本发明属于生物
技术领域：
，具体涉及一种去除可得然胶生产过程中杂质和菌体的方法。
背景技术：
：可得然胶，又称热凝胶，凝结多糖，是由微生物产生的，以β-1,3-糖苷键构成的水不溶性葡聚糖，是一类将其悬浊液加热后既能形成硬而有弹性的热不可逆性凝胶又能形成热可逆性凝胶的多糖类的总称。现有技术在发酵过程中，残留的发酵培养基、菌体细胞均会对产品的纯度产生影响。专利2010100113529公开了一种可得然胶生产过程中去除菌体的方法，该发明使用碱量大，浓度高，不仅增加了生产成本，而且增加后道工序步骤，效率较低。技术实现要素：本发明目的在于提供一种去除可得然胶生产过程中杂质和菌体的方法，通过本方法在去除杂质和菌体的同时利用较少的氢氧化钠用量和高分子聚合物，而获得较高纯度的可得然胶。本发明的技术解决方案：一种去除可得然胶生产过程中杂质和菌体的方法，包括可得然胶发酵液和氢氧化钠，其特征在于，所述方法包括如下步骤：步骤1)、利用分离因数至少8000以上的高速离心机对可得然胶发酵液进行离心处理，去除可溶性杂质，收集沉淀；步骤2)、按原发酵液体积的1/2配置氢氧化钠溶液，浓度为0.5-0.7mol/L，将分散在水中的高分子聚合物加入到氢氧化钠溶液中，其中所述的高分子聚合物加入浓度为10-20g/L；步骤3)、将准备好的氢氧化钠与高分子聚合物混合溶液加入到步骤1)的沉淀中，充分搅拌75min(搅拌时间过短，可得然胶不能完全溶解，杂质与聚合物不能充分接触，会导致絮凝不彻底，搅拌时间过长，会导致最终产品的凝胶强度降低，达不到国标要求。经过多次实验，75min是我们发明人实验最佳时间。)使沉淀完全溶解，并使不溶性杂质(培养基残渣、菌体细胞)与聚合物絮凝沉淀；步骤4)、利用高速离心机，去除步骤3)的不溶性杂质，得到澄清的可得然胶碱溶液，再经脱水沉淀，低温干燥、粉碎包装得到成品。作为优选，所述步骤2)中的高分子聚合物为聚合硫酸铁和/或壳聚糖和/或聚丙烯酰胺的一种和/或几种组合物。作为优选，所述高分子聚合物为聚合硫酸铁和壳聚糖，其质量比为3：1。作为优选，所述高分子聚合物为聚合硫酸铁和聚丙烯酰胺，其质量比为2：1。作为优选，所述高分子聚合物为壳聚糖和聚丙烯酰胺，其质量比为1：1。作为优选，所述高分子聚合物为聚合硫酸铁、壳聚糖和聚丙烯酰胺，其质量比为1：1：1。本发明的有益效果：本发明相比现有技术，通过两次离心和加入高分子聚合物可在较高的可得然胶浓度≥2.5％下，利用较少的氢氧化钠用量和高分子聚合物除杂，相比现有浓度2.0％的情况下，提高了5个百分点；在利用较少的氢氧化钠用量和高分子聚合物的情况下本发明可以获得高纯的含量≥96％，可得然胶成品不仅减轻环境压力，节约生产成本，还提高了经济效益。具体实施方式以下结合实施例来进一步说明本发明实例一：1、1m3可得然胶发酵液(其中可得然胶含量为2.8g/100ml)，通过高速管式离心机离心后，得沉淀，泵入5m3罐中；2、配置500L浓度为0.5mol/L的氢氧化钠溶液；3、配置100L浓度为15g/L的聚合硫酸铁溶液；4、将聚合硫酸铁溶液泵入碱液中，形成混合溶液；5、将混合溶液泵入可得然胶沉淀中，并同时开启搅拌、充分搅拌75min；6、将罐中溶液经高速管式离心机，除去不溶性杂质和菌体，得到澄清的可得然胶碱溶液，再经脱水沉淀，低温干燥、粉碎包装得到成品24kg。实例二：1、1m3可得然胶发酵液(其中可得然胶含量为2.8g/100ml)，通过高速管式离心机离心后，得沉淀，泵入5m3罐中；2、配置500L浓度为0.6mol/L的氢氧化钠溶液；3、配置100L浓度为15g/L的聚丙烯酰胺溶液；4、将聚丙烯酰胺溶液泵入碱液中，形成混合溶液；5、将混合溶液泵入可得然胶沉淀中，并同时开启搅拌、充分搅拌75min；6、将罐中溶液经高速管式离心机，出去不溶性杂质和菌体，得到澄清的可得然胶碱溶液，再经脱水沉淀，低温干燥、粉碎包装得到成品20kg。实例三：1、1m3可得然胶发酵液(其中可得然胶含量为2.8g/100ml)，通过高速管式离心机离心后，得沉淀，泵入5m3罐中；2、配置500L浓度为0.7mol/L的氢氧化钠溶液；3、配置100L浓度为15g/L的壳聚糖溶液；4、将壳聚糖溶液泵入碱液中，形成混合溶液；5、将混合溶液泵入可得然胶沉淀中，并同时开启搅拌、充分搅拌75min；6、将罐中溶液经高速管式离心机，出去不溶性杂质和菌体，得到澄清的可得然胶碱溶液，再经脱水沉淀，低温干燥、粉碎包装得到成品22kg。实施例四：一种去除可得然胶生产过程中杂质和菌体的方法，包括可得然胶发酵液和氢氧化钠，所述方法包括如下步骤：步骤1)、利用分离因数至少8000以上的高速离心机对1m3可得然胶发酵液(其中可得然胶含量为2.8g/100ml)，进行离心处理，去除可溶性杂质，收集沉淀；步骤2)、按原发酵液体积的1/2配置氢氧化钠溶液，浓度为0.6mol/L，将分散在水中的高分子聚合物加入到氢氧化钠溶液中，其中所述的高分子聚合物加入浓度为15g/L，具体聚合硫酸铁、壳聚糖和聚丙烯酰胺的浓度均为5g/L；步骤3)、将准备好的氢氧化钠与高分子聚合物混合溶液加入到步骤1)的沉淀中，充分搅拌75min使沉淀完全溶解，并使不溶性杂质(培养基残渣、菌体细胞)与聚合物絮凝沉淀；步骤4)、利用高速离心机，去除步骤3)的不溶性杂质，得到澄清的可得然胶碱溶液，再经脱水沉淀，低温干燥、粉碎包装得到成品26kg。本发明的纯度为多次试验的结果，试验检测以国标方法为准，数据如表1 所示序号样品重量葡萄糖重量样品OD值葡萄糖OD值含量10.1g0.1g0.3960.36896.85％20.1g0.1g0.2080.19198％30.1g0.1g0.2040.19196.1％40.1g0.1g0.4020.37696.22％50.1g0.1g0.3440.32296％本发明高分子聚合物的加入类型和量对产率的影响，如表2所示序号高分子聚合物类型加入浓度产量产率1聚合硫酸铁15g/L24.0kg85.7％2聚丙烯酰胺15g/L20.0kg71.4％3壳聚糖15g/L22.0kg78.6％4聚合硫酸铁：聚丙烯酰胺＝3:115g/L25.0kg89.3％5聚合硫酸铁：聚丙烯酰胺＝2：115g/L24.6kg87.9％6壳聚糖：聚丙烯酰胺＝1：115g/L24.4kg87.1％7聚合硫酸铁：壳聚糖：聚丙烯酰胺＝1：1：115g/L26.0kg92.9％从表2中我们可以看出当高分子聚合物为聚合硫酸铁：壳聚糖：聚丙烯酰胺＝1：1：1的质量比进行混合时，产率最高。以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本领域的技术人员在本发明所揭露的技术范围内，可不经过创造性劳动想到的变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应该以权利要求书所限定的保护范围为准。当前第1页1 2 3