本发明涉药物化学领域，具体涉及一种氘代的咪唑并吡嗪类化合物或其可药用盐及其制备方法，及其该类化合物作为syk激酶活性抑制剂在治疗疾病方面的用途。
背景技术：
：人类酶的最大家族，蛋白激酶包含大大超过500个蛋白质。脾酪氨酸激酶(syk)是酪氨酸激酶的syk家族中的一员，是早期b细胞发育以及成熟b细胞活化、信号转导和生存的调节剂。syk是一种非受体型酪氨酸激酶，存在于多种细胞中，所述多种细胞包括b细胞、巨噬细胞、单核细胞、肥大细胞、嗜曙红细胞、嗜碱性细胞、嗜中性细胞、树突状细胞、t细胞、自然杀伤细胞、凝血细胞和破骨细胞。syk在许多肿瘤细胞中有表达，并与肿瘤发生、发展和转移的许多信号有关。syk抑制剂除了可以用来治疗哮喘、风湿性关节炎等免疫性疾病，也可以用来治疗包括b细胞淋巴瘤和白血病的特定类型的癌症。gs-9973是syk激酶活性的抑制剂，目前处于临床ii期研究。结构如下：氘代修饰是改进药物代谢性质的一种非常有潜力的新药开发技术。在该方法中，设法通过将一个或多个氢原子用氘原子取代从而减慢cyp介导的药物代谢或减少不期望的代谢物的生成。氘是安全、稳定、不具有放射性的同位素，与氢相比，氘与碳可以形成更强的键。在某些情况下，由氘形成的增加的键强度可以积极影响药物的adme性质，结果可能会明显地延长药物代谢循环、减少有毒代谢物的产生和药物间的相互作用、提高安全性以及获得更佳的疗效。现有技术中，氘代的gs-9973类化合物还未见报道。技术实现要素：本发明的目的是针对现有技术中的不足，提供一种氘代咪唑并吡嗪类化合物或其可药用盐。本发明的第二个方面，提供一种所述的氘代咪唑并吡嗪类化合物或其可药用盐的制备方法。本发明的第三个方面，提供一种药物组合物，所述药物组合物包含第一方面所述的氘代咪唑并吡嗪类化合物或其可药用盐。本发明的第四方面，本发明提供了如第三方面所述的药物组合物在治疗或预防由syk激酶介导的疾病方面的用途。为了达到上述目的，本发明提供了一种氘代的咪唑并吡嗪类化合物或其可药用盐，化学结构如式(i)所示：其特征在于，其中：r1-r19各自独立地代表h或d；优选地，氘在氘取代位置的氘同位素含量大于天然氘同位素含量(0.015％)，较佳地大于30％，更佳地大于50％，更佳地大于75％，更佳地大于95％，更佳地大于98％。更优选地，所述的氘代咪唑并吡嗪类化合物选自：其中，所述的可药用盐包括但不限于碱金属盐，如钠盐、钾盐、锂盐等；碱土金属盐，如钙盐、镁盐等；其他金属盐，如铝盐、铁盐、锌盐、铜盐、镍盐、钴盐等；无机碱盐，如铵盐；有机碱盐，如叔辛基胺盐、二苄基胺盐、吗啉盐、葡糖胺盐、苯基甘氨酸烷基酯盐、乙二胺盐、n-甲基葡糖胺盐、胍盐、二乙胺盐、三乙胺盐、二环己基胺盐、n，n-二苄基乙二胺盐、氯普鲁卡因盐、普鲁卡因盐、二乙醇胺盐、n-苄基-苯乙基胺盐、哌嗪盐、四甲基胺盐、三(羟甲基)胺基甲烷盐；氢卤酸盐，如氢氟酸盐、盐酸盐、氢溴酸盐、氢碘酸盐等；无机酸盐，如硝酸盐、高氯酸盐、硫酸盐、磷酸盐等；低级烷磺酸盐，如甲磺酸盐、三氟甲磺酸盐、乙磺酸盐等；芳基磺酸盐，如苯磺酸盐、对苯磺酸盐等；有机酸盐，如醋酸盐、苹果酸盐、富马酸盐、琥珀酸盐、柠檬酸盐、酒石酸盐、草酸盐、马来酸盐等；氨基酸盐，如甘氨酸盐、三甲基甘氨酸盐、精氨酸盐、鸟氨酸盐、谷氨酸盐、天冬氨酸盐。为实现上述第二个目的，本发明提供了一种氘代咪唑并吡嗪类化合物或其可药用盐的制备方法，包括以下步骤：具体包括以下步骤：步骤一：将化合物a溶于有机溶剂中，加入b，碱试剂，在氮气保护下，加热反应得到目标产物化合物c。步骤二：将化合物c和d溶于有机溶剂中，加入水，碱试剂和钯催化剂在氮气保护下，加热反应得到目标产物化合物e。其中，x1和x2代表卤素，优选氯和溴；y代表硼酸或硼酸酯。优选地，所述的有机溶剂为n,n-二甲基甲酰胺，四氢呋喃，二甲基亚砜，甲苯，n-甲基吡咯烷酮，二氧六环。优选地，所述的碱试剂为k2co3，na2co3，cs2co3，k3po4，三乙胺，n,n-二异丙基乙胺。在本发明的第三方面，提供了一种药物组合物，所述药物组合物包含有第一方面所述的氘代咪唑并吡嗪类化合物或其可药用盐；所述的可药用盐包括其晶型、药学上可接受的盐、前药、水合物或溶剂合物；在一优选例中，所述药物组合物进一步包含至少一种药学上可接受的载体；在另一优选例中，所述的药物组合物为注射剂、囊剂、片剂、丸剂、散剂或颗粒剂。在另一优选例中，所述药物组合物进一步包含至少一种另外的抗肿瘤药物，所述的另外的抗肿瘤药物。优选地，所述的抗肿瘤药物包括但并不限于：紫杉醇、长春碱、长春新碱、多因他赛、顺铂、卡铂、环磷酰胺、卡莫司汀、达卡巴嗪、更生霉素、柔红霉素、博来霉素、鬼臼毒素类、尿氟嘧啶、甲氨蝶呤、阿糖胞苷、喜树碱类、他莫昔芬、雷洛昔芬、受体或非受体酪氨酸激酶。为实现上述第四个目的，本发明提供了一种包含所述氘代咪唑并吡嗪化合物或其可药用盐的组合物在治疗或预防由syk激酶介导的疾病方面的用途。具体地，用于治疗和预防由syk激酶介导的疾病可以包括炎症性、变应性、自身免疫性疾病和癌症，例如，哮喘、慢性阻塞性肺病(copd)、成人呼吸窘迫综合征(ards)、溃疡性结肠炎、克罗恩病、支气管炎、皮炎、变应性鼻炎、银屑病、硬皮病、革麻痊、类风湿性关节炎、特发性血小板减少性紫癫(itp)、多发性硬化、癌症、hiv、狼疮、b细胞淋巴瘤、白血病、变应性紊乱、多囊性肾病、乳腺癌、黑色素瘤、结直肠癌、胰腺癌、胃癌、肝细胞癌、淋巴造血系统肿瘤。本发明优点在于合成了一种氘代的咪唑并吡嗪类化合物，该类化合物对syk激酶选择性抑制活性较好，不低于甚至优于对照物gs-9973。氘代后的咪唑并吡嗪类化合物具有更好的稳定性，氘代后使得化合物的代谢变得困难，导致首过效应降低，在这种情况下，可以改变剂量并形成长效制剂，其也可以以长效制剂的形式改善适用性。同时氘代后的化合物还具有降低毒副作用、增加药物稳定性、增强疗效、延长药物生物半衰期等作用。具体实施方式以下结合实施例对本发明的技术方案做进一步的说明。但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下实施例。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。实施例一化合物d1的合成步骤一：将化合物1(2mmol)和2(2mmol)溶于dmf中，加入碳酸钾(4mmol)，60度条件下反应5个小时，反应完全后倒入水中，析出固体过滤得化合物3。步骤二：将化合物3(2mmol)溶于甲醇中，加入raney镍(10wt％)，氢气条件下还原，过滤，滤液旋干后得化合物4。步骤三：将化合物4(2mmol)和化合物5(2mmol)溶于dmf中，加入diea(4mmol)，120度下反应3小时，倒入冰水中析出固体，过滤得化合物6。步骤四：将化合物6(1mmol)和化合物7(1mmol)溶于二氧六环中，加入碳酸钠(2mmol)，水，二氯二三苯基膦钯(0.1eq)，微波135度条件下反应3.5小时，倒入水中，用乙酸乙酯萃取，饱和氯化钠洗两遍，无水硫酸钠干燥后旋干柱层析得化合物d1。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ13.17(s,1h),9.50(s,1h),8.66(s,1h),8.19(s,1h),8.09(s,1h),8.03(d,j＝8.7hz,2h),7.99(d,j＝0.9hz,1h),7.84(d,j＝8.7hz,1h),7.72(dd,j＝8.7,0.9hz,1h),7.63(d,j＝0.9hz,1h),7.00(d,j＝8.7hz,2h),3.77(s,4h).实施例二化合物d2的合成步骤一：将化合物8(2mmol)和2(2mmol)溶于dmf中，加入碳酸钾(4mmol)，60度条件下反应5个小时，反应完全后倒入水中，析出固体过滤得化合物9。步骤二：将化合物9(2mmol)溶于甲醇中，加入raney镍(10wt％)，氢气条件下还原，过滤，滤液旋干后得化合物10。步骤三：将化合物10(2mmol)和化合物5(2mmol)溶于dmf中，加入diea(4mmol)，120度下反应3小时，倒入冰水中析出固体，过滤得化合物11。步骤四：将化合物11(1mmol)和化合物7(1mmol)溶于二氧六环中，加入碳酸钠(2mmol)，水，二氯二三苯基膦钯(0.1eq)，微波135度下反应3.5小时，倒入水中，用乙酸乙酯萃取，饱和氯化钠洗两遍，无水硫酸钠干燥后旋干柱层析得化合物d2。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ13.17(s,1h),9.50(s,1h),8.66(s,1h),8.19(s,1h),8.09(s,1h),8.03(d,j＝8.7hz,2h),7.99(d,j＝0.9hz,1h),7.84(d,j＝8.7hz,1h),7.72(dd,j＝8.7,0.9hz,1h),7.63(d,j＝0.9hz,1h),7.00(d,j＝8.7hz,2h).实施例三化合物d3的合成步骤一：将化合物12(2mmol)和2(2mmol)溶于dmf中，加入碳酸钾(4mmol)，60度条件下反应5个小时，反应完全后倒入水中，析出固体过滤得化合物13。步骤二：将化合物13(2mmol)溶于甲醇中，加入raney镍(10wt％)，氢气条件下还原，过滤，滤液旋干后得化合物14。步骤三：将化合物14(2mmol)和化合物5(2mmol)溶于dmf中，加入diea(4mmol)，120度下反应3小时，倒入冰水中析出固体，过滤得化合物15。步骤四：将化合物15(1mmol)和化合物7(1mmol)溶于二氧六环中，加入碳酸钠(2mmol)，水，二氯二三苯基膦钯(0.1eq)，微波135度下反应3.5小时，倒入水中，用乙酸乙酯萃取，饱和氯化钠洗两遍，无水硫酸钠干燥后旋干柱层析得化合物d3。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ13.17(s,1h),9.50(s,1h),8.66(s,1h),8.19(s,1h),8.09(s,1h),8.03(d,j＝8.7hz,2h),7.99(d,j＝0.9hz,1h),7.84(d,j＝8.7hz,1h),7.72(dd,j＝8.7,0.9hz,1h),7.63(d,j＝0.9hz,1h),7.00(d,j＝8.7hz,2h),3.11(s,4h).实施例四化合物d4的合成步骤一：将化合物6(1mmol)和化合物16(1mmol)溶于二氧六环中，加入碳酸钠(2mmol)，水，二氯二三苯基膦钯(0.1eq)，微波135度下反应3.5小时，倒入水中，用乙酸乙酯萃取，饱和氯化钠洗两遍，无水硫酸钠干燥后旋干柱层析得化合物d4。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ13.17(s,1h),8.66(s,1h),8.19(s,1h),8.09(s,1h),8.03(d,j＝8.7hz,2h),7.99(d,j＝0.9hz,1h),7.84(d,j＝8.7hz,1h),7.72(dd,j＝8.7,0.9hz,1h),7.63(d,j＝0.9hz,1h),7.00(d,j＝8.7hz,2h),3.77(s,4h).实施例五化合物d5的合成步骤一：将化合物17(2mmol)和18(2mmol)溶于dmf中，加入碳酸钾(4mmol)，60度条件下反应5个小时，反应完全后倒入水中，析出固体过滤得化合物19。步骤二：将化合物19(2mmol)溶于甲醇中，加入raney镍(10wt％)，氢气条件下还原，过滤，滤液旋干后得化合物20。步骤三：将化合物20(2mmol)和化合物5(2mmol)溶于dmf中，加入diea(4mmol)，120度下反应3小时，倒入冰水中析出固体，过滤得化合物21。步骤四：将化合物21(1mmol)和化合物7(1mmol)溶于二氧六环中，加入碳酸钠(2mmol)，水，二氯二三苯基膦钯(0.1eq)，微波135度下反应3.5小时，倒入水中，用乙酸乙酯萃取，饱和氯化钠洗两遍，无水硫酸钠干燥后旋干柱层析得化合物d5。步骤一：将化合物17(2mmol)和18(2mmol)溶于dmf中，加入碳酸钾(4mmol)，60度条件下反应5个小时，反应完全后倒入水中，析出固体过滤得化合物19。步骤二：将化合物19(2mmol)溶于甲醇中，加入raney镍(10wt％)，氢气条件下还原，过滤，滤液旋干后得化合物20。步骤三：将化合物20(2mmol)和化合物5(2mmol)溶于dmf中，加入diea(4mmol)，120度下反应3小时，倒入冰水中析出固体，过滤得化合物21。步骤四：将化合物21(1mmol)和化合物7(1mmol)溶于二氧六环中，加入碳酸钠(2mmol)，水，二氯二三苯基膦钯(0.1eq)，微波135度下反应3.5小时，倒入水中，用乙酸乙酯萃取，饱和氯化钠洗两遍，无水硫酸钠干燥后旋干柱层析得化合物d5。1hnmr(300mhz,dmso-d6)δ13.17(s,1h),9.50(s,1h),8.66(s,1h),8.19(s,1h),8.09(s,1h),7.99(d,j＝0.9hz,1h),7.84(d,j＝8.7hz,1h),7.72(dd,j＝8.7,0.9hz,1h),7.63(d,j＝0.9hz,1h),3.77(t,j＝4.6hz,4h),3.11(t,j＝4.6hz,4h).实施例六化合物d1的甲磺酸盐的合成步骤一：将化合物d1(2mmol)溶于异丙醇中，加入甲磺酸(2.2mmol)，室温下搅拌，析出固体过滤得d1的二甲磺酸盐。实施例七本发明化合物的体外酶学抑制活性采用caliper迁移率变动检测术(calipermobilityshiftassay)测定syk蛋白激酶活性。将化合物用dmso溶解后用激酶缓冲稀释，在384孔板中加入5μl的5倍反应终浓度的化合物(10％dmso)。加入10μl的2.5倍酶(syk)溶液后在室温下孵育10分钟，再加入10μl的2.5倍底物(peptidefam-p22和atp)溶液。28度下孵育30分钟，后加25μl终止液终止反应。caliperezreaderii(caliperlifesciences)上读取转化率数据。把转化率转化成抑制率数据(％抑制率＝(max-转化率)/(max-min)*100)。其中max是指dmso对照的转化率，min是指无酶活对照的转化率。以化合物浓度和抑制率为横纵坐标，绘制曲线，使用xlfitexceladd-inversion4.3.1软件拟合曲线并计算ic50。表1本发明化合物的体外酶学抑制活性化合物编号syk酶学抑制活性ic50(nm)gs-99738.1d17.9d28.2d38.1实施例八体外人肝微体酶稳定性实验(1)实验步骤受试化合物将与人肝微粒体在以下条件下(见表)进行共孵育，向孵育管中加入受试化合物作液，混匀后瞬离，置于37℃水浴中。然后加入nadph的工作液启动反应。在0、5、10、20、40、60min取出部分孵育液并转移至含有内标的乙腈中终止反应。蛋白沉淀后，3,700rpm离心10min，取上清。上清液中的受试化合物由lc-ms/ms方法分析。根据受试化合物在孵育体系中的清除半衰期算出体外内在清除率。咪达唑仑作为阳性对照平行孵育。孵育条件总结如下表(孵育体系有机溶剂的含量不超过1％)，均平行孵育2份：(2)数据分析分析物/内标峰面积之比(aanalyte/ais)将由仪器得出，剩余百分比(％control)由非零时间点样品与零时刻样品中aanalyte/ais之比计算出。将ln(％control)对孵育时间作图并进行线性拟合。受试化合物清除常数(k，min-1)、清除半衰期(t1/2，min)以及体外内在清除率(clint，μlmin-1mg-1proteins)由以下方程式计算得到。k＝-slopet1/2＝0.693/kclint＝k/cproteincprotein(mgml-1)指孵育体系中的微粒体蛋白质浓度。(2)数据分析分析物/内标峰面积之比(aanalyte/ais)将由仪器得出，剩余百分比(％control)由非零时间点样品与零时刻样品中aanalyte/ais之比计算出。将ln(％control)对孵育时间作图并进行线性拟合。受试化合物清除常数(k，min-1)、清除半衰期(t1/2，min)以及体外内在清除率(clint，μlmin-1mg-1proteins)由以下方程式计算得到。k＝-slopet1/2＝0.693/kclint＝k/cproteincprotein(mgml-1)指孵育体系中的微粒体蛋白质浓度。从实施例七的结果可以看出，氘代后的咪唑并吡嗪类化合物d1、d2和d3对syk激酶活性有较好的抑制作用，化合物d2对syk激酶活性的抑制作用甚至优于对照物gs-997。实施例八的实验结果表明，氘代后的咪唑并吡嗪类化合物d1和d2的清除常数k和体外内在清除率均小于对照品gs-9973，化合物d1和d2的清除半衰期则高于对照品gs-9973。这些实验数据表明氘代后的咪唑并吡嗪类化合物不仅对syk激酶活性有较好的抑制作用，而且对体外人肝微粒体酶的稳定性明显优于gs-9973，氘代后的咪唑并吡嗪类化合物具有广阔的市场前景。尽管本发明的内容已经通过上述优选实施例作了详细介绍，但应当认识到上述的描述不应被认为是对本发明的限制。在本领域技术人员阅读了上述内容后，对于本发明的多种修改和替代都将是显而易见的。因此，本发明的保护范围应由所附的权利要求来限定。当前第1页12