本发明涉及具有抗肿瘤活性的6配位铂络合物的高分子偶联物及以其作为有效成分的药物。
背景技术：
顺氯氨铂、奥沙利铂等铂络合物作为癌化学疗法中的多种药物联合疗法的重要的药剂，在各种癌症领域中使用。但是，作为副作用，已知发生肾功能障碍、恶心呕吐、末梢神经障碍、骨髓抑制等，成为临床使用上的问题。
为了降低这些副作用和增强治疗效果的目的，进行了利用给药技术的铂络合物的开发。到目前为止，作为进行到临床试验阶段的铂络合物的dds制剂，可例举例如二氨基环己烷铂(ii)和嵌段共聚物和配位化合物(nc-4016)(参照专利文献1)、封入了奥沙利铂的靶化脂质体(mbp-426)(参照专利文献2)、n、o-酰胺丙二酸酯铂二胺络合物(ap5346)(参照专利文献3)、顺氯氨铂和嵌段共聚物的配位化合物(参照专利文献4)、顺氯氨铂的脂质体制剂(lipoplatin)(参照非专利文献1参照)等，但是尚不存在达到上市要求的铂络合物的dds制剂。
上述的进行到临床试验阶段的铂络合物的dds制剂中，使用4配位的铂络合物作为铂络合物，但也报道了使用6配位的铂络合物的dds制剂。作为使用6配位的铂络合物的dds制剂的具体例，已知以金纳米棒作为载体的化合物(参照非专利文献2)、在载体和6配位铂络合物之间结合丝氨酸苏氨酸磷酸酶2a抑制剂的化合物(参照非专利文献3)、将作为载体的聚合物用6配位铂络合物交联而得的化合物(参照非专利文献4)、将内含6配位铂络合物的胶束用叶酸修饰而得的化合物(参照非专利文献5)、将光响应性6配位铂络合物结合于载体而得的化合物(参照非专利文献6)、使6配位铂络合物及道诺霉素分别结合于聚合物而形成胶束的化合物(参照非专利文献7)、使6配位铂络合物及紫杉醇分别结合于聚合物而形成胶束的化合物(参照非专利文献8)、使癌症靶向肽和6配位铂络合物结合而得的化合物(参照非专利文献9)等。
作为使用6配位铂络合物的优点，可例举能够利用轴位的配体，通过与4配位铂络合物不同的方法使其与dds的载体结合。此外，6配位铂络合物通常比4配位铂络合物的活性低，据称通过细胞内的具有还原作用的物质而被还原为4配位化合物，并显示抗肿瘤活性，因此期待通过使用6配位络合物来降低副作用(参照非专利文献10)。作为生物体内的具有还原作用的物质，可例举谷胱甘肽及抗坏血酸等，它们在细胞(包括癌细胞)内的浓度比它们在血中的浓度高，认为6配位铂络合物在细胞内的还原环境下选择性地转化为高活性的4配位铂络合物。此外，抗坏血酸的细胞内浓度随文献而不同，为300～10000μm，在血中的浓度为30～51μm(参照非专利文献4及11)。另外，对于从添加抗坏血酸的条件下的载体释放铂络合物的释放性，在非专利文献4和7中得到验证。
对于低分子6配位铂络合物的还原性，已知其随轴位的配体而变化。但是，上述的非专利文献2～9中使用的6配位铂络合物均为作为轴位的配体具有2个羟基的6配位铂络合物的一方或双方的羟基与载体酯结合而得的化合物，没有进行其后的开发。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：日本专利特许第3955992号公报
专利文献2：日本专利特表2008-538105号公报
专利文献3：日本专利特开2011-137046号公报
专利文献4：日本专利特许第5458255号公报
非专利文献
非专利文献1：anticancerresearch,2007,27,471-476
非专利文献2：acsappl.mater.interfaces,2014,6,4382-4393
非专利文献3：macromol.biosci.,2014,14,588-596
非专利文献4：macromol.biosci.,2013,13,954-965
非专利文献5：biomacromolecules,2013,14,962-975
非专利文献6：colloidsandsurfacesb:biointerfaces,2014,123,734-741
非专利文献7：journalofcontrolledrelease,2012,163,304-314
非专利文献8：biomaterials,2012,33,6507-6519
非专利文献9：journalofinorganicbiochemistry,2012,110,58-63
非专利文献10：j.med.chem.,2007,50,3403-3411
非专利文献11：j.am.chem.soc.,2014,136,8790-8798
技术实现要素：
发明所要解决的技术问题
如上所述，目前尚未获得在还原条件下的细胞内选择性地释放高活性的铂络合物、表现出作为药物所要求的高抗肿瘤活性的铂络合物的dds制剂，期望能在临床上使用的新型的铂络合物的dds制剂。即，包含上述化合物并使用6配位的铂络合物的dds制剂没有与4配位铂络合物的dds制剂同样地用于临床的化合物，因此要求一种利用特定的6配位铂络合物和dds载体，在细胞内的还原条件下释放出高活性的4配位铂络合物的临床上有用的6配位铂络合物的dds制剂。
解决技术问题所采用的技术方案
本发明人为了解决上述技术问题而进行了认真研究，结果发现通过使具有聚乙二醇结构部分及聚天冬氨酸部分或聚谷氨酸部分的嵌段共聚物中的侧链羧基与在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物直接或通过连接基团进行酯结合而得的6配位铂络合物的高分子衍生物在细胞内的还原条件下，高效地释放出铂络合物，并呈现抗肿瘤活性，从而完成了本发明。
即，本发明涉及下述(1)～(16)。
(1)一种6配位铂络合物的高分子偶联物，其特征是在具有聚乙二醇结构部分及聚天冬氨酸部分或聚谷氨酸部分的嵌段共聚物中的侧链羧基上，直接或通过间隔基团结合有在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物。
(2)如上述(1)所述的6配位铂络合物的高分子偶联物，其由下述通式(i)表示，
[化1]
式(i)中，r1表示氢原子、可具有取代基的(c1～c10)烷基或(c6～c10)芳基，r2表示连接基团，r3表示氢原子或(c1～c6)酰基，r4表示在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基或选自下述通式(ii)表示的基团的取代基，其中该取代基的至少一个w表示在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基，r5表示选自(c1～c30)烷氧基、(c1～c30)芳烷基氧基、(c6～c10)芳氧基、可具有取代基的(c1～c30)烷基氨基、可具有取代基的二(c1～c30)烷基氨基、从α-氨基酸衍生物的α-氨基除去h后的由下述通式(iii)表示的取代基及-nr9conhr10的取代基，r9、r10可以相同或不同且表示(c3～c6)环状烷基或可被叔氨基取代的(c1～c5)烷基，a表示5～11500的整数，d、e、f、g、h、i、j分别表示0～200的整数，且d+e表示1～200的整数，且d+e+f+g+h+i+j表示2～200的整数，聚天冬氨酸的各结构单元的结合顺序是任意的，
[化2]
式(ii)中，w表示选自在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基、羟基、可具有取代基的(c1～c10)烷基或具有苄基的氨基、可具有苯基的(c1～c10)烷氧基、(c6～c10)芳氧基及-nr6conhr7的取代基，r6、r7可以相同或不同且表示(c3～c6)环状烷基或可被叔氨基取代的(c1～c5)烷基，t表示氢原子、可具有取代基的(c1～c10)烷基或(c6～c10)芳基，r8表示可具有取代基的(c1～c10)烷基、苄基或羧酸受到保护的氨基酸的残基，
[化3]
式(iii)中，q表示α-氨基酸的残基，t表示氢原子、可具有取代基的(c1～c10)烷基或(c6～c10)芳基，z表示选自可具有取代基的(c1～c10)烷基或具有苄基的氨基、可具有苯基的(c1～c10)烷氧基、(c6～c10)芳氧基及-nr12conhr13的取代基，r12、r13可以相同或不同且表示(c3～c6)环状烷基或可被叔氨基取代的(c1～c5)烷基。
(3)如上述(2)所述的6配位铂络合物的高分子偶联物，其中，r1是可具有取代基的(c1～c3)烷基，r2是(c2～c6)亚烷基，r3是(c1～c3)酰基，r4是在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基或选自下述通式(iv)表示的基团的取代基，其中该取代基的至少一个w是在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基，a是10～2000的整数，d、e、f、g、h、i、j分别是0～100的整数，且d+e是1～100的整数，且d+e+f+g+h+i+j是4～100的整数，
[化4]
式(iv)中，w、t及r8表示与通式(ii)相同的基团。
(4)如上述(2)或(3)所述的6配位铂络合物的高分子偶联物，其中，r1是甲基，r2是亚丙基，r3是乙酰基，r4是在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基，r5是选自从苯基丙氨酸苄基酯的氨基除去h后的残基及-nr9conhr10的取代基，r9、r10均为环己基或异丙基。
(5)如上述(2)或(3)所述的6配位铂络合物的高分子偶联物，其中，r1是甲基，r2是亚丙基，r3是乙酰基，r4是选自下述通式(v)表示的基团的取代基，其中该取代基的至少一个w是在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基，r5是-nr9conhr10，r9、r10均为环己基或异丙基，
[化5]
式(v)中，w是选自在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基及-nr6conhr7的取代基，r6、r7均为环己基或异丙基，t是氢原子、甲基、乙基或苄基，r8表示羧酸受到保护的氨基酸的残基。
(6)如上述(1)所述的6配位铂络合物的高分子偶联物，其由下述通式(vi)表示，
[化6]
式(vi)中，r11表示氢原子、可具有取代基的(c1～c10)烷基或(c6～c10)芳基，r19表示连接基团，r20表示氢原子或(c1～c6)酰基，r21表示在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基、或选自下述通式(vii)表示的基团的取代基，其中该取代基的至少一个w表示在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基，r22表示选自(c1～c30)烷氧基、(c1～c30)芳烷基氧基、(c6～c10)芳氧基、可具有取代基的(c1～c30)烷基氨基、可具有取代基的二(c1～c30)烷基氨基、从α-氨基酸衍生物的α-氨基除去h后的由下述通式(viii)表示的残基及-nr14conhr15的取代基，r14、r15可以相同或不同且表示(c3～c6)环状烷基或可被叔氨基取代的(c1～c5)烷基，b表示5～11500的整数，k表示1～200的整数,m、n分别表示0～200的整数，且k+m+n表示2～200的整数，聚谷氨酸的各结构单元的结合顺序是任意的，
[化7]
式(vii)中，w表示选自在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基、羟基、可具有取代基的(c1～c10)烷基或具有苄基的氨基、可具有苯基的(c1～c10)烷氧基、(c6～c10)芳氧基及-nr16conhr17的取代基，r16、r17可以相同或不同且表示(c3～c6)环状烷基或可被叔氨基取代的(c1～c5)烷基，t表示氢原子、可具有取代基的(c1～c10)烷基或(c6～c10)芳基，r8表示可具有取代基的(c1～c10)烷基、苄基或羧酸受到保护的α-氨基酸的残基，
[化8]
式(viii)中，q表示α-氨基酸的残基，t表示氢原子、可具有取代基的(c1～c10)烷基或(c6～c10)芳基，z表示选自可具有取代基的(c1～c10)烷基或具有苄基的氨基、可具有苯基的(c1～c10)烷氧基、(c6～c10)芳氧基及-nr24conhr25的取代基，r24、r25可以相同或不同且表示(c3～c6)环状烷基或可被叔氨基取代的(c1～c5)烷基。
(7)如上述(6)所述的6配位铂络合物的高分子偶联物，其中，r11是可具有取代基的(c1～c3)烷基，r19是(c2～c6)亚烷基，r20是(c1～c3)酰基，r21是在轴位具有卤原子和羟基的6配位络合物的残基或选自下述通式(ix)表示的基团的取代基，其中该取代基的至少一个w是在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基，b是10～2000的整数，k是1～100的整数，m、n分别是0～100的整数，且k+m+n是3～100的整数，
[化9]
式(ix)中，w、t及r8表示与通式(vii)相同的基团。
(8)如上述(6)或(7)所述的6配位铂络合物的高分子偶联物，其中，r11是甲基，r19是亚丙基，r20是乙酰基，r21是在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基，r22是选自从苯基丙氨酸苄基酯的氨基除去h后的残基及-nr14conhr15的取代基，r14、r15均为环己基或异丙基。
(9)如上述(6)或(7)所述的6配位铂络合物的高分子偶联物，其中，r11是甲基，r19是亚丙基，r20是乙酰基，r21是选自下述通式(x)表示的基团的取代基，其中该取代基的至少一个w是在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基，r22是-nr14conhr15，r14、r15均为环己基或异丙基，
[化10]
式(x)中，w是选自在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基及-nr16conhr17的取代基，r16、r17均为环己基或异丙基，t是氢原子、甲基、乙基或苄基，r8表示羧酸受到保护的氨基酸的残基。
(10)如上述(1)～(9)中任一项所述的6配位铂络合物的高分子偶联物，其中，在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物是由下述通式(xi)表示的6配位铂络合物，
[化11]
式(xi)中，x1和x2均表示卤原子、或者一起表示选自乙二酸酯、丙二酸酯、丁二酸酯及邻苯二甲酸酯的二羧酸酯，y1表示卤原子。
(11)如上述(10)所述的6配位铂络合物的高分子偶联物，其中，6配位铂络合物的y1是氯原子或溴原子，x1和x2均为氯原子或溴原子、或者一起表示乙二酸酯。
(12)上述(1)所述的6配位铂络合物的高分子偶联物的制造方法，其特征是，使用脱水缩合剂使具有聚乙二醇结构部分及聚天冬氨酸部分或聚谷氨酸部分的嵌段共聚物中的侧链的羧基与在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的羟基进行酯结合。
(13)上述(1)所述的6配位铂络合物的高分子偶联物的制造方法，其特征是，使具有聚乙二醇结构部分及聚天冬氨酸部分或聚谷氨酸部分的嵌段共聚物中的侧链的羧基与连接基团进行酯结合，所述连接基团与在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的该羟基已进行了酯结合。
(14)上述(1)所述的6配位铂络合物的高分子偶联物的制造方法，其特征是，使在具有聚乙二醇结构部分及聚天冬氨酸部分或聚谷氨酸部分的嵌段共聚物中的侧链的羧基上结合的连接基团与在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的该羟基进行酯结合。
(15)一种药物，其以上述(1)～(11)中任一项所述的6配位铂络合物的高分子偶联物作为有效成分。
(16)一种抗肿瘤剂，其以上述(1)～(11)中任一项所述的6配位铂络合物的高分子偶联物作为有效成分。
发明效果
本发明的在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的高分子偶联物在癌细胞内的还原条件下高效地释放出铂络合物，以其作为有效成分的药物是在临床治疗中末梢神经功能障碍等副作用少的、呈现出有效的抗肿瘤活性的药剂。
具体实施方式
下面，陈述本发明的详细情况。
本发明的6配位铂络合物的高分子偶联物的特征是，在具有聚乙二醇结构部分及聚天冬氨酸部分或者聚乙二醇结构部分和聚谷氨酸部分的嵌段共聚物中的侧链羧基上直接或通过间隔基团与在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物酯结合。
作为本发明中的聚乙二醇结构部分，包括两末端或单末端被修饰的聚乙二醇，两末端的修饰基团可以相同或不同。作为末端的修饰基团，可例举例如甲基、乙基、正丙基、异丙基、正丁基、仲丁基、叔丁基、苄基、4-苯基丁基、二甲氧基乙基、二乙氧基乙基、氨基乙基、氨基丙基、氨基丁基等。其中，优选可例举可具有取代基的(c1～c3)烷基、氨基乙基、氨基丙基等。
聚乙二醇结构部分的分子量通常为200～500000左右，优选为300～100000左右，更优选1000～50000左右。
该嵌段共聚物的聚天冬氨酸部分或聚谷氨酸部分的结合数在每1分子中平均为1～300个左右，优选2～200个左右，更优选3～100个左右。通过原料的嵌段共聚物的利用碱的中和滴定可求出该结合数。
本发明中的在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物只要中心金属原子为铂(iv)、轴位的配体为卤原子和羟基即可，没有特别限定。
本发明的6配位铂络合物的高分子偶联物是该羟基与具有聚乙二醇结构部分及聚天冬氨酸部分或者聚乙二醇结构部分和聚谷氨酸部分的嵌段共聚物中的侧链羧基、或者与该羧基结合的连接基团的羧基进行酯结合的化合物。
本发明中的聚天冬氨酸部分可以是α体或β体的聚合物，也可以是α体和β体混合的聚合物，优选为α体和β体混合的聚合物。
本发明中的聚谷氨酸部分可以是α体或γ体的聚合物，也可以是α体和γ体混合的聚合物，优选为α体的聚合物。
本发明中的聚天冬氨酸部分或聚谷氨酸部分可以仅为d-氨基酸，也可以仅为l-氨基酸，也可以是d-氨基酸和l-氨基酸任意地混合存在。
本发明的嵌段共聚物中，具有聚乙二醇结构部分及聚天冬氨酸部分或聚谷氨酸部分的嵌段共聚物与6配位铂络合物的高分子偶联物的结合量只要是显示药效的量就没有特别限定，通常为聚合物的总羧基数的1～100％，优选为5～80％。
本发明的卤原子是氟原子、氯原子、溴原子或碘原子。
本发明中可具有取代基的(c1～c10)烷基是指直链、支链或环状(c1～c10)烷基，可例举例如甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、正己基、正辛基、正癸基、异丙基、仲丁基、叔丁基、2,2-二甲基丙基、环丙基、环丁基、环戊基、环己基、金刚烷基、苄基、苯乙基、4-苯基丁基、二甲氧基乙基、二乙氧基乙基、二甲氧基丙基、二乙氧基丙基、氨基乙基、二氨基乙基、氨基丙基、氨基丁基等。
本发明中，作为(c6～c10)芳基，可例举例如苯基、萘基。
本发明的在具有聚乙二醇结构部分及聚天冬氨酸部分的嵌段共聚物中的侧链羧基上直接或通过间隔基团结合在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物而得的6配位铂络合物的高分子偶联物例如由上述通式(i)表示。
作为通式(i)的r1中的可具有取代基的(c1～c10)烷基，可例举上述例示的取代基，其中优选可具有取代基的(c1～c3)烷基，特别优选甲基。
作为通式(i)的r1中的(c6～c10)芳基，可例举上述例示的取代基。
作为通式(i)的以r2表示的连接基团，可例举例如直链或支链的(c2～c6)亚烷基，其中优选直链(c2～c4)亚烷基，可例举例如亚乙基、亚丙基、四亚甲基等，特别优选亚丙基。
作为通式(i)的r3中的(c1～c6)酰基，可例举例如甲酰基、乙酰基、丙酰基、新戊酰基等，优选(c1～c3)酰基，特别优选乙酰基。
如上所述，通式(i)的r4是在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基或通式(ii)的取代基。
在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基是指从上述的6配位铂络合物的羟基除去h后的基团。
作为通式(ii)的w中的可具有取代基的(c1～c10)烷基，可例举上述例示的取代基，其中优选乙基、叔丁基。
作为通式(ii)的w中的可具有苯基的(c1～c10)烷氧基，可例举例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基、苄基氧基、苯乙氧基、4-苯基-1-丁氧基等。
作为通式(ii)的w中的(c6～c10)芳氧基，可例举例如苯氧基、萘氧基。
作为通式(ii)的w的-nr6conhr7的r6、r7中的(c3～c6)环状烷基，可例举例如环丙基、环丁基、环戊基、环己基，其中优选环己基。此外，作为可被叔氨基取代的(c1～c5)烷基，可例举例如甲基、乙基、正丙基、正丁基、正戊基、异丙基、二甲基氨基丙基、2-吗啉基乙基等，其中优选异丙基、二甲基氨基丙基。
作为通式(ii)的t中的可具有取代基的(c1～c10)烷基，可例举上述例示的取代基，优选甲基、乙基、正丙基、苄基等。
作为通式(ii)的t中的(c6～c10)芳基，可例举上述例示的取代基。
作为通式(ii)的t，特别优选例如氢原子、甲基、乙基、苄基。
通式(ii)的r8中的可具有取代基的(c1～c10)烷基可例举上述例示的取代基，其中优选乙基、苯基、苄基、4-苯基-1-丁基。此外，作为羧基受到保护的氨基酸残基，没有特别限定，但优选例如甘氨酸、丙氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、缬氨酸、苯丙氨酸的(c1～c3)烷基酯或无取代酰胺、二甲基酰胺、二乙基酰胺、二苄基酰胺等。
通式(i)的r4中的由通式(ii)表示的取代基优选由通式(iv)[式中，w、t及r8表示与通式(ii)同样的基团]表示的取代基，特别优选由通式(v)[式中，w是选自在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基及-nr6conhr7的取代基，r6、r7均为环己基或异丙基，t是氢原子、甲基、乙基或苄基，r8表示羧酸受到保护的氨基酸的残基]表示的取代基。
通式(i)的r5表示选自(c1～c30)烷氧基、(c1～c30)芳烷基氧基、(c6～c10)芳氧基、可具有取代基的(c1～c30)烷基氨基、可具有取代基的二(c1～c30)烷基氨基、由上述通式(iii)[式中，q表示α-氨基酸的残基，t表示氢原子、可具有取代基的(c1～c10)烷基或(c6～c10)芳基，z表示选自可具有取代基的(c1～c10)烷基或具有苄基的氨基、可具有苯基的(c1～c10)烷氧基、(c6～c10)芳氧基及-nr12conhr13的取代基，r12、r13表示可以相同或不同的(c3～c6)环状烷基或可被叔氨基取代的(c1～c5)烷基]表示的α-氨基酸衍生物及-nr9conhr10的基团，r9、r10可以相同或不同且是(c3～c6)环状烷基或可被叔氨基取代的(c1～c5)烷基。
作为(c1～c30)烷氧基，可例举例如甲氧基、乙氧基、正丁氧基、叔丁氧基、环丙氧基、环己氧基、金刚烷氧基等，其中优选乙氧基、叔丁氧基。
作为(c1～c30)芳烷基氧基，可例举例如苄基氧基、2-苯基乙氧基、3-苯基丙氧基、4-苯基丁氧基等，其中优选苄基氧基、4-苯基-1-丁氧基。
作为(c6～c10)芳氧基，可例举例如苯氧基、萘氧基。
作为可具有取代基的(c1～c30)烷基氨基、可具有取代基的二(c1～c30)烷基氨基，可例举例如甲氨基、乙氨基、丁氨基、异丙氨基、环己氨基、苄氨基、4-苯基丁氨基、二甲氨基、二乙氨基、二丁氨基、二异丙氨基、二环己氨基、二苄氨基、二苯基丁氨基、n-乙基甲氨基、n-甲基苯基氨基、n-甲基-4-苯基丁氨基等，其中优选乙氨基、苄氨基、4-苯基丁氨基。
由通式(iii)表示的α-氨基酸衍生物的q优选必须为氨基酸的侧链，可例举例如氢原子、甲基、苄基、异丁基等，特别优选作为苯基丙氨酸的侧链的苄基。此外，z中的可具有取代基的(c1～c10)烷基可例举上述例示的取代基，其中优选甲基、乙基、苯基、苄基、4-苯基-1-丁基。
作为t中的可具有取代基的(c1～c10)烷基、(c6～c10)芳基，可例举与上述通式(ii)中的t同样的基团，优选的基团也同样。
作为z中的可具有苯基的(c1～c10)烷氧基，可例举例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、异丙氧基、叔丁氧基、苄基氧基、苯乙氧基、4-苯基丁氧基等。
作为z中的(c6～c10)芳氧基，可例举例如苯氧基、萘氧基。
在z为-nr12conhr13的情况下，r12、r13中的(c3～c6)环状烷基及可被叔氨基取代的(c1～c5)烷基可例举与上述的通式(ii)的w的r6、r7同样的基团，优选的基团也同样。
其中，作为z，特别优选苄基氧基。
通式(i)的r5中的-nr9conhr10的r9、r10中的(c3～c6)环状烷基及可被叔氨基取代的(c1～c5)烷基可例举与上述的通式(ii)的w的r6、r7同样的基团，优选的基团也同样。
通式(i)的r5的取代基在一分子中可以相同或不同，而且6配位铂络合物的高分子偶联物可以是分子间单一的化合物或也可以是混合物。
作为通式(i)的r5的取代基，特别优选例如从苯基丙氨酸苄基酯、n-甲基-苯基丙氨酸苄基酯、n-乙基-苯基丙氨酸苄基酯、n-苄基-苯基丙氨酸苄基酯的氨基除去h后的残基、或上述的-nr9conhr10。
通式(i)的a表示5～11500的整数，优选为10～2000。
通式(i)的d、e、f、g、h、i、j分别表示0～200的整数，且d+e表示1～200的整数，且d+e+f+g+h+i+j表示2～200的整数，优选d、e、f、g、h、i、j分别为0～100的整数，且d+e为1～100、f+g为0～99、h+i为～30的整数，且d+e+f+g+h+i+j为4～100的整数。
在由通式(i)表示的6配位铂络合物的高分子偶联物中，聚天冬氨酸的各结构单元的结合顺序是任意的。
本发明的在具有聚乙二醇结构部分和聚谷氨酸部分的嵌段共聚物中的侧链羧基上直接或通过间隔基团结合在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物而成的6配位铂络合物的高分子偶联物例如由上述通式(vi)表示。
作为通式(vi)的r11中的可具有取代基的(c1～c10)烷基，可例举上述例示的取代基，其中优选可具有取代基的(c1～c3)烷基，特别优选甲基。
作为通式(vi)的r11中的(c6～c10)芳基，可例举上述例示的取代基。
作为通式(vi)的由r19表示的连接基团，可例举与上述通式(i)的r2中的连接基团同样的基团，优选的基团也同样。
作为通式(vi)的r20中的(c1～c6)酰基，可例举与上述通式(i)的r3中的(c1～c6)酰基相同的基团，优选的基团也相同。
如上所述，通式(vi)的r21是在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基或通式(vii)的取代基。
在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基是指从上述的6配位铂络合物的羟基除去h后的基团。
通式(vii)的w中的可具有取代基的(c1～c10)烷基、可具有苯基的(c1～c10)烷氧基、(c6～c10)芳氧基、-nr16conhr17的r16、r17中的(c3～c6)环状烷基和可被叔氨基取代的(c1～c5)烷基可例举分别与通式(ii)的w中的可具有取代基的(c1～c10)烷基、可具有苯基的(c1～c10)烷氧基、(c6～c10)芳氧基、-nr6conhr7的r6、r7中的(c3～c6)环状烷基和可被叔氨基取代的(c1～c5)烷基同样的基团，优选的基团也相同。
作为通式(vii)的t中的可具有取代基的(c1～c10)烷基，可例举上述例示的取代基，优选例如甲基、乙基、正丙基、苄基等。
作为通式(vii)的t中的(c6～c10)芳基，可例举上述例示的取代基。
作为通式(vii)的t，特别优选例如氢原子、甲基、乙基、苄基。
通式(vii)的r8中的可具有取代基的(c1～c10)烷基和羧基受到保护的氨基酸残基可例举与通式(ii)的r8中的可具有取代基的(c1～c10)烷基及羧基受到保护的氨基酸残基同样的基团，优选的基团也相同。
通式(vi)的r21中的由通式(vii)表示的取代基优选由通式(ix)[式中，w、t及r8表示与通式(vii)同样的基团]表示的取代基，特别优选由通式(x)[式中，w是选自在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的残基及-nr16conhr17的取代基，r16、r17均为环己基或异丙基，t是氢原子、甲基、乙基或苄基，r8表示羧酸受到保护的氨基酸的残基]表示的取代基。
通式(vi)的r22表示选自(c1～c30)烷氧基、(c1～c30)芳烷基氧基、(c6～c10)芳氧基、可具有取代基的(c1～c30)烷基氨基、可具有取代基的二(c1～c30)烷基氨基、由上述通式(viii)[式中，q表示α-氨基酸的残基，t表示氢原子、可具有取代基的(c1～c10)烷基或(c6～c10)芳基，z表示选自可具有取代基的(c1～c10)烷基或具有苄基的氨基、可具有苯基的(c1～c10)烷氧基、(c6～c10)芳氧基及-nr24conhr25的取代基，r24、r25表示可以相同或不同的(c3～c6)环状烷基或可被叔氨基取代的(c1～c5)烷基]表示的α-氨基酸衍生物及-nr14conhr15的基团，r14、r15是可以相同或不同的(c3～c6)环状烷基或可被叔氨基取代的(c1～c5)烷基。
这里，(c1～c30)烷氧基、(c1～c30)芳烷基氧基、(c6～c10)芳氧基、可具有取代基的(c1～c30)烷基氨基、可具有取代基的二(c1～c30)烷基氨基可例举分别与上述通式(i)的r5中的(c1～c30)烷氧基、(c1～c30)芳烷基氧基、(c6～c10)芳氧基、可具有取代基的(c1～c30)烷基氨基、可具有取代基的二(c1～c30)烷基氨基同样的基团，优选的基团也相同。
由通式(viii)表示的α-氨基酸衍生物的q、t可例举与由通式(iii)表示的α-氨基酸衍生物的q、t同样的基团，优选的基团也相同。此外，通式(viii)的z的可具有取代基的(c1～c10)烷基、可具有苯基的(c1～c10)烷氧基、(c6～c10)芳氧基、-nr24conhr25的r24、r25中的(c3～c6)环状烷基及可被叔氨基取代的(c1～c5)烷基可例举与上述的通式(iii)的z的可具有取代基的(c1～c10)烷基、可具有苯基的(c1～c10)烷氧基、(c6～c10)芳氧基、-nr12conhr13的r12、r13中的(c3～c6)环状烷基及可被叔氨基取代的(c1～c5)烷基同样的基团，优选的基团也相同。
其中，作为z，特别优选苄基氧基。
通式(vi)的r22中的-nr14conhr15的r14、r15中的(c3～c6)环状烷基及可被叔氨基取代的(c1～c5)烷基可例举与上述的通式(ii)的w的-nr6conhr7的r6、r7同样的基团，优选的基团也同样。
通式(vi)的r22的取代基在一分子中可以相同或不同，而且，6配位铂络合物的高分子偶联物可以是分子间单一的化合物或也可以是混合物。
作为通式(vi)的r22的取代基，特别优选例如从苯基丙氨酸苄基酯、n-甲基-苯基丙氨酸苄基酯、n-乙基-苯基丙氨酸苄基酯、n-苄基-苯基丙氨酸苄基酯的氨基除去h后的残基、或上述的-nr14conhr15。
通式(vi)的b表示5～11500的整数，优选为10～2000。
通式(vi)的k表示1～200的整数，m、n分别表示0～200的整数，且k+m+n表示2～200的整数，优选k为1～100的整数，m、n分别是0～100的整数，且k+m+n为3～100。更优选的是m为0～99，n为0～30。
在由通式(vi)表示的6配位铂络合物的高分子偶联物中，聚谷氨酸的各结构单元的结合顺序是任意的。
作为本发明中的在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物，优选可例举由上述通式(xi)[x1和x2均为卤原子、或一起表示选自乙二酸酯、丙二酸酯、丁二酸酯及邻苯二甲酸酯的二羧酸酯，y1表示卤原子]表示的6配位铂络合物。
作为通式(xi)的x1及x2，优选均为氯原子氯原子、溴原子，或一起表示二羧酸酯，作为y1，优选氯原子或溴原子。
作为该二羧酸酯，没有特别限定，特别优选2个羧基直接结合的基团、具有2个羧基的(c1～c6)烷基及在邻位具有2个羧基的(c6～c10)芳基，可例举例如以下示出的乙二酸酯(i)、丙二酸酯(ii)、丁二酸酯(iii)、邻苯二甲酸酯(iv)等。
[化12]
作为本发明的6配位铂络合物中优选使用的环己烷-1,2-二胺配体的立体结构，优选1r、2r的反式构型。
作为本发明的在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物，特别优选由下述通式(xii)及(xiii)表示的化合物。
[化13]
[式中，y1表示氯原子或溴原子。]
由上述通式(i)或(vi)表示的6配位铂络合物的高分子偶联物在水中可以形成以聚乙二醇结构部分作为外壳、以铂络合物结合部分作为内壳的胶束。该情况下，该胶束的粒径在利用粒径和ζ电位测定装置(马尔文仪器有限公司(malverninstrumentsltd):zetasizernanozs)的测定时为3～100nm左右。
本发明中使用的6配位铂络合物可使用非专利文献10等文献记载的方法来制造。即，通过在溶剂中对4配位铂络合物进行过氧化氢等氧化剂处理或氧化的卤化处理来制作6配位铂络合物的方法，及通过将6配位铂络合物供于取代反应或缩合反应来制作目标的6配位铂络合物的方法。将制造方法的一例在下述参考例中示出。
本发明的6配位铂络合物的高分子偶联物通过在有机溶剂中，使用脱水缩合剂等，使具有聚乙二醇结构部分及聚天冬氨酸部分或聚谷氨酸部分的嵌段共聚物的侧链羧基与通过上述制备方法得到的在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的羟基进行酯结合而得到，本制造方法也包括在本发明内。即，例如，将参考日本专利第3268913号公报中记载的方法制备的聚乙二醇结构部分-聚天冬氨酸部分的嵌段共聚物与根据需要对进行反应的基团以外的官能团进行了保护的在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物在溶剂中、优选在n,n-二甲基甲酰胺(dmf)、1,3-二甲基-2-咪唑啉酮(dmi)、n-甲基吡咯烷酮(nmp)等非质子性极性溶剂中，在0～180℃、优选5～50℃下，供于利用二环己基碳二亚胺(dcc)、二异丙基碳二亚胺(dipc)、1-乙基-3-(3-二甲基氨基丙基)碳二亚胺盐酸盐(wsc)、1-乙氧基羰基-2-乙氧基-1,2-二羟基喹啉酮(eedq)、六氟磷酸(苯并三唑-1-基氧基)三吡咯烷基鏻(pybop)、n,n,n',n'-四甲基-o-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲六氟磷酸盐(hatu)等的脱水缩合反应的制造方法。此外，在缩合反应时，可以使用n,n-二甲基氨基吡啶(dmap)、1-羟基苯并三唑水合物(hobt·h2o)、(羟基亚氨基)氰基乙酸乙酯等反应辅助剂。缩合反应后，根据需要进行脱保护，通过通常的分离纯化等操作可制造6配位铂络合物的高分子偶联物。使用参考日本专利第4745664号公报中记载的方法制备的聚乙二醇结构部分-聚谷氨酸部分的嵌段共聚物，同样地可制造本发明的6配位铂络合物的高分子偶联物。
作为向通式(i)或(vi)的化合物中的r4或r21中导入由通式(ii)或(vii)表示的结构的方法，可通过例如使用脱水缩合剂使具有聚乙二醇结构部分及聚天冬氨酸部分或聚谷氨酸部分的嵌段共聚物的侧链羧基与羧酸受到保护的氨基酸衍生物或其n-单烷基体进行酰胺结合，在进行羧酸的脱保护后，使用脱水缩合剂将由通式(ii)或(vii)的w表示的取代基导入来制造。
作为向通式(i)或(vi)的化合物中的r5或r22中导入所希望的取代基的方法，可以是将嵌段共聚物的羧基用通常的酯合成及酰胺合成中使用的方法活化后，使其与欲结合的量的对应的醇、对应的胺及羧基受到保护的氨基酸衍生物等在碱性条件下反应的方法，或者将对应的醇、对应的胺及羧基受到保护的氨基酸衍生物等活化后，使其与嵌段共聚物的羧基反应的方法等。在将生成物纯化后，可通过同样的反应使聚合物中的未反应的羧基再活化，可使其与在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的羟基缩合，或者，使其与不同的醇、胺等反复反应，合成r5或r22的各种取代基的混合体，接着使其与在轴位具有卤原子和羟基的6配位铂络合物的羟基缩合。此外，它们的反应顺序可以不同。本发明的6配位铂络合物的高分子偶联物的制造方法并不限定于这些方法。在下述的实施例中也示出制造方法的例示。
本发明的以6配位铂络合物的高分子偶联物作为有效成分的药物也包含在本发明中。只要是本发明的6配位铂络合物的高分子偶联物显示药效的药物用途就没有特别限定，但优选作为抗肿瘤剂的用途。作为抗肿瘤剂的用途，只要是单独或能与制剂用载体、赋形剂、崩解剂、粘合剂、润滑剂、流化剂、包衣剂、悬浮剂、乳化剂、稳定剂、防腐剂、调味剂、芳香剂、稀释剂、增溶剂等制药学上允许的添加剂混合，以粉剂、颗粒剂、片剂、囊片、胶囊剂、注射剂、栓剂、软膏剂等制剂形态，以口服或非口服的方式(全身给药、局部给药等)给药即可。特别优选作为注射剂的用途，通常使用例如水、生理盐水、5％葡萄糖或甘露醇液、水溶性有机溶剂(例如甘油、乙醇、二甲亚砜、n-甲基吡咯烷酮、聚乙二醇、聚氧乙烯氢化蓖麻油(cremophor)等或它们的混合液)或水与该水溶性有机溶剂的混合液等。
本发明的6配位铂络合物的高分子偶联物的给药量当然可随患者的性别、年龄、生理状态、病态等而改变，但非口服时，作为活性成分，通常成人每天给药0.01～1500mg/m2，优选0.1～250mg/m2。基于注射的给药，通过静脉、动脉、患部(肿瘤部)等进行。
实施例
以下，通过实施例对本发明进行详细说明。但是，本发明并不局限于这些实施例。
本发明的实施例中使用以下缩略符号。
ox：乙二酸酯
r,r-dach：(1r,2r)-环己烷二胺
1-ohp：奥沙利铂
本实施例中的化合物的药剂含量通过使用电感耦合等离子体发光分光分析装置icp-oes(安捷伦科技有限公司：720-es型)对铂含量进行定量，根据该铂含量通过计算求出。
本实施例中的化合物的粒径及ζ电位通过使用粒径和ζ电位测定装置(马尔文仪器有限公司：zetasizernanozs)来实施。
本参考例中的低分子化合物的纯度测定使用高效液相色谱仪，使用l-column2ods(4.6mmi.d.x250mm：从一般财团法人化学物质评价研究机构购入)作为柱，使用将2.72g磷酸二氢钾、1.89g的1-戊烷磺酸钠和0.5ml的三乙胺溶解于2000ml蒸馏水中并用磷酸调节至ph4.3而得的缓冲液作为移动相(a)，使用甲醇作为移动相(b)，在下述的分析条件1或2下实施。
分析条件1(等度分析)：
移动相(b)浓度：15％(0分钟)-15％(20分钟)，
移动相流速1ml/分钟，检测210nm。
分析条件2(梯度分析)：
移动相(b)浓度：15％(0分钟)-90％(10分钟)，
移动相流速1ml/分钟，检测210nm。
本参考例中的低分子化合物的分子量通过使用lc/ms(岛津lcms-2020)，使用inertsilods-3(2.1mmi.d.x100mm)作为柱，使用乙腈/甲酸(99.9/0.1)作为移动相(a)，使用水/甲酸(99.9/0.1)作为移动相(b)，在下述的分析条件3或4下进行测定。
分析条件3
分析条件4
参考例1反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]：通式(xii)的y为氯原子的6配位铂络合物的合成
将n-氯代丁二酰亚胺(66.8mg)溶解在14ml蒸馏水中，加入将l-ohp(200mg)悬浮于6ml蒸馏水中而得的溶液，在遮光下、在室温下搅拌4小时。反应结束后，过滤分离反应液中的不溶物质，通过对滤液进行减压浓缩来获得固体。通过将获得的固体在乙醇/水中重结晶而获得标题化合物(114mg)。1h-nmr(d2o)：δ2.89-2.72(2h、m)、2.15(2h、d、j＝12.2hz)、1.53-1.41(4h、m)、0.97-0.90(2h、m)、ms(esi)：450(m+1)、451(m+2)、纯度(hplc，分析条件2)：99.4％。
实施例1实施例1化合物(由分子量12000的甲氧基聚乙二醇部分和聚合度约为43的聚天冬氨酸部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]及苯基丙氨酸苄基酯的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基或从苯基丙氨酸苄基酯(t＝氢原子)的氨基除去h后的残基，d+e+f+g+h+i+j＝43，a＝273)的制造
将通过日本专利第3268913号公报中记载的方法制造的甲氧基聚乙二醇-聚天冬氨酸嵌段共聚物(天冬氨酸的聚合度约为43；1.98g)及由参考例1得到的6配位铂络合物(899mg)在35℃下溶解在二甲基甲酰胺(70ml)中之后，添加了二甲基氨基吡啶(61mg)。使反应液变为25℃后，添加二异丙基碳二亚胺(0.38ml)，经过4小时后，添加苯基丙氨酸苄基酯盐酸盐(875mg)、二异丙基乙基胺(0.52ml)及二异丙基碳二亚胺(0.38ml)，再搅拌18.5小时。反应结束后，将反应液慢慢地添加到乙酸乙酯(70ml)、乙醇(70ml)和二异丙醚(700ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。将所得的沉淀物进一步用乙醇/二异丙醚(1/4(v/v)；100ml)清洗，过滤回收粗产物(3.1g)。将所得的粗产物(1.4g)溶解在冷水(28ml)中之后，使其通过离子交换树脂(陶氏化学公司制的dowex50(h+)；14ml)的塔，用冷水(40ml)将其溶出。通过对所得的溶出部分进行冷冻干燥，得到了标题化合物(1.04g)。得到的标题化合物的药物含量为21.5％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到1mg/ml，测定了粒径，结果为33nm，形成了胶束。
实施例2实施例2化合物(由分子量12000的甲氧基聚乙二醇部分和聚合度约为43的聚天冬氨酸部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基，d+e+f+g+h+i+j＝43，a＝273)的制造
将通过日本专利第3268913号公报中记载的方法制造的甲氧基聚乙二醇-聚天冬氨酸嵌段共聚物(天冬氨酸的聚合度约为43；0.93g)及由参考例1得到的6配位铂络合物(633mg)在35℃下溶解在二甲基甲酰胺(40ml)中之后，添加了二甲基氨基吡啶(29mg)。使反应液变为25℃之后，添加二异丙基碳二亚胺(0.43ml)，搅拌了5.5小时。反应结束后，将反应液慢慢地添加到乙酸乙酯(40ml)、乙醇(40ml)和二异丙醚(400ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。将所得的沉淀物进一步用乙醇/二异丙醚(1/4(v/v)；40ml)清洗，过滤回收粗产物(1.5g)。将所得的粗产物(1.45g)溶解在冷水(29ml)中之后，使其通过离子交换树脂(陶氏化学公司制的dowex50(h+)；14.5ml)的塔，用冷水(40ml)将其溶出。通过对所得的溶出部分进行冷冻干燥，得到了标题化合物(1.25g)。得到的标题化合物的药物含量为31.1％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到1mg/ml，测定了粒径，结果是散射强度弱，暗示没有形成胶束。
实施例3实施例3化合物(由分子量12000的甲氧基聚乙二醇部分和聚合度约为22的聚谷氨酸部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]及苯基丙氨酸苄基酯的偶联物：通式(vi)的r11＝me(甲基)，r19＝亚丙基，r20＝ac(乙酰基)，r21＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基，r22＝异丙基氨基羰基异丙基氨基或从苯基丙氨酸苄基酯(t＝氢原子)的氨基除去h后的残基，k+m+n＝22，b＝273)的制造
使用通过日本专利第4745664号公报中记载的方法制造的由分子量12000的甲氧基聚乙二醇部分和聚合度约为22的聚谷氨酸部分构成的嵌段共聚物(1.18g)、苯基丙氨酸苄基酯盐酸盐(0.31g)、由参考例1得到的6配位铂络合物(0.32g)、二异丙基乙基胺(0.18ml)、二甲基氨基吡啶(21mg)及二异丙基碳二亚胺(0.27ml)，通过与实施例1同样的方法，得到了标题化合物。得到的标题化合物的药物含量为9.9％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到1mg/ml，测定了粒径，结果为17nm，形成了胶束。
实施例4实施例4化合物(由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和聚合度约为11的聚天冬氨酸部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]及苯基丙氨酸苄基酯的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基或从苯基丙氨酸苄基酯(t＝氢原子)的氨基除去h后的残基，d+e+f+g+h+i+j＝11，a＝46)的制造
使用通过专利第3268913号公报中记载的方法制造的由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和聚合度约为11的聚天冬氨酸部分构成的嵌段共聚物(0.61g)、由参考例1得到的6配位铂络合物(0.38g)、苯基丙氨酸苄基酯盐酸盐(0.35g)、二异丙基乙基胺(0.21ml)、二甲基氨基吡啶(24mg)及二异丙基碳二亚胺(0.29ml)，通过与实施例1同样的方法，得到了标题化合物。得到的标题化合物的药物含量为14.8％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到1mg/ml，测定了粒径，结果为小于10nm，形成了胶束。
实施例5实施例5化合物(由分子量40000的甲氧基聚乙二醇部分和聚合度约为41的聚天冬氨酸部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]及苯基丙氨酸苄基酯的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基或从苯基丙氨酸苄基酯(t＝氢原子)的氨基除去h后的残基，d+e+f+g+h+i+j＝41，a＝909)的制造
使用通过专利第3268913号公报中记载的方法制造的由分子量40000的甲氧基聚乙二醇部分和聚合度约为41的聚天冬氨酸部分构成的嵌段共聚物(1.00g)、由参考例1得到的6配位铂络合物(0.17g)、苯基丙氨酸苄基酯盐酸盐(0.19g)、二异丙基乙基胺(0.12ml)、二甲基氨基吡啶(11mg)及二异丙基碳二亚胺(0.15ml)，通过与实施例1同样的方法，得到了标题化合物。得到的标题化合物的药物含量为7.0％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到1mg/ml，测定了粒径，结果为80nm，形成了胶束。
参考例2由分子量12000的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为43的聚天冬氨酸侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物
使通过日本专利第3268913号公报中记载的方法制造的甲氧基聚乙二醇-聚天冬氨酸嵌段共聚物(天冬氨酸的聚合度约为43；3.03g)在35℃下溶解于二甲基甲酰胺(25ml)中，添加了苯基丙氨酸苄基酯盐酸盐(2.33g)、二异丙基乙基胺(1.42ml)、二甲基氨基吡啶(93mg)及二甲基甲酰胺(5ml)。将液温冷却至25℃后，添加二异丙基碳二亚胺(2.34ml)，在同一温度下搅拌18小时后，升温至30℃，搅拌5小时，接着再添加二异丙基碳二亚胺(0.23ml)，搅拌2小时。反应结束后，慢慢添加到乙醇(60ml)和二异丙醚(240ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。过滤回收得到的沉淀物，进行减压干燥，得到了粗产物(4.6g)。将得到的粗产物(4.6g)溶解在乙腈(60ml)和水(20ml)的混合液中，使其通过离子交换树脂(陶氏化学公司制的dowex50(h+)；40ml)的塔，用20％乙腈水溶液(110ml)将其溶出。通过对得到的溶出部分进行减压浓缩，除去乙腈，通过冷冻干燥，得到标题化合物的苄基保护体(4.52g)。使得到的苄基保护体(3.14g)在35℃下溶解于二甲基甲酰胺(63ml)中，添加含水的pd/c(10％)(688mg)，在氢气氛下、于33℃搅拌了22小时。反应结束后，用金属清除剂(siliametstaacoh)进行处理，使用硅藻土进行过滤，将滤液慢慢地滴入庚烷(570ml)和乙酸乙酯(114ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。再重复进行2次在得到的沉淀物中添加庚烷和乙酸乙酯的混合液后除去上清液的步骤，过滤回收沉淀物，通过减压干燥得到了标题化合物(1.8g)。
实施例6实施例6化合物(由分子量12000的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为43的聚天冬氨酸侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝通式(ii)的(i)的结构(w＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基或异丙基氨基羰基异丙基氨基，t＝氢原子)，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基，d+e+f+g+h+i+j＝43，a＝273)的制造
将由参考例2制造的由甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为43的聚天冬氨酸的侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物(0.6g)及由参考例1得到的6配位铂络合物(460mg)在35℃下溶解于二甲基甲酰胺(30ml)中之后，添加了二甲基氨基吡啶(12mg)。使反应液变为30℃后，添加二异丙基碳二亚胺(0.31ml)，在经过21小时后，进一步添加二异丙基碳二亚胺(0.31ml)。3小时后，将溶液的温度升温至35℃，搅拌2小时。反应结束后，慢慢将反应液添加到乙醇(43ml)和二异丙醚(257ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。在所得的沉淀物中再添加乙醇/二异丙醚(1/6(v/v)；150ml)，过滤回收粗产物(807mg)。将得到的粗产物(785mg)溶解在冷水(80ml)中之后，使用vivaspin20(mwco：3kda)(赛多利斯公司(ザウトリウス社))进行离心超滤，除去了低分子化合物。通过将纯化后的溶液冷冻干燥，得到了标题化合物(424mg)。得到的标题化合物的药物含量为14.1％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到1mg/ml，测定了粒径，结果为68nm，形成了胶束。
实施例7实施例7化合物(由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和聚合度约为10的聚谷氨酸部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]及苯基丙氨酸苄基酯的偶联物：通式(vi)的r11＝me(甲基)，r19＝亚丙基，r20＝ac(乙酰基)，r21＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基，r22＝异丙基氨基羰基异丙基氨基或从苯基丙氨酸苄基酯(t＝氢原子)的氨基除去h后的残基，k+m+n＝10，b＝46)的制造
将通过日本专利第4745664号公报中记载的方法制造的由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和聚合度约为10的聚谷氨酸部分构成的嵌段共聚物(谷氨酸的聚合度约为10；750mg)在35℃下溶解于二甲基甲酰胺(29ml)中之后，添加了由参考例1得到的6配位铂络合物(400mg)和二甲基氨基吡啶(27.6mg)。使反应液变为25℃后，添加二异丙基碳二亚胺(0.17ml)，经过5小时后，添加苯基丙氨酸苄基酯盐酸盐(390mg)、二异丙基乙基胺(0.38ml)及二异丙基碳二亚胺(0.34ml)，再搅拌17.5小时。然后，添加异丙基碳二亚胺(0.17ml)，再搅拌5小时。反应结束后，慢慢将反应液添加到乙酸乙酯(31ml)和二异丙醚(589ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。然后，添加乙酸乙酯(31ml)和二异丙醚(589ml)的混合液，在搅拌一整夜后，除去上清液，在减压干燥后，得到了粗产物(1.52g)。将得到的粗产物溶解于冷水(72ml)后，使用vivaspinturbo15(mwco：10kda)(赛多利斯公司)进行了纯化。通过对得到的溶液进行冷冻干燥，得到了标题化合物(994mg)。得到的标题化合物的药物含量为14.5％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到5mg/ml，测定了粒径，结果为9.9nm，形成了胶束。
实施例8实施例8化合物(由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和聚合度约为8的聚谷氨酸部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]及苯基丙氨酸苄基酯的偶联物：通式(vi)的r11＝me(甲基)，r19＝亚丙基，r20＝ac(乙酰基)，r21＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基，r22＝异丙基氨基羰基异丙基氨基或从苯基丙氨酸苄基酯(t＝氢原子)的氨基除去h后的残基，k+m+n＝8，b＝46)的制造
将通过日本专利第4745664号公报中记载的方法制造的由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和聚合度约为8的聚谷氨酸部分构成的嵌段共聚物(谷氨酸的聚合度约为8；1001mg)在35℃下溶解于二甲基甲酰胺(36ml)中之后，添加了由参考例1得到的6配位铂络合物(461mg)和二甲基氨基吡啶(31.5mg)。使反应液变为25℃后，添加二异丙基碳二亚胺(0.20ml)，经过4.5小时后，添加苯基丙氨酸苄基酯盐酸盐(450mg)、二异丙基乙基胺(0.44ml)及二异丙基碳二亚胺(0.40ml)，再搅拌16小时。然后，添加二异丙基碳二亚胺(0.20ml)，再搅拌4小时。反应结束后，慢慢将反应液添加到乙酸乙酯(38ml)和二异丙醚(722ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。然后，添加乙酸乙酯(38ml)和二异丙醚(722ml)的混合液，在搅拌一整夜后，除去上清液，在减压干燥后，得到了粗产物(1.77g)。将得到的粗产物(1.68g)溶解于冷水(72ml)后，使用vivaspinturbo15(mwco：10kda)(赛多利斯公司)进行了纯化。通过对得到的溶液进行冷冻干燥，得到了标题化合物(1270mg)。得到的标题化合物的药物含量为14.3％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到5mg/ml，测定了粒径，结果为9.6nm，形成了胶束。
参考例3反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)cl2]：通式(xiii)的y是氯原子的6配位铂络合物的合成
将n-氯代丁二酰亚胺(534mg)溶解在50ml的蒸馏水中，加入将根据《药物化学杂志(j.med.chem.)》,52,5474-5484(2009)的记载制备的pt(r,r-dach)cl2(1.52g)悬浮于500ml四氢呋喃的溶液中，在遮光下、在室温下搅拌3小时。反应结束后，过滤分离反应液中的不溶物质，通过对滤液进行减压浓缩来获得固体。通过使制得的固体悬浮于乙醇中，通过再次过滤，得到目标化合物(1.55g)。1h-nmr(dmso-d6)：δ7.53-7.29(2h、m)、6.89-6.78(2h、m)、2.75-2.60(2h、m)、2.10-2.00(2h、m)、1.47(2h、d、j＝8.0hz)、1.10-0.93(2h、m)、ms(esi)：433(m+1)、纯度(hplc，分析条件2)：98.1％。
实施例9实施例9化合物(由分子量12000的甲氧基聚乙二醇部分和聚合度约为43的聚天冬氨酸部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)cl2]及苯基丙氨酸苄基酯的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基或从苯基丙氨酸苄基酯(t＝氢原子)的氨基除去h后的残基，d+e+f+g+h+i+j＝43，a＝273)的制造
将通过日本专利第3268913号公报中记载的方法制造的甲氧基聚乙二醇-聚天冬氨酸嵌段共聚物(天冬氨酸的聚合度约为43；0.577g)及由参考例3得到的6配位铂络合物(251mg)在35℃下溶解在二甲基甲酰胺(20ml)中之后，添加了二甲基氨基吡啶(17.8mg)。使反应液变为25℃后，添加二异丙基碳二亚胺(0.112ml)，经过4.5小时后，添加苯基丙氨酸苄基酯盐酸盐(254.8mg)、二异丙基乙基胺(0.112ml)及二异丙基碳二亚胺(0.152ml)，再搅拌18.5小时。反应结束后，将反应液慢慢地添加到乙酸乙酯(20ml)、乙醇(20ml)和二异丙醚(160ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。将所得的沉淀物进一步用乙醇/二异丙醚(1/4(v/v)；50ml)清洗，过滤回收粗产物(0.791g)。将得到的粗产物(0.7g)溶解在10％乙腈水溶液(30ml)中之后，使用vivaspinturbo15(mwco：10kda)(赛多利斯公司)进行了纯化。通过对所得的溶液进行冷冻干燥，得到了标题化合物(0.68g)。得到的标题化合物的药物含量为6.4％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到1mg/ml，测定了粒径，结果为87nm，形成了胶束。
实施例10实施例10化合物(由分子量12000的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为43的聚天冬氨酸侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)cl2]的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝通式(ii)的(i)的结构(w＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基或异丙基氨基羰基异丙基氨基，t＝氢原子)，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基，d+e+f+g+h+i+j＝43，a＝273)的制造
将由参考例2制造的由甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为43的聚天冬氨酸的侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物(390mg)及由参考例3得到的6配位铂络合物(225mg)在35℃下溶解于二甲基甲酰胺(5ml)中之后，添加了二甲基氨基吡啶(8mg)。使反应液变为30℃后，添加二异丙基碳二亚胺(0.20ml)，在经过23小时后，进一步添加二异丙基碳二亚胺(0.10ml)。1小时后，将溶液的温度升温至35℃，搅拌2小时。反应结束后，将反应液慢慢地添加到乙酸乙酯(6ml)、乙醇(6ml)和二异丙醚(48ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。在所得的沉淀物中再添加乙酸乙酯(1ml)、乙醇(1ml)和二异丙醚(8ml)的混合液，过滤回收粗产物(408mg)。将得到的粗产物(399mg)溶解在10％乙腈水溶液(16ml)中之后，使用vivaspinturbo15(mwco：10kda)(赛多利斯公司)进行离心超滤，除去了低分子化合物。通过将纯化后的溶液冷冻干燥，得到了标题化合物(241mg)。得到的标题化合物的药物含量为8.2％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到1mg/ml，测定了粒径，结果为17nm，形成了胶束。
参考例4由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为12的聚天冬氨酸侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物
将通过日本专利第3268913号公报中记载的方法制造的甲氧基聚乙二醇-聚天冬氨酸嵌段共聚物(天冬氨酸的聚合度约为12；2.04g)在35℃下溶解于二甲基甲酰胺(20ml)中。在将液温冷却至25℃后，添加苯基丙氨酸苄基酯盐酸盐(2.17g：相对于羧基为1.05当量)、二异丙基乙基胺(1.33ml)、二甲基氨基吡啶(86mg)及二异丙基碳二亚胺(2.19ml)，在同一温度下搅拌15小时后，升温至30℃，再添加二异丙基碳二亚胺(0.22ml)，搅拌了2小时。反应结束后，慢慢地添加乙酸乙酯(20ml)和二异丙醚(380ml)的混合液，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，在得到的沉淀物中再添加乙酸乙酯/二异丙醚(19/1(v/v)；400ml)，过滤回收粗产物(5.4g)。将得到的粗产物(5.4g)溶解在乙腈(18ml)和水(12ml)的混合液中，使其通过离子交换树脂(陶氏化学公司制的dowex50(h+)；70ml)的塔，用60％乙腈水溶液(225ml)将其溶出。通过对得到的溶出部分进行减压浓缩，除去乙腈，通过冷冻干燥，得到标题化合物的苄基保护体(3.8g)。使得到的苄基保护体(3.75g)溶解在二甲基甲酰胺(67ml)中，添加含水pd/c(5％)(375mg)，在氢气氛下，在室温下搅拌了20小时。反应结束后，用金属清除剂(siliametstaacoh)进行处理，在使用亲水性聚四氟乙烯制滤器进行过滤后，将滤液慢慢地滴加到二异丙醚(1340ml)中，在室温下进行搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去了上清液。在得到的沉淀物中添加二异丙醚(1005ml)，过滤回收沉淀物，通过减压干燥，得到了标题化合物(2.5g)。
实施例11实施例11化合物(由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为12的聚天冬氨酸侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)cl2]的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝通式(ii)的(i)的结构(w＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基或异丙基氨基羰基异丙基氨基，t＝氢原子)，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基，d+e+f+g+h+i+j＝12，a＝46)的制造
将由参考例4的方法制造的由甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为12的聚天冬氨酸的侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物(0.3g)及由参考例3得到的6配位铂络合物(303mg)在25℃下溶解于二甲基甲酰胺(15ml)中之后，添加二甲基氨基吡啶(17mg)、二异丙基碳二亚胺(0.22ml)，搅拌了15小时。反应结束后，慢慢将反应液添加到乙酸乙酯(15ml)和二异丙醚(135ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。在所得的沉淀物中再添加乙酸乙酯/二异丙醚(1/9(v/v)；150ml)，过滤回收粗产物(550mg)。将得到的粗产物(550mg)溶解在冷水(35ml)中之后，使用vivaspinturbo15(mwco：3kda)(赛多利斯公司)进行离心超滤，除去了低分子化合物。通过将纯化后的溶液冷冻干燥，得到了标题化合物(173mg)。得到的标题化合物的药物含量为19.3％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到1mg/ml，测定了粒径，结果为21nm，形成了胶束。
参考例5由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为12的聚天冬氨酸侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物
使通过日本专利第3268913号公报中记载的方法制造的甲氧基聚乙二醇-聚天冬氨酸嵌段共聚物(天冬氨酸的聚合度约为12；2.05g)在35℃下溶解在二甲基甲酰胺(21ml)中，添加了苯基丙氨酸苄基酯盐酸盐(2.25g：相对于羧基为1.05当量)、二异丙基乙基胺(1.35ml)及二甲基氨基吡啶(90mg)。将液温冷却至25℃后，添加二异丙基碳二亚胺(2.26ml)，在同一温度下搅拌19小时后，升温至30℃，接着再添加二异丙基碳二亚胺(0.23ml)，搅拌了5.5小时。反应结束后，慢慢地将反应液添加到乙醇(20ml)和二异丙醚(380ml)的混合液中，在室温下进行搅拌。除去上清液，进行减压干燥，得到了粗产物(4.6g)。将得到的粗产物(4.6g)溶解在乙腈(18ml)和水(12ml)的混合液中，使其通过离子交换树脂(陶氏化学公司制的dowex50(h+)；69ml)的塔，用60％乙腈水溶液(375ml)将其溶出。通过对得到的溶出部分进行减压浓缩，除去乙腈，通过冷冻干燥，得到标题化合物的苄基保护体(4.5g)。使得到的苄基保护体(4.5g)在35℃下溶解于二甲基甲酰胺(89ml)和乙酸(4.5ml)的混合液中，添加含水的pd/c(10％)(450mg)，在氢气氛下、于30℃搅拌67小时。反应结束后，用金属清除剂(siliametstaacoh)进行处理，使用硅藻土进行过滤，将滤液慢慢地滴加到二异丙醚(1800ml)中，在室温下进行了搅拌，除去上清液。再重复进行2次在得到的沉淀物中添加二异丙醚后除去上清液的步骤，通过减压干燥得到了标题化合物(1.7g)。
实施例12实施例12化合物(由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为12的聚天冬氨酸侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝通式(ii)的(i)的结构(w＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基或异丙基氨基羰基异丙基氨基，t＝氢原子)，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基，d+e+f+g+h+i+j＝12，a＝46)的制造
将由参考例5制造的由甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为12的聚天冬氨酸的侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物(733mg)及由参考例1得到的6配位铂络合物(756mg)在35℃下溶解于二甲基甲酰胺(78ml)中之后，添加了二甲基氨基吡啶(21mg)。使反应液变为30℃之后，添加二异丙基碳二亚胺(0.52ml)，进行了搅拌。在经过20小时后，再添加二异丙基碳二亚胺(0.52ml)，将溶液的温度升至35℃，搅拌了2小时。反应结束后，慢慢将反应液添加到乙酸乙酯(78ml)和二异丙醚(1482ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。在所得的沉淀物中再添加乙酸乙酯/二异丙醚(1/19(v/v)；780ml)，过滤回收粗产物(1.30g)。将得到的粗产物(642mg)溶解在5％乙腈水溶液(36ml)中之后，使用vivaspinturbo15(mwco：10kda)(赛多利斯公司)进行离心超滤，除去了低分子化合物。通过将纯化后的溶液冷冻干燥，得到了标题化合物(389mg)。得到的标题化合物的药物含量为18.1％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到1mg/ml，测定了粒径，结果为10nm，形成了胶束。
实施例13实施例13化合物(由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为12的聚天冬氨酸侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝通式(ii)的(i)的结构(w＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基或异丙基氨基羰基异丙基氨基，t＝氢原子)，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基，d+e+f+g+h+i+j＝12，a＝46)的制造
将参考例4中制造的由甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为12的聚天冬氨酸的侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物(0.9g)在35℃下溶解在二甲基甲酰胺(39ml)中。使反应液变为30℃后，添加由参考例1得到的6配位铂络合物(532mg)、二甲基氨基吡啶(24mg)及二异丙基碳二亚胺(0.61ml)，并进行了搅拌。在经过45小时后，再添加二异丙基碳二亚胺(0.61ml)，将溶液的温度升至35℃，搅拌了3小时。反应结束后，慢慢将反应液添加到乙酸乙酯(39ml)和二异丙醚(351ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。在所得的沉淀物中再添加乙酸乙酯/二异丙醚(1/9(v/v)；390ml)，过滤回收粗产物(1.27g)。将得到的粗产物(1.2g)溶解在5％乙腈水溶液(36ml)中之后，使用vivaspinturbo15(mwco：10kda)(赛多利斯公司)进行离心超滤，除去了低分子化合物。通过将纯化后的溶液冷冻干燥，得到了标题化合物(863mg)。得到的标题化合物的药物含量为14.4％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到5mg/ml，测定了粒径，结果为13nm，形成了胶束。
参考例6由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为7的聚天冬氨酸侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物
使通过日本专利第3268913号公报中记载的方法制造的甲氧基聚乙二醇-聚天冬氨酸嵌段共聚物(天冬氨酸的聚合度约为7；1.0g)在35℃下溶解于二甲基甲酰胺(10ml)中，添加了苯基丙氨酸苄基酯盐酸盐(770mg)、二异丙基乙基胺(0.47ml)及二甲基氨基吡啶(31mg)。将液温冷却至25℃后，添加二异丙基碳二亚胺(0.77ml)，在同一温度下搅拌19小时后，升温至30℃，接着再添加二异丙基碳二亚胺(0.08ml)，搅拌了4小时。反应结束后，慢慢地将反应液添加到乙酸乙酯(10ml)和二异丙醚(190ml)的混合液中，在室温下进行搅拌。除去上清液，添加乙酸乙酯/二异丙醚(1/19(v/v)；100ml)，在室温下进行搅拌后，除去上清液，进行减压干燥，得到了粗产物(2.0g)。将得到的粗产物(2.0g)溶解在乙腈(7.5ml)和水(7.5ml)的混合液中，使其通过离子交换树脂(陶氏化学公司制的dowex50(h+)；30ml)的塔，用50％乙腈水溶液(120ml)将其溶出。通过对得到的溶出部分进行减压浓缩，除去乙腈，通过冷冻干燥，得到标题化合物的苄基保护体(1.56g)。使得到的苄基保护体(1.54g)在35℃下溶解于二甲基甲酰胺(30ml)中，添加含水的pd/c(5％)(159mg)，在氢气氛下，在30℃下搅拌了19小时。然后，用活性炭进行处理，使用滤纸进行过滤，将滤液减压浓缩，除去了溶剂。接着，在30℃下溶解在n-甲基吡咯烷酮中，添加含水的pd/c(5％)(159mg)，在氢气氛下，在30℃下搅拌了14小时。反应结束后，用活性炭进行处理，使用滤纸进行过滤，将滤液慢慢地滴加到二异丙醚(500ml)中，在室温下进行了搅拌。除去上清液，在得到的沉淀物中添加二异丙醚，除去上清液，进行了减压干燥。将得到的残渣溶解在水中，进行冷冻干燥得到了标题化合物(1.0g)。
实施例14实施例14化合物(由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为7的聚天冬氨酸侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝通式(ii)的(i)的结构(w＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基或异丙基氨基羰基异丙基氨基，t＝氢原子)，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基，d+e+f+g+h+i+j＝7，a＝46)的制造
将由参考例6制造的由甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为7的聚天冬氨酸的侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物(838mg)及由参考例1得到的6配位铂络合物(416mg)在35℃下溶解于二甲基甲酰胺(31ml)中之后，添加了二甲基氨基吡啶(19mg)。使反应液变为30℃之后，添加二异丙基碳二亚胺(0.47ml)，进行了搅拌。在经过45小时后，再添加二异丙基碳二亚胺(0.47ml)，将溶液的温度升至35℃，搅拌了3小时。反应结束后，慢慢将反应液添加到乙酸乙酯(31ml)和二异丙醚(585ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。在得到的沉淀物中再添加乙酸乙酯/二异丙醚(1/19(v/v)；308ml)，在室温下进行搅拌后，除去上清液，通过减压干燥得到了粗产物(1.15g)。将得到的粗产物(1.15g)溶解在冷水(36ml)中之后，使用vivaspinturbo15(mwco：10kda)(赛多利斯公司)进行离心超滤，除去了低分子化合物。通过将纯化后的溶液冷冻干燥，得到了标题化合物(774mg)。得到的标题化合物的药物含量为9.3％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到5mg/ml，测定了粒径，结果为8.8nm，形成了胶束。
参考例7由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为16的聚天冬氨酸侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物
使通过日本专利第3268913号公报中记载的方法制造的甲氧基聚乙二醇-聚天冬氨酸嵌段共聚物(天冬氨酸的聚合度约为16；998mg)在35℃下溶解在二甲基甲酰胺(12ml)中，添加了苯基丙氨酸苄基酯盐酸盐(1.27g：相对于羧基为1.05当量)、二异丙基乙基胺(0.77ml)及二甲基氨基吡啶(51mg)。在将液温冷却至25℃之后，添加二异丙基碳二亚胺(1.27ml)，在同一温度下进行了搅拌。经过21小时后，再添加二异丙基碳二亚胺(0.64ml)，搅拌了2小时。反应结束后，慢慢添加到乙酸乙酯(23ml)和二异丙醚(207ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。在得到的沉淀物中再添加乙酸乙酯/二异丙醚(1/19(v/v)；230ml)，将沉淀物过滤回收后，进行减压干燥，得到了粗产物(2.7g)。将得到的粗产物(2.7g)溶解在乙腈(20ml)和水(20ml)的混合液中，在冰冷却下用离子交换树脂(陶氏化学公司制的dowex50(h+)；25ml)处理5小时，将离子交换树脂过滤后，将滤液减压浓缩，除去了乙腈。接着，通过冷冻干燥得到了标题化合物的苄基保护体(1.94g)。使得到的苄基保护体(1.88g)在35℃下溶解在n-甲基吡咯烷酮(34ml)中。在使反应液变为30℃后，添加含水的pd/c(10％)(188mg)，在氢气氛下，在同一温度下搅拌了25小时。反应结束后，用活性炭进行处理，将滤器过滤后的滤液慢慢地滴加到二异丙醚(646ml)中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去了上清液。在得到的沉淀物中添加乙酸乙酯和二异丙醚的混合液，将沉淀物溶解在水中，通过冷冻干燥得到了标题化合物(1.5g)。
实施例15实施例15化合物(由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为16的聚天冬氨酸侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝通式(ii)的(i)的结构(w＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基或异丙基氨基羰基异丙基氨基，t＝氢原子)，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基，d+e+f+g+h+i+j＝16，a＝46)的制造
将参考例7中制造的由甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为16的聚天冬氨酸的侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物(0.8g)在35℃下溶解在二甲基甲酰胺(40ml)中。使反应液变为30℃后，添加由参考例1得到的6配位铂络合物(532mg)、二甲基氨基吡啶(24mg)及二异丙基碳二亚胺(0.61ml)，并进行了搅拌。在经过45小时后，再添加二异丙基碳二亚胺(0.61ml)，将溶液的温度升至35℃，搅拌了3小时。反应结束后，慢慢将反应液添加到乙酸乙酯(40ml)和二异丙醚(360ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。在所得的沉淀物中再添加乙酸乙酯/二异丙醚(1/9(v/v)；400ml)，过滤回收粗产物(1.2g)。将得到的粗产物(1.1g)溶解在5％乙腈水溶液(60ml)中之后，使用vivaspinturbo15(mwco：10kda)(赛多利斯公司)进行离心超滤，除去了低分子化合物。通过将纯化后的溶液冷冻干燥，得到了标题化合物(719mg)。得到的标题化合物的药物含量为13.3％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到5mg/ml，测定了粒径，结果为32nm，形成了胶束。
参考例8由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为12的聚天冬氨酸侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物
使通过日本专利第3268913号公报中记载的方法制造的甲氧基聚乙二醇-聚天冬氨酸嵌段共聚物(天冬氨酸的聚合度约为12；1.54g)在35℃下溶解在二甲基甲酰胺(97ml)中，添加了苯基丙氨酸苄基酯盐酸盐(1.04g：相对于羧基为0.66当量)、二异丙基乙基胺(0.70ml)、二甲基氨基吡啶(66mg)及二甲基甲酰胺(11ml)。将液温冷却至25℃后，添加二异丙基碳二亚胺(1.67ml)，在同一温度下搅拌22小时后，添加二异丙基碳二亚胺(0.23ml)，升温至35℃，搅拌了3小时。反应结束后，慢慢地添加到乙酸乙酯(87ml)和二异丙醚(1.65l)的混合液中，在室温下搅拌后，再添加二异丙醚(200ml)，然后进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。再重复进行2次在得到的沉淀物中添加乙酸乙酯/二异丙醚(1/19(v/v)；1.08l)后除去上清液的步骤，将沉淀物过滤回收后，进行减压干燥，得到了粗产物(2.5g)。将得到的粗产物(2.5g)溶解在乙腈(50ml)和水(50ml)的混合液中，添加离子交换树脂(陶氏化学公司制的dowex50(h+)；78ml)，搅拌1小时，通过减压过滤除去离子交换树脂后，用50％乙腈水溶液(30ml)进行了清洗。通过对滤液进行减压浓缩，除去乙腈，接着通过冷冻干燥得到了标题化合物的苄基保护体(2.23g)。使得到的苄基保护体(2.19g)在35℃下溶解在二甲基甲酰胺(44ml)中，添加含水的pd/c(5％)(219mg)，在氢气氛下，在30℃下搅拌了25小时。反应结束后，用活性炭进行处理，使用硅藻土进行过滤，将滤液慢慢地滴入乙酸乙酯(44ml)和二异丙醚(836ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。再重复进行2次在得到的沉淀物中添加乙酸乙酯/二异丙醚(1/19(v/v)；440ml)后除去上清液的步骤，过滤回收沉淀物，通过减压干燥得到了标题化合物(1.27g)。
实施例16实施例16化合物(由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为12的聚天冬氨酸侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝通式(ii)的(i)的结构(w＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基或异丙基氨基羰基异丙基氨基，t＝氢原子)，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基及从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基，d+e+f+g+h+i+j＝12，a＝46)的制造
将由参考例8制造的由甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为12的聚天冬氨酸的侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物(1.27g)在35℃下溶解于二甲基甲酰胺(29ml)中之后，添加了二甲基氨基吡啶(27mg)、由参考例1得到的6配位铂络合物(986mg)及二甲基甲酰胺(44ml)。使反应液变为30℃后，添加二异丙基碳二亚胺(0.68ml)，在经过22小时后，进一步添加二异丙基碳二亚胺(0.68ml)，将溶液的温度升至35℃，搅拌了3小时。反应结束后，慢慢地将反应液添加到乙酸乙酯(73ml)和二异丙醚(1.39l)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。再重复进行2次在得到的沉淀物中添加乙酸乙酯/二异丙醚(1/19(v/v)；731ml)后除去上清液的步骤，过滤回收粗产物(2.23g)。将得到的粗产物(2.20g)溶解在冷水(80ml)中之后，使用vivaspin20(mwco：10kda)(赛多利斯公司)进行离心超滤，除去了低分子化合物。通过将纯化后的溶液冷冻干燥，得到了标题化合物(893mg)。得到的标题化合物的药物含量为13.2％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到5mg/ml，测定了粒径，结果为10nm，形成了胶束。
参考例9由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为16的聚天冬氨酸侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物
使通过日本专利第3268913号公报中记载的方法制造的甲氧基聚乙二醇-聚天冬氨酸嵌段共聚物(天冬氨酸的聚合度约为16；1.18g)在35℃下溶解于二甲基甲酰胺(24ml)中，添加了苯基丙氨酸苄基酯盐酸盐(942mg：相对于羧基为0.66当量)。在将液温冷却至25℃之后，添加二异丙基乙基胺(0.64ml)、二甲基氨基吡啶(60mg)及二异丙基碳二亚胺(1.51ml)，在同一温度下进行了搅拌。在经过21小时后，再添加二异丙基碳二亚胺(0.61ml)，将溶液的温度升至35℃，搅拌了4小时。反应结束后，慢慢添加到乙酸乙酯(12ml)和二异丙醚(228ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。过滤回收得到的沉淀物，进行减压干燥，得到了粗产物(2.9g)。将得到的粗产物(2.9g)溶解在乙腈(9ml)和水(6ml)的混合液中，使其通过离子交换树脂(陶氏化学公司制的dowex50(h+)；40ml)的塔，用20％乙腈水溶液(120ml)将其溶出。通过对得到的溶出部分进行减压浓缩，除去乙腈，接着通过冷冻干燥得到标题化合物的苄基保护体(2.09g)。使得到的苄基保护体(2.0g)在30℃下溶解在二甲基甲酰胺(36ml)中，添加含水pd/c(5％)(300mg)，在氢气氛下，在同一温度下搅拌了24小时。反应结束后，用活性炭进行处理，将滤器过滤后的滤液慢慢地滴加到乙酸乙酯(36ml)和二异丙醚(684ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。在得到的沉淀物中添加乙酸乙酯和二异丙醚的混合液，过滤回收沉淀物，通过减压干燥得到了标题化合物(1.5g)。
实施例17实施例17化合物(由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为16的聚天冬氨酸侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝通式(ii)的(i)的结构(w＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基或异丙基氨基羰基异丙基氨基，t＝氢原子)，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基及从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基，d+e+f+g+h+i+j＝16，a＝46)的制造
将参考例9中制造的由甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为16的聚天冬氨酸的侧链上结合有苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物(0.9g)在35℃下溶解在二甲基甲酰胺(34ml)中。使反应液变为30℃后，添加由参考例1得到的6配位铂络合物(765mg)、二甲基氨基吡啶(21mg)及二异丙基碳二亚胺(0.53ml)，并进行了搅拌。在经过45小时后，再添加二异丙基碳二亚胺(0.61ml)，将溶液的温度升至35℃，搅拌了3小时。反应结束后，慢慢将反应液添加到乙酸乙酯(34ml)和二异丙醚(306ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。在所得的沉淀物中再添加乙酸乙酯/二异丙醚(1/9(v/v)；390ml)，过滤回收粗产物(1.61g)。将得到的粗产物(1.5g)溶解在5％乙腈水溶液(60ml)中之后，使用vivaspinturbo15(mwco：10kda)(赛多利斯公司)进行离心超滤，除去了低分子化合物。通过将纯化后的溶液冷冻干燥，得到了标题化合物(882mg)。得到的标题化合物的药物含量为15.2％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到5mg/ml，测定了粒径，结果为11nm，形成了胶束。
实施例18实施例18化合物(由分子量12000的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为43的聚天冬氨酸侧链上结合有天冬氨酸-丙氨酸(4-苯基-1-丁醇)酯的结构的部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝通式(ii)的(vii)的结构(w＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基或异丙基氨基羰基异丙基氨基，t＝氢原子，r8＝从丙氨酸(4-苯基-1-丁醇)酯的氨基除去h后的残基)，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基，d+e+f+g+h+i+j＝43，a＝273)的制造
将由国际公开2010/131675公报中记载的方法制造的甲氧基聚乙二醇部分和在聚合度约为43的聚天冬氨酸的侧链上结合有丙氨酸(4-苯基-1-丁醇)酯的结构的部分构成的嵌段共聚物(364mg)及由参考例1得到的6配位铂络合物(135mg)在35℃下溶解在二甲基甲酰胺(10ml)中之后，添加了二甲基氨基吡啶(6mg)。使反应液变为25℃后，添加二异丙基碳二亚胺(0.07ml)，在经过22小时后，进一步添加二异丙基碳二亚胺(0.07ml)，搅拌了4小时。反应结束后，将反应液慢慢地添加到乙醇(20ml)、乙酸乙酯(20ml)和二异丙醚(160ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。在所得的沉淀物中再添加乙醇/乙酸乙酯/二异丙醚(1/1/8(v/v/v)；100ml)，过滤回收粗产物(441mg)。将得到的粗产物(420mg)溶解在30％乙腈水溶液(30ml)中之后，使用spectra/por6(mwco：3.5kda)(仕必纯公司(スペクトラム社))进行透析，除去了低分子化合物。通过将纯化后的溶液冷冻干燥，得到了标题化合物(399mg)。得到的标题化合物的药剂含量为21.9％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到1mg/ml，测定了粒径，结果为75nm，形成了胶束。
实施例19实施例19化合物(由分子量12000的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为43的聚天冬氨酸侧链上结合有天冬氨酸-甘氨酸乙酯的结构的部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]及苯基丙氨酸苄基酯的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝通式(ii)的(vii)的结构(w＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基或从苯基丙氨酸苄基酯(t＝氢原子)的氨基除去h后的残基或异丙基氨基羰基异丙基氨基，t＝氢原子，r8＝从甘氨酸乙酯的氨基除去h后的残基)，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基或从苯基丙氨酸苄基酯(t＝氢原子)的氨基除去h后的残基，d+e+f+g+h+i+j＝43，a＝273)的制造
将由根据国际公开2010/131675公报中记载的方法制造的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为43的聚天冬氨酸的侧链上结合有天冬氨酸-甘氨酸乙酯的结构的部分构成的嵌段共聚物(510mg)在35℃下溶解在二甲基甲酰胺(4.8ml)中之后，添加了由参考例1得到的6配位铂络合物(158mg)及二甲基氨基吡啶(11mg)、二甲基甲酰胺(4.0ml)。使反应液变为25℃后，添加二异丙基碳二亚胺(0.067ml)，经过4小时后，添加苯基丙氨酸苄基酯盐酸盐(153mg)、二异丙基乙基胺(0.089ml)及二异丙基碳二亚胺(0.067ml)，再搅拌20小时。反应结束后，慢慢将反应液添加到乙醇(13ml)和二异丙醚(75ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。在所得的沉淀物中再添加乙醇/二异丙醚(1/6(v/v)；88ml)，过滤回收粗产物(643mg)。将得到的粗产物(501mg)溶解在冷水(50ml)中之后，使用spectra/por6(mwco：3.5kda)(仕必纯公司)进行透析，除去了低分子化合物。通过将纯化后的溶液冷冻干燥，得到了标题化合物(440mg)。得到的标题化合物的药剂含量为18.1％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到1mg/ml，测定了粒径，结果为33nm，形成了胶束。
实施例20实施例20化合物(由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和聚合度约为7的聚天冬氨酸部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]及苯基丙氨酸苄基酯的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基或从苯基丙氨酸苄基酯(t＝氢原子)的氨基除去h后的残基，d+e+f+g+h+i+j＝7，a＝46)的制造
将通过日本专利第3268913号公报中记载的方法制造的由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和聚合度约为7的聚天冬氨酸部分构成的嵌段共聚物(天冬氨酸的聚合度约为7；50mg)及由参考例1得到的6配位铂络合物(22.5mg)在35℃下溶解在二甲基甲酰胺(2.15ml)中之后，添加了二甲基氨基吡啶(1.53mg)。使反应液变为25℃后，添加二异丙基碳二亚胺(0.009ml)，经过5小时后，添加苯基丙氨酸苄基酯盐酸盐(22mg)、二异丙基乙基胺(0.013ml)及二异丙基碳二亚胺(0.009ml)，再搅拌21小时。反应结束后，慢慢将反应液添加到乙酸乙酯(4.3ml)和二异丙醚(48.7ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。将所得的沉淀物再用乙酸乙酯/二异丙醚(1/9(v/v)；20ml)进行清洗，除去了上清液。将得到的粗产物(79mg)溶解在冷水(12ml)中之后，使用vivaspin6(mwco：3kda)(赛多利斯公司)进行离心超滤，除去了低分子化合物。通过将纯化后的溶液冷冻干燥，得到了标题化合物(48.8mg)。得到的标题化合物的药剂含量为12.1％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到5mg/ml，测定了粒径，结果为10.4nm，形成了胶束。
参考例10反,顺,顺-[pt(oh)(oac)(r,r-dach)(ox)]的合成
在将l-ohp(200mg)悬浮于9ml乙酸的溶液中，添加0.135ml的30％过氧化氢水，在遮光下、在室温下搅拌了19小时。反应结束后，一边加水一边进行多次减压浓缩，获得固体。通过将得到的固体在乙醇/甲醇中进行重结晶，得到了目标化合物(55mg)。1h-nmr(d2o)：δ2.78-2.73(2h、m)、2.17(2h、d、j＝9.2hz)、1.94(3h、s)、1.54-1.44(4h、m)、1.20-1.05(2h、m)、纯度(hplc，分析条件1)：94.0％。
参考例11反,顺,顺-[pt(ococh(ch2ph)n(ch3)-boc)(cl)(r,r-dach)(ox)]的合成
使由参考例1得到的6配位铂络合物(300mg)、n-α-boc-n-α-甲基-苯基丙氨酸(223.6mg，渡边化学工业株式会社(渡辺化学工業(株)))及hobt·h2o(10.2mg)悬浮于二甲基甲酰胺(3ml)中，在冷却至0℃后，添加二异丙基碳二亚胺(0.155ml)，搅拌了1小时。然后，恢复至室温，再使其反应6小时。反应结束后，添加乙酸乙酯及水，进行分液，使用水、碳酸氢钠水溶液对有机层进行清洗，添加硫酸钠进行了干燥。将硫酸钠过滤除去，对滤液进行了减压浓缩。在得到的残渣中添加乙醚，使固体析出，通过过滤回收固体，得到了标题化合物(178mg)。lc/ms(分析条件3)；保持时间5.5分钟，m/z711(m+1)。
参考例12反,顺,顺-[pt(ococh(ch2ph)nh(ch3))(cl)(r,r-dach)(ox)]三氟乙酸盐的合成
将由参考例11得到的6配位铂络合物(96mg)溶解在二氯甲烷(3ml)中，冷却至0℃后，添加了三氟乙酸(1ml)。在同一温度下搅拌15分钟，然后将溶剂减压除去。在得到的残渣中添加乙醚，使固体析出，通过过滤回收固体，得到了标题化合物(76mg)。lc/ms(分析条件4)；保持时间4.1分钟，m/z611(m+1)。
实施例21实施例21化合物(由分子量2000的甲氧基聚乙二醇部分和具有在聚合度约为12的聚天冬氨酸侧链上结合有n-甲基苯基丙氨酸的结构的部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝通式(ii)的(i)的结构(w＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基或异丙基氨基羰基异丙基氨基，t＝甲基)，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基，d+e+f+g+h+i+j＝12，a＝46)的制造
使用通过日本专利第3268913号公报中记载的方法制造的分子量2000的甲氧基聚乙二醇-聚天冬氨酸嵌段部分共聚合物(天冬氨酸的聚合度约为12；22mg)、由参考例12得到的6配位铂络合物(23mg)、hobt·h2o(2.4mg)、二异丙基乙基胺(0.016ml)、二甲基甲酰胺(0.5ml)及二异丙基碳二亚胺(0.048ml)，通过与实施例12同样的操作得到了标题化合物。得到的标题化合物的药剂含量为19.0％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到1mg/ml，测定了粒径，结果为10.5nm，形成了胶束。
比较例1比较例1化合物(由分子量12000的甲氧基聚乙二醇部分和聚合度约为43的聚天冬氨酸部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[pt(oh)(oac)(r,r-dach)(ox)]及苯基丙氨酸苄基酯的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基或从苯基丙氨酸苄基酯(t＝氢原子)的氨基除去h后的残基，d+e+f+g+h+i+j＝43，a＝273)的制造
使用由参考例10制造的在轴位具有乙酰氧基和羟基的6配位铂络合物即反,顺,顺-[pt(oh)(oac)(r,r-dach)(ox)]，来代替实施例1的反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]，通过与实施例1同样的方法得到了标题化合物。得到的标题化合物的药剂含量为20.2％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到1mg/ml，测定了粒径，结果为15nm，形成了胶束。
参考例13反,顺,顺-[pt(oh)2(r,r-dach)(ox)]的合成
在将l-ohp(900mg)悬浮于12ml蒸馏水的溶液中，添加2.58ml的30％过氧化氢水，在遮光下，在室温下搅拌了20.5小时。反应结束后，一边加水一边进行多次减压浓缩，获得固体。通过使获得的固体在蒸馏水中进行重结晶，获得目标化合物(422mg)。1h-nmr(d2o)：δ2.74-2.72(2h、m)、2.17(2h、d、j＝12.8hz)、1.54-1.45(4h、m)、1.18-1.12(2h、m)、纯度(hplc，分析条件1)：＞98.0％。
比较例2比较例2化合物(由分子量12000的甲氧基聚乙二醇部分和聚合度约为43的聚天冬氨酸部分构成的嵌段共聚物与反,顺,顺-[pt(oh)2(r,r-dach)(ox)]及苯基丙氨酸苄基酯的偶联物：通式(i)的r1＝me(甲基)，r2＝亚丙基，r3＝ac(乙酰基)，r4＝从6配位铂络合物的羟基除去h后的残基，r5＝异丙基氨基羰基异丙基氨基或从苯基丙氨酸苄基酯(t＝氢原子)的氨基除去h后的残基，d+e+f+g+h+i+j＝43，a＝273)的制造
使用由参考例13制造的轴位的配体均为羟基的6配位铂络合物即反,顺,顺-[pt(oh)2(r,r-dach)(ox)]，来代替实施例1的反,顺,顺-[ptcl(oh)(r,r-dach)(ox)]，通过与实施例1同样的方法得到了标题化合物。得到的标题化合物的药剂含量为12.5％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到1mg/ml，测定了粒径，结果为44nm，形成了胶束。
比较例3比较例3化合物(在由分子量12000的甲氧基聚乙二醇部分和聚合度约为37的聚谷氨酸部分构成的嵌段共聚物上配位结合有4配位铂络合物即dach-platin(pt(r,r-dach)cl2)的高分子偶联物)的制造
将通过日本专利第4745664号公报中记载的方法制造的由分子量12000的甲氧基聚乙二醇部分和聚合度约为37的聚谷氨酸部分构成的嵌段共聚物(0.7g)及苯基丙氨酸苄基酯盐酸盐(243mg)在35℃下溶解于二甲基甲酰胺(18ml)中之后，依次添加4-(4,6-二甲氧基-1,3,5-三嗪-2-基)-4-甲基吗啉鎓氯化物(260mg)及二异丙基乙基胺(0.15ml)，在同一温度下搅拌了17小时。反应结束后，慢慢地将反应液添加到乙醇(36ml)和二异丙醚(144ml)的混合液中，在室温下搅拌后，进行静置直到目标化合物沉淀，除去上清液。过滤回收得到的沉淀物，进行减压干燥，得到了作为载体的高分子的粗产物(0.8g)。将得到的粗产物(0.8g)溶解在50％乙腈水溶液(25ml)中之后，使其通过离子交换树脂(陶氏化学公司制的dowex(h+)；35ml)的塔，用50％乙腈水溶液(17ml)和50％异丙醇水溶液将其溶出。将得到的溶出部分进行减压浓缩，在除去有机溶剂后，通过冷冻干燥得到了高分子载体(0.6g)。将得到的高分子载体(0.5g)溶解在50％异丙醇水溶液(22ml)中，接着添加0.56当量的氢氧化钠水溶液(0.9ml)，在40℃下搅拌了1.5小时。然后，添加通过日本专利特开平1-313488号公报中记载的方法由k2ptcl4制备的[pt(r,r-dach)(oh2)2](no3)2的水溶液(10.75mm；24ml)，搅拌了19.5小时。在反应结束后，使用透析膜(mwco＝14kda)除去低分子成分后，添加麦芽糖(2.0g)，进行了冷冻干燥。得到的标题化合物的药剂含量为2.9％(质量分率)。此外，将标题化合物用水溶解以使浓度达到1mg/ml，测定了粒径，结果为44nm，形成了胶束。
试验例1实施例1化合物、比较例1化合物及比较例2化合物的还原条件下的铂络合物释放性试验
将实施例1化合物、比较例1化合物、比较例2化合物以化合物浓度达到1mg/ml的条件溶解在以600μm的浓度含有抗坏血酸的10mm磷酸缓冲液中，在遮光下，在37℃下进行振荡，经时地采取溶液，使用vivaspin500(mwco：5kda)(赛多利斯公司)进行离心超滤，对滤液中的铂含量进行定量，对铂络合物从高分子偶联物中释放的释放性进行了试验。为了进行比较，也对将实施例1化合物溶解于未添加抗坏血酸的10mm磷酸缓冲液时的释放性进行了试验。另外，使用icp-oes对滤液中的铂含量进行定量，以初始溶液的铂含量作为100％，在表1中示出释放铂量的比例。
[表1]
实施例1化合物在添加抗坏血酸的还原性条件下，在试验开始2小时后，确认结合于高分子的76.4％的铂络合物释放出来。另一方面，在比较例1化合物及比较例2化合物中，在试验开始6小时后，几乎没有确认到结合于高分子的铂络合物释放出来，明确了即使在还原条件下也没有释放出铂络合物。此外，在实施例1化合物中，未添加抗坏血酸时的试验开始后2小时的铂络合物释放率为17.8％，在前述的添加抗坏血酸的条件下的释放率为76.4％，因此确认到在还原性条件下，加速了铂络合物的释放。由以上可以看出，通过选择与具有聚乙二醇结构部分及聚天冬氨酸部分或聚谷氨酸部分的嵌段共聚物结合的6配位铂络合物，可得到在还原条件下释放出铂络合物的6配位铂络合物的高分子偶联物。
试验例2实施例1化合物及比较例3化合物的还原条件下的铂络合物释放性试验
与试验例1的方法同样地，实施了与6配位铂络合物的实施例1化合物结合形式不同的4配位铂络合物的比较例3化合物的释放试验。结果示于表2。
[表2]
比较例3化合物在添加抗坏血酸的还原性条件下，即使在试验开始24小时后，也几乎没有确认到铂络合物释放出来。虽然也在未添加抗坏血酸的条件下进行了试验，但释放率与添加抗坏血酸时大致相同，几乎没有发现由添加抗坏血酸造成的影响。因此，可知在通过配体交换将专利文献1等中所使用的4配位铂络合物结合于高分子的情况下，释放性较低。
试验例3对人胃癌4-1st移植小鼠的抗肿瘤效果
<动物和移植肿瘤>
在balb/ca-nu/nu小鼠(以下记为裸鼠)的皮下传代维持人胃癌4-1st。从公益财团法人试验动物中央研究所获得了人胃癌4-1st。
<抗肿瘤试验1>
从裸鼠皮下采集人胃癌4-1st的试样，切碎成约3mm方形的块。使用套管针将得到的肿瘤块移植到裸鼠背侧部皮下。在平均肿瘤体积达到约100～200mm3的移植后的第15天，通过尾静脉投给各药剂。作为投给的各药剂的用法及用量(药剂换算)，对于实施例1的化合物，将其溶解在5％葡萄糖注射液中，单次投给25mg/kg及12.5mg/kg的用量。对于实施例2的化合物，将其溶解在5％葡萄糖注射液中，单次投给25mg/kg及12.5mg/kg的用量。对于实施例3的化合物，将其溶解在5％葡萄糖注射液中，单次投给20mg/kg及10mg/kg的用量。对于实施例4的化合物，将其溶解在5％葡萄糖注射液中，单次投给20mg/kg及10mg/kg的用量。对于实施例5的化合物，将其溶解在5％葡萄糖注射液中，单次投给20mg/kg及10mg/kg的用量。作为对照药剂，都单次投给20mg/kg的用量的l-ohp、10mg/kg的用量的顺氯氨铂。l-ohp、顺氯氨铂的给药量及各实施例化合物的高给药量均都采用最大耐受剂量(mtd用量)。在给药后，经时地使用游标卡尺测量肿瘤的长径(l)及短径(w)，算出了肿瘤体积(l×w×w×0.5)。无给药组及各药剂给药组全都以4只/组的方式实施了试验。从开始给药到给药后第21天为止，将无给药组的相对肿瘤体积记为100，将给药组的相对肿瘤体积(t/c(％))作为抗肿瘤效果的指标，通过下式算出。将各药剂给药组的t/c(％)示于表3中。
式：t/c(％)＝给药组相对肿瘤体积/无给药组相对肿瘤体积×100
[表3]
除了实施例2化合物以外，所有的实施例化合物都呈现出比l-ohp高的抗肿瘤效果。特别是对于实施例4化合物，即使在低用量时，也维持了与l-ohp相同程度的抗肿瘤效果。实施例2化合物发挥了与l-ohp相同程度的抗肿瘤效果。根据以上的结果，可知本发明的6配位铂络合物的高分子偶联物具有与l-ohp的抗肿瘤效果同等或其以上的抗肿瘤效果。
<抗肿瘤试验2>
从裸鼠皮下采集人胃癌4-1st的试样，切碎成约3mm方形的块。使用套管针将得到的肿瘤块移植到裸鼠背侧部皮下。在平均肿瘤体积达到约100～200mm3的移植后的第17天，通过尾静脉投给各药剂。作为投给的各药剂的用法及用量(药剂换算)，对于实施例11的化合物，将其溶解在5％葡萄糖注射液中，单次投给15mg/kg及7.5mg/kg的用量。对于实施例12的化合物，将其溶解在5％葡萄糖注射液中，单次投给30mg/kg及15mg/kg的用量。作为对照药剂，都单次投给18mg/kg的用量的l-ohp、10mg/kg的用量的顺氯氨铂。l-ohp、顺氯氨铂的给药量及各实施例化合物的高给药量均都采用最大耐受剂量(mtd用量)。在给药后，经时地使用游标卡尺测量肿瘤的长径(l)及短径(w)，算出了肿瘤体积(l×w×w×0.5)。无给药组及各药剂给药组全都以4只/组的方式实施了试验。从开始给药到给药后第21天为止，将无给药组的相对肿瘤体积记为100，将给药组的相对肿瘤体积(t/c(％))作为抗肿瘤效果的指标，通过下式算出。将各药剂给药组的t/c(％)示于表4中。
式：t/c(％)＝给药组相对肿瘤体积/无给药组相对肿瘤体积×100
在给药后，经时地测量了小鼠的体重。从开始给药到给药后第21天为止，在表5中示出将开始给药日的体重记为1时的相对体重的变化。
[表4]
[表5]
实施例11化合物及实施例12化合物呈现出比l-ohp及顺氯氨铂强的抗肿瘤效果。另一方面，实施例11化合物及实施例12化合物的体重减少在给药第4天比l-ohp及顺氯氨铂轻微。
<抗肿瘤试验3>
从裸鼠皮下采集人胃癌4-1st的试样，切碎成约3mm方形的块。使用套管针将得到的肿瘤块移植到裸鼠背侧部皮下。在平均肿瘤体积达到约100～200mm3的移植后的第20天，通过尾静脉投给各药剂。作为投给的各药剂的用法及用量(药剂换算)，对于实施例7的化合物，将其溶解在5％葡萄糖注射液中，单次投给15mg/kg及7.5mg/kg的用量。对于实施例16的化合物，将其溶解在5％葡萄糖注射液中，单次投给30mg/kg及15mg/kg的用量。作为对照药剂，都单次投给18mg/kg及9mg/kg的用量的l-ohp、10mg/kg的用量的顺氯氨铂。l-ohp、顺氯氨铂的给药量及各实施例化合物的高给药量均都采用最大耐受剂量(mtd用量)。在给药后，经时地使用游标卡尺测量肿瘤的长径(l)及短径(w)，算出了肿瘤体积(l×w×w×0.5)。无给药组及各药剂给药组全都以4只/组的方式实施了试验。从开始给药到给药后第21天为止，将无给药组的相对肿瘤体积记为100，将给药组的相对肿瘤体积(t/c(％))作为抗肿瘤效果的指标，通过下式算出。将各药剂给药组的t/c(％)示于表6中。
式：t/c(％)＝给药组相对肿瘤体积/无给药组相对肿瘤体积×100
在给药后，经时地测量了小鼠的体重。从开始给药到给药后第21天为止，在表7中示出将开始给药日的体重记为1时的相对体重的变化。
[表6]
[表7]
实施例7化合物及实施例16化合物在mtd用量下呈现出比l-ohp强的抗肿瘤效果。另一方面，实施例7化合物及实施例16化合物的体重减少在给药第4天比l-ohp及顺氯氨铂轻微。