1.一种适于高密度种植和机械化收获的油菜材料的获得方法,其特征在于,具体操作如下:
(1)采用农杆菌浸花法将激活标签载体转化到油菜中:
将激活标签载体转化到农杆菌感受态细胞中,将鉴定转化成功的菌制备菌悬液;将目标物油菜植株上已开花的花蕾和角果减掉,然后进行浸花过程;
(2)利用绿色荧光蛋白GFP筛选油菜转化株:
(3)采用草丁膦除草剂筛剂筛选油菜转化株;
(4)PCR方法鉴定突变体植株:
将筛选得到的含有激活标签载体pCB260的油菜突变体植株叶片作为实验材料,CTAB法小量提取基因组DNA,PCR扩增激活标签载体pCB260上的bar片段;
(5)转化植株的表型分析,确定得到的转化植株为适于高密度种植和机械化收获的油菜材料。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述激活标签载体为pCB260;所述的农杆菌感受态细胞为GV3101。
3.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(1)中所述浸花具体操作过程如下:
(1)第一次浸花:除去开放的花蕾,把整个未开放花蕾浸润于含有重组质粒pCB260的农杆菌菌液里,轻柔地晃动菌液;浸润完毕的花蕾套入羊皮袋内;
(2)第二次浸花:距离第一次浸花后1-2天,重复步骤(1),此步无需去除开放的花蕾;
(3)第三次浸花:距离第二次浸花后1-2天,重复步骤(2);
(4)浸花后管理:浸花结束后,待植株授粉完毕,去掉羊皮纸袋,不定时剪掉新生出的侧枝花序以及经过浸花的花序其顶端新萌发的花蕾,直接用水浇灌培养植株,直至收获。
4.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(3)中所述PCR扩增激活标签载体pCB260上的bar片段的引物序列为:
Bar-R:5’- CACCATCGTCAACCACTACATC-3’;
Bar-F:5’- ACTTCAGCAGGTGGGTGTAGAG-3’。
5.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(5)中所述突变体植株含有pCB260载体。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,步骤(5)中所述得到的适于高密度种植和机械化收获的转化植株表型为幼苗期叶片表面发亮,成熟期分枝较少,有效分枝高度增高,并且角果集中在植株顶端。