一种含有谷氨酸结构的罗丹明pH荧光探针及其制备方法和应用与流程

技术特征：

1.一种含有谷氨酸结构的罗丹明pH荧光探针，其特征在于，所述含有谷氨酸结构的罗丹明pH荧光探针为G-pH荧光探针，其结构通式如(Ⅰ)所示：

其中，

R₁＝R₂＝R₃＝R₄＝H；

或R₁＝R₄＝H，R₂＝-CH₂CH₃，R₃＝-CH₃；

或R₁＝R₂＝-CH₃，R₃＝R₄＝H；

或R₁＝R₂＝-CH₂CH₃，R₃＝R₄＝H；

或R₁＝R₄＝-(CH₂)₃-，R₂＝R₃＝-(CH₂)₃-。

2.根据权利要求1所述的一种含有谷氨酸结构的罗丹明pH荧光探针，其特征在于：所述的G-pH荧光探针的pH区间为7.0+0.5。

3.根据权利要求2所述的一种含有谷氨酸结构的罗丹明pH荧光探针，其特征在于：所述的G-pH荧光探针的pKa为7.36。

4.权利要求1-3任一所述的含有谷氨酸结构的罗丹明pH荧光探针的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：将罗丹明类化合物与三氯氧磷加入到1，2-二氯乙烷中，加热回流反应3-5小时，冷却至室温后，加入氨基酸类化合物的乙腈溶液和三乙胺，室温下搅拌24小时，反应液用二氯甲烷萃取，取下层液，干燥，经硅胶柱层析提纯，得到粉色固体；将该粉色固体溶于甲醇中，再加入氢氧化钠饱和水溶液，70-90℃加热水解，得到目标产物G-pH荧光探针。

5.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述罗丹明类化合物为罗丹明B、罗丹明6G、四甲基罗丹明TMR、罗丹明110或罗丹明101。

6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述氨基酸类化合物为谷氨酸甲酯。

7.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，按摩尔比，罗丹明类化合物：三氯氧磷：氨基酸类化合物：三乙胺＝1:(3-6):1:(2-4)。

8.权利要求1、2或3所述的含有谷氨酸结构的罗丹明pH荧光探针在检测生理体系pH中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，荧光探针在检测活细胞体内pH中的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述活细胞为Hela细胞株、MCF-7细胞株或RAW264.7细胞株。