本发明涉及化妆品领域，具体涉及一种具有抗衰老抗氧化活性的山茱萸多糖及其制备方法和应用。
背景技术：
：山茱萸，别名蜀枣、鼠矢、鸡足、山萸肉、实枣儿、枣皮、萸肉等,原植物为山茱木属落叶小乔木。山茱萸糖具有明显促进免疫反应的作用,能促进吞噬、激活nk细胞和巨噬细胞系统,刺激分泌il-1,tnf和γ-ifn,调节il-2的产生，巨噬细胞将吞噬黑色素。苗明三等研究表明山茱萸多糖可显著提高衰老小鼠血sod、cat及gsh-px活力,显著降低血浆、脑匀浆及肝匀浆中的lpo水平，说明山茱萸多糖有很好的抗衰老抗氧化作用。山茱萸多糖在一定浓度范围内均能显著清除羟基自由基，且随着多糖浓度的增加，清除率显著增大，山茱萸多糖超氧自由基也有一定的清除能力。将山茱萸多糖添加于化妆品配方中，将起到抗衰老功效。技术实现要素：基于此，本发明的目的在于提供一种具有抗衰老抗氧化活性的山茱萸多糖及其制备方法和应用。为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：一种具有抗衰老抗氧化活性的山茱萸多糖的制备方法，包含以下步骤：1)将山茱萸残渣，55℃恒温干燥，粉碎得到山茱萸残渣粉末；2)将山茱萸残渣粉末利用紫外线辐照灭菌25min；3)将灭菌后的山茱萸残渣粉末，加入蒸馏水，10％酵母膏，通风条件下连续发酵3.5d，发酵结束后，取出取出样品，烘干后粉碎，得到发酵山茱萸残渣粉末；4)将发酵山茱萸残渣粉末，加入蒸馏水，在80℃下提取1h，回流提取3次，合并提取液，经5000r/min离心15min，65℃减压浓缩，得浓缩液；5)将浓缩液加入沉淀剂过夜，沉淀，干燥，得山茱萸粗多糖；将上述所得山茱萸粗多糖，脱蛋白，浓缩，透析，超滤，冻干，得山茱萸多糖。在其中一些实施例中，所述山茱萸残渣为山茱萸提取乙酸乙酯后剩余的残渣。在其中一些实施例中，所述步骤3)中的山茱萸残渣粉末需过30～50目筛后，加入6～7倍重量份的蒸馏水。在其中一些实施例中，所述步骤3)中的发酵山茱萸残渣粉末需过30～50目筛后，加入5～20倍蒸馏水。在其中一些实施例中，所述步骤5)中的沉淀剂为4倍重量份的无水乙醇。本发明还提供了根据上述制备方法所制得的具有抗衰老抗氧化活性的山茱萸多糖。本发明还提供了上述的具有抗衰老抗氧化活性的山茱萸多糖在制备化妆品中的应用。在其中一些实施例中，所述化妆品剂型包括膏霜、乳液、水剂。本发明还提供了一种化妆品，包括如前所述的具有抗衰老抗氧化活性的山茱萸多糖。本发明还提供了一种抗衰老面膜，包含如下质量百分比成分：如前所述的具有抗衰老抗氧化活性的山茱萸多糖0.4～5％、甘油3～8％、生物糖胶-10.5～1.5％、丁二醇3～8％、羟乙基纤维素0.2～0.8％、透明质酸钠0.01～0.04％、聚季铵盐-510.1～1％、卡波姆0.3～0.7％、三乙醇胺0.5～1％、糖基海藻糖0.05～0.3％、泛醇0.3～0.8％、烟酰胺1～5％、pca钾0.5～5％、peg-40氢化蓖麻油0.1～1％、羟苯甲酯0.1～0.3％、苯氧乙醇0.3～0.8％、edta二钠0.05～0.1％、黄原胶0.1～0.5％、去离子水余量。本发明具有的有益效果如下：本发明通过发明人大量的实验以及经验优选了制备方法的各种条件，得到了优化的制备方法，采用本发明制备方法所获得的山茱萸多糖，含量高，产品性能稳定，可添加在多种护肤产品中，如膏霜、乳液、水剂等，充分利用山茱萸残渣进行二次加工，有效避免资源的浪费。本发明能够显著提高sod活性、cat及gsh-px活性，同时对羟基自由基及超氧自由基具有一定的清除能力，从而有效发挥其抗衰老抗氧化作用。具体实施方式以下结合具体实施例对本发明作进一步阐述：文中所出现的所有成分均为inci(internationalnomenclaturecosmeticingredient)，即国际化妆品原料明明说对其规定的名称。实施例1一种具有抗衰老抗氧化活性的山茱萸多糖的制备方法，包含以下步骤：1)将山茱萸提取乙酸乙酯后剩余的残渣，55℃恒温干燥，粉碎过40目筛，得到山茱萸残渣粉末；2)将山茱萸残渣粉末利用紫外线辐照灭菌25min；3)将灭菌后的山茱萸残渣粉末，加入6.5倍蒸馏水，10％酵母膏，通风条件下连续发酵3.5d，发酵结束后，取出取出样品，烘干后粉碎过40目筛，得到发酵山茱萸残渣粉末；4)将发酵山茱萸残渣粉末，加入12倍蒸馏水，在80℃下提取1h，回流提取3次，合并提取液，经5000r/min离心15min，65℃减压浓缩，得浓缩液；5)将浓缩液加入4倍重量份的无水乙醇过夜，沉淀，干燥，得山茱萸粗多糖；将上述所得山茱萸粗多糖，脱蛋白，浓缩，透析，超滤，冻干，得山茱萸多糖。实施例2一种具有抗衰老抗氧化活性的山茱萸多糖的制备方法，包含以下步骤：1)将山茱萸提取乙酸乙酯后剩余的残渣，55℃恒温干燥，粉碎过30目筛，得到山茱萸残渣粉末；2)将山茱萸残渣粉末利用紫外线辐照灭菌25min；3)将灭菌后的山茱萸残渣粉末，加入6倍蒸馏水，10％酵母膏，通风条件下连续发酵3.5d，发酵结束后，取出样品，烘干后粉碎过30目筛，得到发酵山茱萸残渣粉末；4)将发酵山茱萸残渣粉末，加入5倍蒸馏水，在80℃下提取1h，回流提取3次，合并提取液，经5000r/min离心15min，65℃减压浓缩，得浓缩液；5)将浓缩液加入4倍重量份的无水乙醇过夜，沉淀，干燥，得山茱萸粗多糖；将上述所得山茱萸粗多糖，脱蛋白，浓缩，透析，超滤，冻干，得山茱萸多糖。实施例3一种具有抗衰老抗氧化活性的山茱萸多糖的制备方法，包含以下步骤：1)将山茱萸提取乙酸乙酯后剩余的残渣，55℃恒温干燥，粉碎过50目筛，得到山茱萸残渣粉末；2)将山茱萸残渣粉末利用紫外线辐照灭菌25min；3)将灭菌后的山茱萸残渣粉末，加入7倍蒸馏水，10％酵母膏，通风条件下连续发酵3.5d，发酵结束后，取出取出样品，烘干后粉碎过50目筛，得到发酵山茱萸残渣粉末；4)将发酵山茱萸残渣粉末，加入20倍蒸馏水，在80℃下提取1h，回流提取3次，合并提取液，经5000r/min离心15min，65℃减压浓缩，得浓缩液；5)将浓缩液加入4倍重量份的无水乙醇过夜，沉淀，干燥，得山茱萸粗多糖；将上述所得山茱萸粗多糖，脱蛋白，浓缩，透析，超滤，冻干，得山茱萸多糖。对比例1一种具有抗衰老抗氧化活性的山茱萸多糖的制备方法，包含以下步骤：1)将山茱萸提取乙酸乙酯后剩余的残渣，60℃恒温干燥，粉碎过70目筛，得到山茱萸残渣粉末；2)将山茱萸残渣粉末利用紫外线辐照灭菌30min；3)将灭菌后的山茱萸残渣粉末，加入8倍蒸馏水，15％酵母膏，通风条件下连续发酵5d，发酵结束后，取出取出样品，烘干后粉碎过60目筛，得到发酵山茱萸残渣粉末；4)将发酵山茱萸残渣粉末，加入25倍蒸馏水，在100℃下提取2h，回流提取3次，合并提取液，经5000r/min离心15min，60℃减压浓缩，得浓缩液；5)将浓缩液加入5倍重量份的无水乙醇过夜，沉淀，干燥，得山茱萸粗多糖；将上述所得山茱萸粗多糖，脱蛋白，浓缩，透析，超滤，冻干，得山茱萸多糖。对比例2一种具有抗衰老抗氧化活性的山茱萸多糖的制备方法，包含以下步骤：1)将山茱萸提取乙酸乙酯后剩余的残渣，30℃恒温干燥，粉碎过40目筛，得到山茱萸残渣粉末；2)将山茱萸残渣粉末利用紫外线辐照灭菌25min；3)将灭菌后的山茱萸残渣粉末，加入10倍蒸馏水，10％酵母膏，密闭条件下连续发酵3d，发酵结束后，取出取出样品，烘干后粉碎过40目筛，得到发酵山茱萸残渣粉末；4)将发酵山茱萸残渣粉末，加入12倍蒸馏水，在80℃下提取1h，回流提取3次，合并提取液，经5000r/min离心15min，65℃减压浓缩，得浓缩液；5)将浓缩液加入4倍重量份的无水乙醇过夜，沉淀，干燥，得山茱萸粗多糖；将上述所得山茱萸粗多糖，脱蛋白，浓缩，透析，超滤，冻干，得山茱萸多糖。对比例3一种具有抗衰老抗氧化活性的山茱萸多糖的制备方法，包含以下步骤：1)将山茱萸提取乙酸乙酯后剩余的残渣，55℃恒温干燥，粉碎过40目筛，得到山茱萸残渣粉末；2)将山茱萸残渣粉末利用紫外线辐照灭菌25min；3)将灭菌后的山茱萸残渣粉末，加入6.5倍蒸馏水进行发酵，发酵结束后，取出取出样品，烘干后粉碎过40目筛，得到发酵山茱萸残渣粉末；4)将发酵山茱萸残渣粉末，加入12倍蒸馏水，在80℃下提取1h，回流提取3次，合并提取液，经5000r/min离心15min，65℃减压浓缩，得浓缩液；5)将浓缩液加入4倍重量份的无水乙醇过夜，沉淀，干燥，得山茱萸粗多糖；将上述所得山茱萸粗多糖，脱蛋白，浓缩，透析，超滤，冻干，得山茱萸多糖。结果分析：实施例1-3和对比例1-3的制备条件有抗衰老抗氧化活性的山茱萸多糖的含量如下表1。表1由表1数据分析可知：实施例1-3的制备条件下得到的山茱萸多糖的含量明显比对比例1-3的制备条件下得到的山茱萸多糖的含量明显要高；对比例1改变了制备工艺的所有参数，结果对比例1得到山茱萸多糖的含量明显低于实施例1；对比例2是在密闭的条件下进行发酵的，但提取量明显比实施例1低，说明制备工艺的供氧环境会影响发酵过程，进而影响提取率，因此，需要控制制备工艺的通风环境；对比例3制备工艺没有加入酵母膏，残渣自身进行发酵过程，但是提取率也很低，说明了加入酵母膏，促进了残渣的发酵过程，有效提高提取率。将实施例1制备得到的具有抗衰老抗氧化活性的山茱萸多糖应用在抗衰老面膜中，具体如下表2。表2抗衰老功效验证选取健康志愿者60名，分为两组，年龄30～65岁；有一定的皮肤松驰/细小皱纹现象，并自愿按要求完成试验；上述抗衰老面膜为试验组，市面上宣称有抗衰老效果的面膜为对照组；试验时间为4个星期，并在试验前0周、试验2周、试验4周检测皮肤角质层的含水量、皮肤弹性和皱纹分值。测试方法：(1)水分测试：使用水分测试仪测量左右脸颊部位角质层含水量，测量4次取平均值；(2)弹性测试：用皮肤弹性测试仪测量皮肤的弹性，核算取r2平均值，r2值越接近1，说明弹性越好；(3)面部成像：采用visia面部成像分析系统对受试者面部进行拍照(正面、左、右侧45°方向)提取皱纹分析值和纹理分值，取平均值，测试结果如下表3。表3由表3可以看出，使用上述应用中的面膜产品后，皮肤角质层的含水量、皮肤弹性都有持续增加，说明了本发明的产品具有优异的保水，减少皱纹的作用；从皱纹分值来分析产品，可以进一步说明含山茱萸多糖的产品具有抗衰老作用。抗氧化功效验证在5ml反应液中，核黄素及甲硫氨酸的浓度分别为1x10-1mol/l和7.5x10-6mol/l。反应在自制的装有1支18w节能日光灯、四周有铝铂的暗箱中进行。用光强度仪测定，调节光源距离，使样品受光强度为4000lux。光照20min，使核黄素和甲硫氨酸在光照条件下反应产生o2-·，然后在该体系中加入氮蓝四唑，使其浓度达到1x10-4mol/l，核黄素与甲硫氨酸反应产生的o2-·将氮蓝四唑还原为蓝色的产物。以未光照试液作校正，在560nm处测定其吸光度a，加入各试验的山茱英多糖、面膜液后，测得吸光度为a,，平行测定3次。清除率(％)＝[(a0-ax)]x100％式中，a0-试剂空白液的吸光度；ax-加活性成分后的吸光度。实验结果如下表4。表4成分山茱萸多糖面膜液空白对照抑制率％94.789.20由表4可知，山茱萸多糖具有显著的抗氧化作用，将其应用在面膜中，能赋予面膜优异的抗氧化效果。以上实施例仅表明本发明的几种实施例，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利的限制范围。应当指出的是：任何从事本专业的技术人员，都有能力利用已揭示的技术内容，对其作出一些更动或修饰，成为等同变化的等效实施例。根据本发明技术实质，对本发明进行简单修改、等同变化与修饰，均属于本发明技术方案的范围内。当前第1页12