一种甘氨鹅脱氧胆酸钠精制方法与流程

本发明属于精细化工中的产品纯化技术领域，涉及一种甘氨鹅脱氧胆酸钠精制方法。

背景技术：

甘氨鹅脱氧胆酸钠（glycochenodeoxycholicacidsodium，gcda），是一种胆汁酸盐。近几年，科学家们研究发现，甘氨鹅脱氧胆酸钠不仅仅是一种参与膳食脂类和脂溶性营养素的吸收的天然调节剂，同时是人体内重要的信号分子，参与多个旁分泌和内分泌功能，与脂质和胆固醇水平的平衡有关，控制能量消耗和免疫系统的调节。如甘氨鹅脱氧胆酸钠对肝癌细胞又较强的细胞凋亡诱导作用，可诱导dna清除，可用于肝癌生化和治疗研究。因此，甘氨鹅脱氧胆酸钠在作为药物治疗领域有着广泛的应用前景。

甘氨鹅脱氧胆酸钠用于药物治疗领域的研究，要求其样品纯度不低于98%，杂质可控，已有技术公开的甘氨鹅脱氧胆酸钠的化学合成制备方法得到的甘氨鹅脱氧胆酸钠，以及市场上销售的甘氨鹅脱氧胆酸钠的hplc纯度低于98%。

技术实现要素：

本发明的目的是为了解决现有技术中存在的缺点，而提出的一种甘氨鹅脱氧胆酸钠精制方法。

为了实现上述目的，本发明采用了如下技术方案：

一种甘氨鹅脱氧胆酸钠精制方法，s1，市售甘氨鹅脱氧胆酸钠加入水中，用酸的水溶液调ph值在弱酸性范围，有机溶剂萃取，水相用酸的水溶液调ph值范围到较强酸性，过滤，得到甘氨鹅脱氧胆酸；

s2，甘氨鹅脱氧胆酸和有机碱在溶剂中加热搅拌成盐，冷却过滤，得到甘氨鹅脱氧胆酸有机碱盐；

s3，甘氨鹅脱氧胆酸有机碱盐在溶剂中，用酸水溶液调ph值在较强酸性范围，过滤，洗涤干燥，得到甘氨鹅脱氧胆酸精制品；

s4，甘氨鹅脱氧胆酸精制品在溶剂中，用氢氧化钠水溶液调ph值在中性范围，减压浓缩，干燥，得到甘氨鹅脱氧胆酸钠精制品。

优选的，所述s1，酸选自盐酸、硫酸、中的一种或多种，有机溶剂选自乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙酸甲酯、甲酸乙酯、甲苯、二氯甲烷中的一种或多种。

优选的，所述s1，ph值弱酸性范围选取在5.5~6.0，ph值较强酸性范围选取在1.5~2.0。

优选的，所述s2，有机碱选自三乙胺、二乙胺、二异丙基胺、二异丙基乙基胺中的一种或多种，溶剂选自乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙酸甲酯、甲酸乙酯、异丙醇、正丁醇、叔丁醇、叔戊醇、苯、甲苯、二氯甲烷、四氢呋喃、乙腈1-丁酮、丙酮、甲基异丁基酮（mibk）、二氧六环、四乙二醇二甲醚、甲基叔丁基醚、异丙醚、二乙二醇二甲醚、二苯醚、水、中的一种或多种。

优选的，所述s2，甘氨鹅脱氧胆酸和有机碱的投料量的摩尔比为1:1~1:1.2，加热温度为60~80^oc，搅拌时间为8~12小时。

优选的，所述s3，溶剂选自乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙酸甲酯、甲酸乙酯、异丙醇、正丁醇、叔丁醇、叔戊醇、苯、甲苯、二氯甲烷、四氢呋喃、乙腈1-丁酮、丙酮、甲基异丁基酮（mibk）、甲基叔丁基醚、异丙醚、二乙二醇二甲醚、水中的一种或多种，酸选自盐酸、硫酸、中的一种或多种。

优选的，所述s3，ph值较强酸性范围选取在1.5~2.0。

优选的，所述s4，溶剂选自乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙酸甲酯、甲酸乙酯、异丙醇、正丁醇、叔丁醇、叔戊醇、二氯甲烷、四氢呋喃、乙腈1-丁酮、丙酮、甲基异丁基酮（mibk）、水中的一种或多种。

优选的，所述s4，ph值中性范围选取在6.8~7.2。

与现有技术相比，本发明提出了一种甘氨鹅脱氧胆酸钠精制方法，具有以下有益效果：

1、本发明通过市售的甘氨鹅脱氧胆酸钠原料经过简单的单元操作纯化处理，就可以得到纯度不低于98%的甘氨鹅脱氧胆酸钠，工艺可操作性强，可进行大批量制备。

2、本发明精制过程使用到的溶剂和其他试剂绿色环保，对环境影响小，可持续生产。

3、本发明的方法具有操作简单易行、工艺稳定、易于控制，后处理方便、安全环境友好等优点，可以进行大批量持续生产。

附图说明

图1为本发明精制过程如反应式1图；

图2为本发明实施例1的甘氨鹅脱氧胆酸钠精制品检测的色谱图；

图3为本发明实施例2的甘氨鹅脱氧胆酸钠精制品检测的色谱图；

图4为本发明实施例3的甘氨鹅脱氧胆酸钠精制品检测的色谱图。

具体实施方式

下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。

请参照图1-4，一种甘氨鹅脱氧胆酸钠精制方法，s1，市售甘氨鹅脱氧胆酸钠加入水中，用酸的水溶液调ph值在弱酸性范围，有机溶剂萃取，水相用酸的水溶液调ph值范围到较强酸性，过滤，得到甘氨鹅脱氧胆酸；

s2，甘氨鹅脱氧胆酸和有机碱在溶剂中加热搅拌成盐，冷却过滤，得到甘氨鹅脱氧胆酸有机碱盐；

s3，甘氨鹅脱氧胆酸有机碱盐在溶剂中，用酸水溶液调ph值在较强酸性范围，过滤，洗涤干燥，得到甘氨鹅脱氧胆酸精制品；

s4，甘氨鹅脱氧胆酸精制品在溶剂中，用氢氧化钠水溶液调ph值在中性范围，减压浓缩，干燥，得到甘氨鹅脱氧胆酸钠精制品。

所述s1，酸选自盐酸、硫酸、中的一种或多种，有机溶剂选自乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙酸甲酯、甲酸乙酯、甲苯、二氯甲烷中的一种或多种。

所述s1，ph值弱酸性范围选取在5.5~6.0，ph值较强酸性范围选取在1.5~2.0。

所述s2，有机碱选自三乙胺、二乙胺、二异丙基胺、二异丙基乙基胺中的一种或多种，溶剂选自乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙酸甲酯、甲酸乙酯、异丙醇、正丁醇、叔丁醇、叔戊醇、苯、甲苯、二氯甲烷、四氢呋喃、乙腈1-丁酮、丙酮、甲基异丁基酮（mibk）、二氧六环、四乙二醇二甲醚、甲基叔丁基醚、异丙醚、二乙二醇二甲醚、二苯醚、水、中的一种或多种。

所述s2，甘氨鹅脱氧胆酸和有机碱的投料量的摩尔比为1:1~1:1.2，加热温度为60~80^oc，搅拌时间为8~12小时。

所述s3，溶剂选自乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙酸甲酯、甲酸乙酯、异丙醇、正丁醇、叔丁醇、叔戊醇、苯、甲苯、二氯甲烷、四氢呋喃、乙腈1-丁酮、丙酮、甲基异丁基酮（mibk）、甲基叔丁基醚、异丙醚、二乙二醇二甲醚、水中的一种或多种，酸选自盐酸、硫酸、中的一种或多种。

所述s3，ph值较强酸性范围选取在1.5~2.0。

所述s4，溶剂选自乙酸乙酯、乙酸异丙酯、乙酸甲酯、甲酸乙酯、异丙醇、正丁醇、叔丁醇、叔戊醇、二氯甲烷、四氢呋喃、乙腈1-丁酮、丙酮、甲基异丁基酮（mibk）、水中的一种或多种。

所述s4，ph值中性范围选取在6.8~7.2。

具体实施方式：

实施例1甘氨鹅脱氧胆酸钠精制

如图2，取1kg市售甘氨鹅脱氧胆酸钠，hplc纯度96.6%，加入6kg的水搅拌溶解完全，用浓盐酸调ph值至5.5~6.0，乙酸乙酯萃取三次。水相用浓盐酸调ph值至1.5~2.0，搅拌，过滤，滤饼用水淋洗，干燥，得到918g的甘氨鹅脱氧胆酸。

甘氨鹅脱氧胆酸和三乙胺按1:1.2的摩尔比加入到乙酸乙酯中，加热到80^oc下搅拌10小时，冷却过滤，乙酸乙酯洗涤，干燥，得到1.06kg的甘氨鹅脱氧胆酸三乙胺盐。

甘氨鹅脱氧胆酸三乙胺盐悬浮在丙酮和水中，用浓盐酸调ph值至1.5~2.0，搅拌，过滤，滤饼用水淋洗，干燥，得到892g的甘氨鹅脱氧胆酸精制品。

甘氨鹅脱氧胆酸精制品溶解在甲醇中，用30%的氢氧化钠溶液调ph值至6.8~7.0，减压浓缩，干燥，得到930g甘氨鹅脱氧胆酸钠精制品，hplc纯度98.6%。

实施例2甘氨鹅脱氧胆酸钠精制

如图3，取1kg市售甘氨鹅脱氧胆酸钠，hplc纯度95.2%，加入6kg的水搅拌溶解完全，用乙酸调ph值至5.5~6.0，乙酸乙酯萃取三次。水相用浓盐酸调ph值至1.5~2.0，搅拌，过滤，滤饼用水淋洗，干燥，得到922g的甘氨鹅脱氧胆酸。

甘氨鹅脱氧胆酸和三乙胺按1:1.2的摩尔比加入到乙酸乙酯中，加热到80^oc下搅拌8小时，冷却过滤，乙酸乙酯洗涤，干燥，得到1.04kg的甘氨鹅脱氧胆酸三乙胺盐。

甘氨鹅脱氧胆酸三乙胺盐溶解在水中，用浓盐酸调ph值至1.5~2.0，搅拌，过滤，滤饼用水淋洗，干燥，得到880g的甘氨鹅脱氧胆酸精制品。

甘氨鹅脱氧胆酸精制品溶解在甲醇中，用30%的氢氧化钠溶液调ph值至6.8~7.0，减压浓缩，干燥，得到912g甘氨鹅脱氧胆酸钠精制品，hplc纯度98.4%。

实施例3甘氨鹅脱氧胆酸钠精制

如图4，取1kg市售甘氨鹅脱氧胆酸钠，hplc纯度97.2%，加入6kg的水搅拌溶解完全，用浓盐酸调ph值至5.5~6.0，乙酸乙酯萃取三次。水相用浓盐酸调ph值至1.5~2.0，搅拌，过滤，滤饼用水淋洗，干燥，得到932g的甘氨鹅脱氧胆酸。

甘氨鹅脱氧胆酸和三乙胺按1:1.2的摩尔比加入到丙酮中，加热到60^oc下搅拌12小时，冷却过滤，乙酸乙酯洗涤，干燥，得到1.1kg的甘氨鹅脱氧胆酸三乙胺盐。

甘氨鹅脱氧胆酸三乙胺盐溶解在水中，用浓盐酸调ph值至1.5~2.0，搅拌，过滤，滤饼用水淋洗，干燥，得到910g的甘氨鹅脱氧胆酸精制品。

甘氨鹅脱氧胆酸精制品溶解在甲醇中，用30%的氢氧化钠溶液调ph值至6.8~7.0，减压浓缩，干燥，得到942g甘氨鹅脱氧胆酸钠精制品，hplc纯度99.3%。

实施例4甘氨鹅脱氧胆酸钠精制品纯度检测方法：hplc法

色谱条件与系统适用性试验：用碳十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-ph=7.0的磷酸钾缓冲溶液为流动相；梯度洗脱，流速每分钟1.5ml；uv检测器，检测波长210nm；理论塔板数按甘氨鹅脱氧胆酸钠峰计应不低于3000。

测定法：甘氨鹅脱氧胆酸钠精制品，精密称定，用ph=7.0的磷酸钾缓冲溶液溶解并稀释至每1ml中含甘氨鹅脱氧胆酸钠6mg的溶液，过滤，取滤液作为样品溶液。取样品溶液5μl进样；记录色谱图，面积归一法计算甘氨鹅脱氧胆酸钠纯度。

尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。