本发明涉及化合物合成
技术领域：
，更具体地说，本发明涉及20-羟基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物及其合成方法和在制备抗肿瘤药物中的应用。
背景技术：
：孕烯醇酮本身具有较弱的抗炎活性，文献曾报道孕烯醇酮c3-位羟基酯化，水杨酸酯和甲酸酯有与临床应用的可的松相当的抗炎作用，而三氯乙酸酯、氯乙酸酯、呋喃-2’-酸酯、对甲苯磺酸酯、邻苯二甲酸酯有较抗炎松略强的抗炎作用(李振肃,王海青等.5-孕甾烯-3β,17α-双醇-20-酮-3-醋酸酯-17α-脂肪酸酯类的合成及其构效关系研究[j].药学学报,1983,18(2):119-124.)。课题组已经对孕烯醇酮进行化学修饰改造的相关研究，“孕烯醇酮芳香醛吖嗪甾体化合物及其合成方法和在制备抗肿瘤药物中的应用”(中国发明专利，申请号：201310184358.x，申请公布号cn103254264a)，“3-取代-b-homo-甾体-b-环内酰胺化合物及其制备方法和在制备抗肿瘤药物中的应用”(中国发明专利，申请号：201110009124.2，申请公布号：cn102146115a)，“具有氨衍生物支链结构的3-羟基-5-烯甾体化合物制备方法及其在抗肿瘤药物中的应用”(中国发明专利，申请号：201210330275.2，申请公布号：cn102816198a)。但是，有关20-羟基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物及其合成方法、以及其在制备抗肿瘤药物中的应用未见报道。技术实现要素：本发明的目的是提供一种20-羟基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物。本发明的另一目的是提供上述化合物的合成方法。本发明的进一步目的是提供上述化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。本发明通过以下技术方案实现上述目的，本发明的20-羟基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物的甾核结构式如下所示：其中，r-基团可为：所述的20-羟基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物的合成方法，包括以下步骤：以甾体化合物孕烯醇酮为原料，首先将孕烯醇酮的3-位羟基经过芳香酰氯酯化成酯，反应得到中间产物，再将中间产物的17-位羰基还原，即得到20-羟基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物。优选的是，3-位羟基经过芳香酰氯酯化成酯的反应方法为：将孕烯醇酮溶于吡啶，再加入酰氯，于40℃温度下反应，用tlc跟踪反应，至无原料点后停止反应，得到的反应产物先加入冰水，再用乙酸乙酯萃取水相，合并有机相，再用1mol/l稀盐酸萃洗，然后再用饱和nacl溶液萃洗有机相，接着用无水na2so4干燥，最后减压蒸馏掉有机溶剂，柱层析分离，得到白色固体，即为中间产物；其中，所述芳香酰氯为对氟苯甲酰氯、间甲基苯甲酰氯、对甲基苯甲酰氯中的一种。优选的是，17-位羰基还原的反应方法为：将所述中间产物与甲醇混合，并加入cecl3·7h2o作为催化剂，搅拌至催化剂完全溶解后，再加入无水ch2cl2，待中间产物完全溶解后，称取nabh4缓慢加入进行反应，室温下反应，tlc检测，反应至无原料点停止反应，加入1mol/l稀盐酸，调节溶液的ph值为弱酸性，减压蒸馏掉有机溶剂后，加入蒸馏水，用乙酸乙酯萃取，合并有机相，再用饱和nacl溶液萃洗，然后用无水na2so4干燥，最后减压蒸馏掉有机溶剂，柱层析分离，得到白色固体的终产物，即为所述20-羟基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物。所述的20-羟基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物在制备抗肿瘤药物中的应用。所述的20-羟基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物为活性成分的药用组合物在制备抗肿瘤药物中的应用。制备所述20-羟基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物的反应路线如下所示：其中，化合物1至6中的r基团如下所示：试剂和条件：a:吡啶、对氟苯甲酰氯、间甲基苯甲酰氯、对甲基苯甲酰氯；b:ch3oh、ch2cl2、cecl3·7h2o、nabh4。通过生理活性试验研究表明，本发明的20-羟基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物4,5和6对人鼻咽癌细胞的生长增殖具有抑制作用，可作为药物中间体或药物应用于不同抗肿瘤药物制造和用途。本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。具体实施方式下面结合实施例对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。需要说明的是，下述实施方案中所述实验方法，如无特殊说明，均为常规方法，所述试剂和材料，如无特殊说明，均可从商业途径获得。<实施例1>20-羟基-孕烯-3-对氟苯甲酸酯(4)的制备步骤1:孕烯-3-对氟苯甲酸酯(1)的制备称取0.360g(约1mmol)孕烯醇酮，置于100ml的茄型烧瓶中，移取10ml吡啶于烧瓶，搅拌孕烯醇酮至完全溶解，再移入400ul对氟苯甲酰氯。于40℃油浴锅中反应，用tlc跟踪反应，至无原料点后停止反应，反应24小时。处理反应产物时，先加入15ml冰水，用乙酸乙酯(15ml×3)萃取水相，合并有机相，再用1mol/l稀盐酸萃洗，然后再用饱和nacl溶液(15ml×3)萃洗有机相，接着用无水na2so4干燥。最后减压蒸馏掉有机溶剂，柱层析分离(洗脱剂:v乙酸乙酯:v石油醚＝1:5)，得到白色固体0.614g，产率为：90.9％，m.p.200-202℃，产物结构经ir、nmr和ms分析确定；步骤2:20-羟基-孕烯-3-对氟苯甲酸酯(4)的制备于装有0.130g(约0.2mmol)化合物(1)100ml的茄型烧瓶中，移入5ml甲醇，并称取0.115gcecl3·7h2o(催化剂)放入反应烧瓶，搅拌至催化剂完全溶解后，再加入10ml无水ch2cl2，待化合物(1)完全溶解后，称取0.060gnabh4,并于5min内缓慢加入烧瓶中反应。室温下反应，tlc检测，反应30min无原料点停止反应，向烧瓶中加入1mol/l稀盐酸，调节溶液的ph值为弱酸性即可，减压蒸馏掉大部分有机溶剂后，加入15ml蒸馏水，用乙酸乙酯(15ml×3)萃取，合并有机相，再用饱和nacl溶液(15ml×3)萃洗，然后用无水na2so4干燥，最后减压蒸馏掉有机溶剂，柱层析分离(洗脱剂:v乙酸乙酯:v石油醚＝1:6)，得到白色固体0.117g，产率为：89.6％，m.p.220-222℃，产物结构经ir、nmr和ms分析确定其结构是20-羟基-孕烯-3-对氟苯甲酸酯(4)。<实施例2>20-羟基-孕烯-3-间甲基苯甲酸酯(5)的制备步骤1:孕烯-3-间甲基苯甲酸酯(2)的制备称取0.339g(约1mmol)孕烯醇酮，置于100ml的茄型烧瓶中，移取10ml吡啶于烧瓶，搅拌孕烯醇酮至完全溶解，再移入400ul间甲基苯甲酰氯。于40℃油浴锅中反应，用tlc跟踪反应，至无原料点后停止反应，反应24小时。处理反应产物时，先加入15ml冰水，用乙酸乙酯(15ml×3)萃取水相，合并有机相，再用1mol/l稀盐酸萃洗，然后再用饱和nacl溶液(15ml×3)萃洗有机相，接着用无水na2so4干燥。最后减压蒸馏掉有机溶剂，柱层析分离(洗脱剂:v乙酸乙酯:v石油醚＝1:5)，得到白色固体0.519g，产率为：99.9％，m.p.170-174℃，产物结构经ir、nmr和ms分析确定；步骤2:20-羟基-孕烯-3-间甲基苯甲酸酯(5)的制备于装有0.488g(约1mmol)化合物(2)100ml的茄型烧瓶中，移入5ml甲醇，并称取0.433gcecl3·7h2o(催化剂)放入反应烧瓶，搅拌至催化剂完全溶解后，再加入10ml无水ch2cl2，待化合物(2)完全溶解后，称取0.234gnabh4,并于5min内缓慢加入烧瓶中反应。室温下反应，tlc检测，反应30min无原料点停止反应，向烧瓶中加入1n稀盐酸(体积比1:1)，调节溶液的ph值为弱酸性即可，减压蒸馏掉大部分有机溶剂后，加入15ml蒸馏水，用乙酸乙酯(15ml×3)萃取，合并有机相，再用饱和nacl溶液(15ml×3)萃洗，然后用无水na2so4干燥，最后减压蒸馏掉有机溶剂，柱层析分离(洗脱剂:v乙酸乙酯:v石油醚＝1:6)，得到白色固体0.403g，产率为：82.2％，m.p.134-136℃。产物结构经ir、nmr和ms分析确定其结构是20-羟基-孕烯-3-间甲基苯甲酸酯(5)。<实施例3>20-羟基-孕烯-3-对甲基苯甲酸酯(6)步骤1:孕烯-3-对甲基苯甲酸酯(3)的制备称取1.558g(约5mmol)孕烯醇酮，置于100ml的茄型烧瓶中，移取15ml吡啶于烧瓶，搅拌孕烯醇酮至完全溶解，再移入400ul对甲基苯甲酰氯。于40℃油浴锅中反应，用tlc跟踪反应，至无原料点后停止反应，反应24小时。处理反应产物时，先加入15ml冰水，用乙酸乙酯(15ml×3)萃取水相，合并有机相，再用1mol/l稀盐酸萃洗，然后再用饱和nacl溶液(15ml×3)萃洗有机相，接着用无水na2so4干燥。最后减压蒸馏掉有机溶剂，柱层析分离(洗脱剂:v乙酸乙酯:v石油醚＝1:5)，得到白色固体1.962g，产率为：90.1％，m.p.194-196℃，产物结构经ir、nmr和ms分析确定；步骤2:20-羟基-孕烯-3-对甲基苯甲酸酯(6)的制备于装有0.421g(约1mmol)化合物(3)100ml的茄型烧瓶中，移入5ml甲醇，并称取0.375gcecl3·7h2o(催化剂)放入反应烧瓶，搅拌至催化剂完全溶解后，再加入10ml无水ch2cl2，待化合物(3)完全溶解后，称取0.124gnabh4,并于5min内缓慢加入烧瓶中反应。室温下反应，tlc检测，反应30min无原料点停止反应，向烧瓶中加入1mol/l稀盐酸，调节溶液的ph值为弱酸性即可，减压蒸馏掉大部分有机溶剂后，加入15ml蒸馏水，用乙酸乙酯(15ml×3)萃取，合并有机相，再用饱和nacl溶液(15ml×3)萃洗，然后用无水na2so4干燥，最后减压蒸馏掉有机溶剂，柱层析分离(洗脱剂:v乙酸乙酯:v石油醚＝1:6)，得到白色固体0.379g，产率为：89.6％，m.p.204-207℃，产物结构经ir、nmr和ms分析确定其结构是20-羟基-孕烯-3-对甲基苯甲酸酯(6)。采用本发明所述的20-羟基-孕烯-3-芳酯基孕甾化合物对某些肿瘤细胞进行细胞毒性试验，发现其中某些化合物具有显著的抑制肿瘤细胞生长增殖效果。如表中化合物4，5和6对人鼻咽癌细胞株(cne-2)的抑制作用。表化合物4，5和6对人鼻咽癌细胞株的ic50值(μmol/l)化合物456ic5022.621.65.3尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节。当前第1页12