技术特征:
技术总结
本发明提供了一种红曲色素高产菌株构建方法。该技术方案首先将一对依次含有Hind III、Kpn I、Sac I、Pac I、Pme I、Xho I、Xba I、Bgl II酶切位点的寡核苷酸序列与植物双元质粒pCambia0380连接,构建得到双元质粒表达载体pCambia0380G;而后,将hph表达盒片段与之连接,获得双元质粒敲除载体pHph0380;在此基础上,分别扩增gltp1基因的上、下游同源臂片段,连接至双元质粒敲除载体pHph0380上,从而获得双元质粒敲除载体pHph0380‑GLTP。将该载体pHph0380‑GLTP由根癌农杆菌EHA105介导转化至亲本红色红曲霉CICC41233中,完成高产菌株的构建。实验验证表明,本发明所构建的红曲色素高产菌株不仅提高了红曲色素的整体产率,而且可定向累积醇溶性色素,同时,使发酵过程中红曲色素的积累时间显著提前。
技术研发人员:龙传南;曾斌;陶琴琴;刘心怡;刘梦梦;彭玲;程芳婷;王淑琴;吾蔚蔚
受保护的技术使用者:江西科技师范大学
技术研发日:2018.12.24
技术公布日:2019.02.22