一种用于抗炎的COX/LOX抑制剂及其制备方法和应用与流程

本发明领域属于药物领域，具体涉及一种用于抗炎的cox/lox抑制剂及其制备方法和应用。

背景技术：

非甾体抗炎药(nsaids)是一类广泛用于抗炎、解热、镇痛的药物，临床上常用于治疗骨关节(oa)、肌肉和软组织的炎症。传统的nsaids如阿司匹林、布洛芬及双氯芬酸都是非选择型cox抑制剂；然而传统的nsaids选择性差，长期服用出现了一些副作用如肠道毒副作用和肾毒性，限制了其在临床上的广泛运用。因此研制出能降低传统nsaids副作用且具良好活性的新型nsaids成为这类药物发展的主要方向。

双重抑制剂通过同时阻断炎症介质前列腺素和白三烯的形成，产生协同的抗炎作用，同时避免cox抑制剂引发的副作用。lox同工酶都是非血红素酶，它的结构中包含了一个具有高还原点位的催化性铁离子。研究表明，铁螯合剂，如邻苯二酚和羟基酸衍生物，能降低铁的电位直到无活性状态，因此能阻止脂肪酸向前炎症脂质介质的转化。

鉴于此，本发明提供了一种新型的用于抗炎的cox/lox抑制剂。

技术实现要素：

针对现有技术中的诸多问题，本发明目的在于提供一种用于抗炎的cox/lox抑制剂及其制备方法和应用。

为了实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：

一种用于抗炎的cox/lox抑制剂，所述抑制剂为式i所示的化合物或其药学上可接受的盐：

其中，r¹为甲基、乙基、苄基、或-ch2och3；

r²为甲基、乙基、-cf3或氰基。

本发明提供了一种简单新型的用于抗炎的cox/lox双重抑制剂，通过同时阻断炎症介质前列腺素和白三烯的形成，产生协同的抗炎作用，同时避免cox抑制剂引起的副作用。药理试验结果显示，在二甲苯导致的耳肿胀试验中，能够明显地减少给药组小鼠的耳肿胀程度，说明本发明的化合物具有抗炎作用，且其作用与阿司匹林相当；另外，药理试验表明本发明的化合物对胃肠道刺激小。

本发明的第二个目的是提供一种上述用于抗炎的cox/lox抑制剂的制备方法，所述式i所示化合物的合成路线如式ii所示：

其中，r¹为甲基、乙基、苄基、-ch2och3或-ch2och2ch3；

r²为甲基、乙基、-cf3或氰基。

在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，所述式ii中化合物b的合成方法如下：

取吡咯、r¹-x、碱性物质加入到溶剂中，于25-80℃(比如30℃、40℃、50℃、60℃、70℃、75℃、78℃)下搅拌1-12小时(比如2小时、3小时、3小时、4小时、5小时、6小时、7小时、8小时、9小时、10小时、11小时)，得到反应液；所述反应液经后处理得到所述式ii中化合物b；其中，x为氯、溴或碘。

在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，所述吡咯与所述r¹-x摩尔比为1：1.01-2.0(比如1：1.1、1：1.2、1：1.3、1：1.4、1：1.5、1：1.6、1：1.7、1：1.8、1：1.9)。

在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，所述吡咯与所述碱性物质的摩尔比为1：1.2-2.0(比如1：1.3、1：1.4、1：1.5、1：1.6、1：1.7、1：1.8、1：1.9)；更优选地，所述碱性物质选自碳酸钠、碳酸钾、醋酸钠、氢氧化钠、氢氧化钾、氢化钠、醋酸钾、三乙胺、吡啶、二异丙基乙基胺中的一种或多种。

在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，所述吡咯与所述溶剂的用量关系为0.1-0.5mol/l(比如0.12mol/l、0.15mol/l、0.2mol/l、0.3mol/l、0.4mol/l、0.45mol/l)；优选地，所述溶剂选自四氢呋喃、二氧六环、二甲基甲酰胺、二甲亚砜、乙醇、二甲基乙酰胺、n-甲基吡咯烷酮中的一种或多种。

在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，在所述式ii中化合物b的合成方法中，所述后处理的操作如下：向所述反应液中加入饱和氯化钠水溶液、有机溶剂进行萃取1-3次，收集有机相后浓缩，浓缩物过柱纯化，收集纯化液减压蒸馏得到所述式ii中化合物b；优选地，所述有机溶剂为二氯甲烷、氯仿、乙醚或乙酸乙酯。

在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，所述式ii中化合物c的合成方法如下：

将所述式ii化合物b、催化剂加入到溶剂中，于室温下搅拌4-10小时(比如5小时、6小时、7小时、8小时、9小时)，得到反应液；所述反应液经后处理得到所述式ii中化合物c。

在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，所述所述式ii中化合物b与的摩尔比为1：1.01-1.5(比如1：1.05、1：1.2、1：1.3、1：1.4、1：1.45)。

在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，所述所述式ii中化合物b与催化剂的摩尔比为1：0.2-1(比如1：0.3、1：0.4、1：0.5、1：0.6、1：0.7、1：0.8、1：0.9)；优选地，所述催化剂为路易斯酸催化剂；更优选地，所述路易斯酸催化剂为三氯化磷、三氯化铝、三氯化铁、或氯化锌。

在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，所述所述式ii中化合物b与所述溶剂的用量关系为0.1-0.5mol/l(比如0.12mol/l、0.15mol/l、0.2mol/l、0.3mol/l、0.4mol/l、0.45mol/l)；优选地，所述溶剂为二氯甲烷或氯仿。

在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，在所述式ii中化合物c的合成方法中，所述后处理步骤如下：向所述反应液中加入饱和氯化钠水溶液、有机溶剂进行萃取1-3次，收集有机相后浓缩，浓缩物过柱纯化，收集纯化液减压蒸馏得到所述式ii中化合物c；优选地，所述有机溶剂为二氯甲烷、氯仿、或乙酸乙酯。

在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，所述式ii中化合物d的合成方法如下：

取所述式ii化合物c、加入到溶剂中，回流条件下搅拌1-2小时，得到反应液；所述反应液经后处理得到所述式ii中化合物d。

在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，所述式ii化合物c与所述摩尔比为1：1.2-2.0(比如1：1.3、1：1.4、1：1.5、1：1.6、1：1.7、1：1.8、1：1.9)。

在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，所述式ii化合物c与所述溶剂的用量关系为0.1-0.5mol/l(比如0.12mol/l、0.15mol/l、0.2mol/l、0.3mol/l、0.4mol/l、0.45mol/l)；优选地，所述溶剂选自甲醇、乙醇、正丙醇、异丙醇、正丁醇、水中的一种或多种。

在上述制备方法中，作为一种优选实施方式，在所述式ii中化合物d的合成方法中，所述后处理步骤如下：将所述反应减压蒸馏得浓缩物，所述浓缩物过柱纯化，收集纯化液减压蒸馏得到所述式ii中化合物d。

本发明的第三个目的是提供一种上述用于抗炎的cox/lox抑制剂在制备用于治疗和预防慢性炎症药物中的应用。

与现有技术相比，本发明具有如下技术效果：

本发明提供的新型用于抗炎的cox/lox抑制剂在二甲苯导致的耳肿胀试验中，能够明显地减少给药组小鼠的耳肿胀程度，说明本发明的化合物具有抗炎作用，且其作用与阿司匹林相当；另外，药理试验表明本发明的化合物对胃肠道刺激小。另一方面，本发明新型用于抗炎的cox/lox抑制剂的制备方法简单易操作，能够有效地降低生产成本来实现工业化生产。

具体实施方式

下面通过具体的实施例对本发明进行详细说明，但这些例举性实施方式并非旨在对本发明的实际保护范围构成任何形式的任何限定。

以下实施例中使用的各种药品、试剂均为市售产品，未特别标注的仪器为常规仪器。

实施例1制备

(1)的合成方法如下：

取吡咯(10mmol)、ch2ch3och2br(11mmol)、氢化钠(12mmol)，加入到20ml二甲基甲酰胺中，于40℃下搅拌5小时，得到反应液；向所述反应液中加入饱和氯化钠水溶液、乙酸乙酯萃取，有机相浓缩后过柱纯化，收集纯化液减压蒸馏得到1.14g(9.1mmol)1-(乙氧基甲基)-1h-吡咯，收率为91％。

(2)的合成方法如下：

取1-(乙氧基甲基)-1h-吡咯(5mmol)、(6mmol)、氯化锌(4mmol)，加入到10ml二氯甲烷中，于室温下搅拌6小时，得到反应液；向所述反应液中加入饱和氯化钠水溶液、乙酸乙酯萃取，有机相浓缩后过柱纯化，收集纯化液减压蒸馏得到772mg(4mmol)(e)-4-(1-(乙氧基甲基)-1h-吡咯-3-基)丁-3-烯-2-酮，收率为80％。

(3)的合成方法如下：

取(e)-4-(1-(乙氧基甲基)-1h-吡咯-3-基)丁-3-烯-2-酮(2mmol)、(2.6mmol)，加入到8ml乙醇中，回流搅拌2小时，得到反应液；反应液减压蒸馏得浓缩物，浓缩物过柱纯化，收集纯化液减压蒸馏得到499.2mg(1.6mmol)(5-(1-(乙氧基甲基)-吡咯-3-基yl)-3-甲基-1-异烟碱酰-4,5-二氢-吡唑，收率为80％。

4-(5-(1-(乙氧基甲基)-1h-吡咯-3-基)-3-甲基-4,5-二氢-1h-吡唑-1-基)苯磺酰胺的质谱：[m+1]⁺＝363；氢谱如下：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)＝¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)＝1.10(t,3h),2.11(s,3h),2.81(d,1h),3.08(d,1h),3.48(q,2h),5.15(t,1h),5.97(s,2h),6.03(s,1h),6.15(d,1h),6.89(d,2h),7.15(d,1h),7.69(d,2h)。

实施例2制备

(1)的合成方法如下：

取吡咯(10mmol)、碘甲烷(11mmol)、氢氧化钠(11mmol)，加入到20ml二甲亚砜中，于室温下搅拌5小时，得到反应液；向所述反应液中加入饱和氯化钠水溶液、乙酸乙酯萃取，有机相浓缩后过柱纯化，收集纯化液减压蒸馏得到753mg(9.3mmol)n-甲基吡咯，收率为93％。

(2)的合成方法如下：

取n-甲基吡咯(5mmol)、(6mmol)、三氯化铝(4mmol)，加入到10ml二氯甲烷中，于室温下搅拌4小时，得到反应液；向所述反应液中加入饱和氯化钠水溶液、乙酸乙酯萃取，有机相浓缩后过柱纯化，收集纯化液减压蒸馏得到852mg(4.2mmol)(e)-1,1,1-三氟甲基-4-(1-甲基-1h-吡咯-3-基)丁-3-烯-2-酮，收率为84％。

(3)的合成方法如下：

取(e)-1,1,1-三氟甲基-4-(1-甲基-1h-吡咯-3-基)丁-3-烯-2-酮(2mmol)、(2.5mmol)，加入到10ml乙醇中，回流搅拌2小时，得到反应液；反应液减压蒸馏得浓缩物，浓缩物过柱纯化，收集纯化液减压蒸馏得到579.6mg(1.8mmol)(5-(1-甲基-吡唑-3-基)-3-三氟甲基-1-异烟碱酰-4,5-二氢-吡唑，收率为90％。

4-(5-(1-甲基-1h-吡咯-3-基)-3-(三氟甲基)-4,5-二氢-1h-吡唑-1-基)苯磺酰胺的质谱：[m+1]⁺＝373；氢谱如下：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)＝¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)＝2.80(d,1h),3.05(d,1h),4.12(s,3h),5.12(t,1h),6.05(s,1h),6.18(d,1h),6.89(d,2h),7.17(d,1h),7.72(d,2h)。

实施例3制备

(1)的合成方法如下：

取吡咯(10mmol)、溴化苄(12mmol)、碳酸钾(15mmol)，加入到25ml四氢呋喃中，于室温下搅拌6小时，得到反应液；向所述反应液中加入饱和氯化钠水溶液、乙酸乙酯萃取，有机相浓缩后过柱纯化，收集纯化液减压蒸馏得到1.49g(9.5mmol)n-苄基吡咯，收率为95％。

(2)的合成方法如下：

取n-苄基吡咯(5mmol)、(6mmol)、氯化锌(4mmol)，加入到10ml氯仿中，于室温下搅拌4小时，得到反应液；向所述反应液中加入饱和氯化钠水溶液、乙酸乙酯萃取，有机相浓缩后过柱纯化，收集纯化液减压蒸馏得到1.06g(4.5mmol)(e)-3-(1-苄基-1h-吡咯-3-基)丙烯酰基氰化物，收率为90％。

(3)的合成方法如下：

取(e)-3-(1-苄基-1h-吡咯-3-基)丙烯酰基氰化物(2mmol)、(2.5mmol)，加入到10ml乙醇中，回流搅拌2小时，得到反应液；反应液减压蒸馏得浓缩物，浓缩物过柱纯化，收集纯化液减压蒸馏得到603.5mg(1.7mmol)5-(1-苄基-吡咯-3-基)-1-异烟碱酰-4,5-二氢-3-氰基吡唑，收率为85％。

4-(5-(1-苄基-1h-吡咯-3-基)-3-氰基-4,5-二氢-1h-吡唑-1-基)苯磺酰胺的质谱：[m+1]⁺＝406；氢谱如下：¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)＝¹hnmr(400mhz,dmso-d6)δ(ppm)＝3.11(d,1h),3.35(d,1h),5.19(t,1h),5.58(s,2h),6.15(s,1h),6.23(d,1h),6.89(d,2h),7.16(d,1h),7.23-7.33(m,5h),7.64(d,2h)。

试验例：根据试验例来炎症本发明用于抗炎的cox/lox抑制剂的抗炎作用。

二甲苯致小鼠耳肿胀试验

取体重20-25g小鼠36只，雌雄各半，随机分为6组，每组6只，第1组为空白对照组，第2组为模型组，第3组为阳性对照组(给予12mg/kg阿司匹林)，给予，第4-6组为本发明药物组(12mg/kg)。第3-6组每天腹腔注射给药，第1-2组给予等体积的生理盐水，连续给药7d，末次给药30min后，立即在第2-6组小鼠右耳正反面均匀涂抹二甲苯各20ul，左耳为对照。1h后乙醚麻醉并脱颈处死，立即沿着耳郭基线剪下双耳，并用点径为9mm的打孔器取相同部位的耳片，于万分之一分析天平上称重，计算肿胀度：肿胀度(mg)＝右耳片重-左耳片重；肿胀抑制率(％)＝(对照组平均耳肿胀度-给药组平均耳肿胀度)/对照组平均耳肿胀度×100％，结果详见表1；并打开小鼠腹腔，在距幽门2cm处结扎，从贲门注入10％甲醛溶液10ml固定10min后沿胃大弯剪开，取出胃及十二指肠，以生理盐水冲洗，展开，置解剖显微镜下测量溃疡面积，采用t检验，比较组间差异的显著性，结果详见表1。

表1各组小鼠耳肿胀度、肿胀抑制率及溃疡面积

由表1可知，本发明的化合物可有效地抑制二甲苯导致耳肿胀，与阿司匹林具有相当的抗炎作用；且本发明的化合物对胃肠道刺激小。

应当理解，这些实施例的用途仅用于说明本发明而非意欲限制本发明的保护范围。此外，也应理解，在阅读了本发明的技术内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动、修改和/或变型，所有的这些等价形式同样落于本发明所附权利要求书所限定的保护范围之内。