合物ix，在此过程中化合物viii的含量平衡在3％左右，因此在后续反应中会引入奥贝胆酸的异构体，且异构体比较难以去除，需要重复多次结晶操作。因此该路线操作复杂、成本高，不太适合奥贝胆酸的工业化生产。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种奥贝胆酸的制备方法。
本发明的第一方面在于，提供一种奥贝胆酸的制备方法，其由中间体ob-1经催化脱除保护基得到，反应方程式如下：
所述催化反应的催化剂可以为盐酸、醋酸、对甲苯磺酸、对甲苯磺酸吡啶盐等酸性催化剂中的一种或两种以上的混合物，优选为盐酸。
本发明的第二方面在于，提供一种上述中间体ob-1的制备方法，其由中间体ob-2经还原反应得到，反应方程式如下：
所述还原反应的还原剂可以为用硼氢化钠、氰基硼氢化钠、三乙酰氧基硼氢化钠、二异丁基氢化铝或四氢锂铝等还原剂，优选为硼氢化钠。
本发明的第三方面在于，提供一种上述中间体ob-2的制备方法，其由中间体ob-3经催化氢化还原反应得到，反应方程式如下：
所述催化氢化还原反应中，催化剂可以为pd/c、pd/caco3、pd(oac)2、pt/c、pto2等，优选为pd/c。
本发明的第四方面在于，提供一种上述中间体ob-3的制备方法，其由化合物ob-4与二氢吡喃反应得到，反应方程式如下：
优选地，所述反应还包括至少一种催化剂，所述催化剂可以为对甲苯磺酸、对甲苯磺酸吡啶盐、dowex50wx2等，优选为对甲苯磺酸。
本发明的第五方面在于，提供了如下所述的奥贝胆酸相关中间体或异构体化合物：
在奥贝胆酸制备方法的研究中，发明人发现采用经二氢吡喃保护羟基后的中间体ob-3制备奥贝胆酸，所获得的奥贝胆酸和ob-2产品中6位为β构型的杂质明显降低，经过简单处理即可得到高纯度的相关产品。本发明所提供的奥贝胆酸制备方法，反应过程中即减少了相关异构体的引入，提高了奥贝胆酸的精制效率，工艺更方便操作，利于工业化生产。
具体实施方式
为了使本领域技术人员可以更好地理解本发明，以下通过具体实施例对本发明技术方案进行进一步说明。需要理解的是，下述实施例只为更好地说明本发明而给出，并不是对本发明内容的限制。
实施例1：e/z-3α-四氢吡喃基羟基-6-亚乙基-7-酮基-5β-胆烷-24-酸甲酯(ob-3)的制备
称取e/z-3α-羟基-6-亚乙基-7-酮基-5β-胆烷-24-酸甲酯(ob-4)200g溶于10倍体积的二氯甲烷中，冷却至0-5℃，依次加入二氢吡喃78g，对甲苯磺酸0.8g，反应8-10小时，原料反应完全。将反应液加入到5％的碳酸氢钠溶液500ml中，搅拌15-30分钟，分离有机相；水相用二氯甲烷500ml反萃，合并有机相，500ml水洗，有机相用无水硫酸钠200g干燥。过滤，滤液浓缩得到目标产物e/z-3α-四氢吡喃基羟基-6-亚乙基-7-酮基-5β-胆烷-24-酸甲酯(ob-3)213g，收率89.1％，纯度为98.63％。
1h-nmr(cdcl3)：6.11-6.20(1h，m)，4.69-4.74(1h，m)，3.87-3.90(2h，m)，3.70-3.71(1h，m)，3.68(3h，s)，3.46-3.64(2h，m)，2.53-2.61(1h，m)，2.32-2.41(2h，m)，2.19-2.26(2h，m)，1.19-1.82(26h，m)，1.00(3h，s)，0.93(3h，d)，0.65(3h，s)。
实施例2：3α-四氢吡喃基羟基-6β-乙基-7-酮基-5β-胆烷-24-酸(ob-2)的制备
称取实施例1制得的e/z-3α-四氢吡喃基羟基-6-亚乙基-7-酮基-5β-胆烷-24-酸甲酯(ob-3)210g溶于5倍体积的meoh，加入到10倍体积的2％naoh溶液中，加入10g钯碳，室温氢化反应18-24小时，反应液加热至90-95℃，反应2-4小时。减压蒸馏去除大部分甲醇，用2n盐酸调节ph＝4-6，用乙酸乙酯1l×2萃取，合并有机相，1l水洗，有机相用无水硫酸钠250g干燥。过滤，滤液浓缩。残留物用乙酸乙酯/正庚烷＝1/1浆洗，过滤，40-50℃鼓风干燥，得到目标产物3α-四氢吡喃基羟基-6α-乙基-7-酮基-5β-胆烷-24-酸(ob-2)197g，收率93.4％，纯度为98.95％，ob2-a为0.32％。
实施例3：3α-四氢吡喃基羟基-6α-乙基-7α-羟基-5β-胆烷-24-酸(ob-1)的制备
称取实施例2制得的3α-四氢吡喃基羟基-6α-乙基-7-酮基-5β-胆烷-24-酸(ob-2)195g溶于10倍体积的2％naoh溶液中，加热至85-95℃，加入硼氢化钠21g，85-95℃反应5-8小时，原料反应完全。冷却至40-50℃，用2n盐酸调节ph＝4-6，用乙酸乙酯1l×2萃取，合并有机相，1l水洗，有机相用无水硫酸钠250g干燥。过滤，滤液浓缩。残留物用乙酸乙酯/正庚烷＝1/1浆洗，过滤，40-50℃鼓风干燥，得到目标产物3α-四氢吡喃基羟基-6α-乙基-7α-羟基-5β-胆烷-24-酸(ob-1)177g，收率90.7％，纯度为99.16％，ob-1a含量为0.06％。
1h-nmr(cdcl3)：4.75(1h，br)，3.90-3.95(1h，m)，3.71(1h，br)，3.41-3.50(2h，m)，2.35-2.43(1h，m)，2.22-2.29(1h，m)，1.14-1.93(31h，m)，0.89-0.95(9h，m)，0.66(3h，s)。
实施例4：奥贝胆酸(ob)的制备
称取实施例3制得的3α-四氢吡喃基羟基-6α-乙基-7α-羟基-5β-胆烷-24-酸(ob-1)175g溶于10倍体积的乙腈，滴加18ml浓盐酸，室温反应18-24小时，原料反应完全。减压蒸馏去除大部分乙腈，加入水1l稀释反应液，用乙酸乙酯1l×2萃取，合并有机相，1l水洗，有机相用无水硫酸钠250g干燥，过滤，滤液浓缩。残留物用乙酸乙酯600ml加热到50-60℃溶解，冷却至0-5℃析晶，过滤，用预冷至0±5℃的乙酸乙酯60ml淋洗，用500ml正庚烷淋洗，40-50℃鼓风干燥，得到目标产物奥贝胆酸(ob)119g，收率83.6％，纯度为99.74％，6-β异构体杂质含量为0.05％。
对照例1：
参考专利申请cn104781272的实施例1制备化合物ix和奥贝胆酸，起始物料为实施例同批次的ob-4。
所得产品ix纯度为94.7％，viii的含量为3.51％。
所的产品奥贝胆酸纯度为99.52％，6-β异构体杂质含量为0.14％。
参考实施例1：ob-2a的制备
称取e/z-3α-四氢吡喃基羟基-6-亚乙基-7-酮基-5β-胆烷-24-酸甲酯(ob-3)10g溶于5倍体积的meoh，加入到10倍体积的2％naoh溶液中，加入0.5g钯碳，室温氢化反应18-24小时，减压蒸馏去除大部分甲醇，用2n盐酸调节ph＝4-6，用乙酸乙酯萃取，合并有机相，有机相用无水硫酸钠干燥。过滤，浓缩，残留物用200-300目硅胶柱层析纯化(正己烷/乙酸乙酯梯度淋洗)，得到目标产物ob-2a(7.1g)。
1h-nmr(cdcl3)：4.71-4.76(1h，m)，3.95-4.01(2h，m)，3.66-3.69(1h，m)，3.36-3.44(2h，m)，2.43-2.71(3h，m)，2.21-2.36(2h，m)，1.22-1.92(27h，m)，1.01(3h，s)，0.91(6h，d)，0.66(3h，s)。
参考实施例2：ob-1a的制备
称取参考实施例1制得的(ob-2a)5.0g溶于10倍体积的2％naoh溶液中，加热至85-95℃，加入硼氢化钠0.5g，85-95℃反应5-8小时，原料反应完全。冷却至40-50℃，用2n盐酸调节ph＝4-6，用乙酸乙酯萃取，合并有机相，水洗，有机相用无水硫酸钠干燥。过滤，滤液浓缩。残留物用200-300目硅胶柱层析纯化(正己烷/乙酸乙酯梯度淋洗)，得到目标产物ob-1a(7.1g)。
1h-nmr(cdcl3)：4.76(1h，br)，3.91-3.95(1h，m)，3.83(1h，br)，3.31-3.47(2h，m)，2.25-2.49(2h，m)，1.11-1.96(31h，m)，0.90-0.96(9h，m)，0.66(3h，s)。