一种塞来昔布基因毒性杂质及其制备方法与应用与流程

本发明属于医药技术领域，具体涉及一种塞来昔布基因毒性杂质及其制备方法与应用。

背景技术：

塞来昔布(celecoxib)是一种新型非甾体抗炎药、ii型环氧脂酶(cox-2)抑制剂，表现出优异的抗炎镇痛作用。可用于治疗骨关节炎，类风湿性关节炎，急性疼痛，痛经,强直性脊柱炎等炎症的药物，具有潜在的抗癌活性，1998年12月由fda批准在美国上市，目前国内已有塞来昔布胶囊上市。

塞来昔布(celecoxib)化学名为4-[5-对甲苯基-3-(三氟甲基)吡唑-1-基]苯磺酰胺，结构式如下式所示：

。

药品杂质的研究是药品研发的一项重要内容，杂质研究对建立检测方法、分析杂质含量、并确定合理的杂质限度起到至关重要的作用。

基因毒性杂质是指药物中能直接或间接损伤细胞dna，产生致突变或致癌作用的物质。基因毒性杂质作为工艺杂质的一类，近年来受到国内外的高度重视。欧盟医药管理局（ema）发布了《基因毒性杂质限度指引》，并颁布了36种具有潜在基因毒性的化学结构，旨在对潜在基因毒性杂质的充分研究和有效控制，保障用药安全性。由于其不良影响较大的特性，基因毒性杂质的研究在药品质量研究中尤为关键。综合已有的文献报道，塞来昔布中潜在的基因毒杂质主要有如下所示：

杂质a杂质b杂质c。

不同的原料以及不同的生产工艺制备的塞来昔布产品还存在着其他杂质，因此，还需要对新的杂质进行结构确认、含量控制，以满足药品制备的要求，为其毒理学研究提供基础，同时也为工艺合成条件控制提供参考。

技术实现要素：

本发明提供一种具有式ⅰ所示结构的塞来昔布基因毒性杂质，化学名称为4-(2-氧-5-对甲苯基-3-三氟甲基-吡唑-1-基)-苯磺酰胺，结构如式ⅰ所示，可作为塞来昔布基因毒杂质检测的对照品，用于塞来昔布及其相关制剂的质量研究和检测控制，为了制备上述塞来昔布基因毒性杂质，本发明采用的技术方案如下：

（式ⅰ）。

在塞来昔布药品的制备中，发明人发现如式ⅰ结果所示的塞来昔布基因毒杂质，其结构经核磁共振检测，数据如下：

¹hnmr(dmso-d6400mhz):7.96(d，2h)，7.69（d，2h），7.59（s，2h）,7.18(s，1h)，7.15（s，4h），2.26（s，3h），其中各峰位移±0.2ppm。

本发明还提供一种制备如式ⅰ所示的一种塞来昔布基因毒性杂质的方法，所述方法为基于式ⅱ在溶剂中与氧化剂反应生成权利要求1中式ⅰ的过程：

(式ⅱ)(式ⅰ)。

进一步地，所述氧化剂为双氧水、过氧乙酸或间氯过氧苯甲酸的任一种或其组合。

进一步地，所述溶剂为三氟乙酸、乙酸或水的任一种或其组合。

进一步地，所述一种塞来昔布基因毒性杂质的制备方法，包括以下步骤：

步骤一、将塞来昔布和有机溶剂按重量比1:8-20加入至反应瓶中，搅拌，控制温度﹣5-25℃，再加入1-3倍的氧化剂，继续搅拌，保温4-30h完成反应；

步骤二、将步骤一制备的反应物进行萃取、分液、浓缩后得到粗产品；

步骤三、将步骤二得到的粗产品经过柱层析纯化后得到式i化合物。

进一步地，所述步骤一中加入氧化剂后反应在hplc监控下完成；所述步骤二中采用二氯甲烷作为萃取剂。

进一步地，所述步骤三中过柱层析的洗脱剂为二氯甲烷和甲醇，比例为1:0-40:1。

上述塞来昔布基因毒性杂质在塞来昔布及其相关制剂的质量研究和检测控制方法中的应用。

进一步地，所述应用具体是作为塞来昔布原料药及其相关制剂中基因毒性杂质检测的对照品。

本发明的有益效果如下。

（1）本发明提供一种新型的塞来昔布基因毒性杂质，其化学名称为4-(2-氧-5-对甲苯基-3-三氟甲基-吡唑-1-基)-苯磺酰胺，并提供了其制备方法。

（2）本发明公布的塞来昔布的基因毒杂质制备方法操作简单，反应条件温和，产物纯度高，能够快速地获得塞来昔布基因毒性杂质对照品，有利于塞来昔布的杂质控制和质量研究，从而提高塞来昔布的质量控制水平，降低塞来昔布的毒副作用。

附图说明

图1为塞来昔布基因毒性杂质（式ⅰ）核磁共振氢谱图；

图2为塞来昔布基因毒性杂质（式ⅰ）的高效液相色谱图；

图3为塞来昔布基因毒性杂质（式ⅰ）的质谱图。

具体实施方式

为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合具体实施例，对本发明进行进一步详细说明，但并不视为对本发明的保护范围的限制。

实施例1

将塞来昔布8.0g和三氟乙酸64ml加入反应瓶中，控制温度在15℃以下搅拌反应后加入30%的双氧水8.0ml，加完后保温搅拌反应30小时。hplc监控反应，检测目标产物含量约14%时停止反应，向体系中加入二氯甲烷150ml和纯化水100ml，搅拌10分钟后分液，水相用二氯甲烷80ml萃取，合并有机相，用纯化水100ml洗涤，无水硫酸钠干燥后于20-25℃下减压浓缩去除有机溶剂，得到粗品9.2g。将粗品经过柱层析进行纯化，其中纯化过程中所用洗脱剂为二氯甲烷/甲醇，其比例为1:0-40:1，纯化后得到产物4-(2-氧-5-对甲苯基-3-三氟甲基-吡唑-1-基)-苯磺酰胺321mg，纯度96.2%，产率为4%，其结构经核磁共振检测结果如图1所示，数据如下：¹hnmr(dmso-d6400mhz):7.96(d，2h)，7.69（d，2h），7.59（s，2h）,7.18(s，1h)，7.15（s，4h），2.26（s，3h），其质谱检测结果如图3所示，数据如下：ms(m/z):398.2[m+h]⁺，其高效液相色谱检测结果如图2所示。

实施例2

将塞来昔布5.0g和乙酸45ml加入反应瓶中，控制温度在15℃以下搅拌溶清后加入间氯过氧苯甲酸10.0ml，加完后保温搅拌反应24小时。hplc监控反应，目标产物含量约8.0%时停止反应，向体系中加入二氯甲烷100ml和纯化水80ml，搅拌10分钟后分液，水相用二氯甲烷80ml萃取，合并有机相，用纯化水80ml洗涤，无水硫酸钠干燥后20-25℃减压浓缩去除有机溶剂，得到粗品5.5g。将粗品经过柱层析进行纯化，其中纯化过程中所用洗脱剂为二氯甲烷/甲醇，其比例为1:0-40:1，纯化后得到产物4-(2-氧-5-对甲苯基-3-三氟甲基-吡唑-1-基)-苯磺酰胺180mg，纯度95.1%，产率为3.6%。

实施例3

将塞来昔布成品5.0g和水100ml加入反应瓶中，控制温度在15℃以下搅拌溶清后加入35%过氧乙酸15ml，加完后保温搅拌反应18小时。hplc监控反应，目标产物含量约6.0%时停止反应，向体系中加入二氯甲烷120ml和纯化水100ml，搅拌10分钟后分液，水相用二氯甲烷80ml萃取，合并有机相，用纯化水100ml洗涤，无水硫酸钠干燥后20-25℃减压浓缩去除有机溶剂，得到粗品6.0g。将粗品经过柱层析进行纯化，其中纯化过程中所用洗脱剂为二氯甲烷/甲醇，其比例为1:0-40:1，纯化后得到产物4-(2-氧-5-对甲苯基-3-三氟甲基-吡唑-1-基)-苯磺酰胺120mg，纯度95.8%，产率为2.4%。

以上内容是结合具体的优选实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只限于这些说明。对于本发明所属领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。