本发明属于天然药物制备技术领域，具体涉及一种高纯度大麻二酚的制备方法。
背景技术：
二氢大麻酚(cbd)不溶于水，溶于乙醇、乙醚、石油醚、苯、碱溶液、正己烷、6号溶剂油、二氯甲烷、乙酸乙酯、乙醇、甲醇。熔点67℃、沸点185℃。大麻叶子和花絮中大麻二酚含量较高，大麻二酚可阻碍四氢大麻酚对人体神经系统的影响，并具有抗痉挛、抗风湿关节炎、抗焦虑等药理活性。
目前大麻二酚提取大多采用醇提法、柱层析或单纯超临界萃取等技术，技术相对老旧，且生产效率低，纯度低。
技术实现要素：
针对目前大麻二酚提取工艺流程复杂，提取率及纯度低的问题，本发明提供了一种高纯度大麻二酚的制备方法，包括如下步骤：
1)萃取：以工业大麻为原料，通过超临界二氧化碳流体萃取，获得初提取物；
2)分离：将初提取物经动态轴向压缩工业色谱分离，获得大麻二酚。
进一步地限定，步骤1)所述萃取，具体方法为：将原料烘干后粉碎，过10～100目筛，装入萃取釜内，经萃取后收集萃取馏分，得大麻二酚初提取物；所述萃取温度30～60℃，萃取压力10～35mpa，co2流量10～180l/h，分离釜ⅰ温度为20℃～55℃，分离釜ⅰ压力为5～30mpa，分离釜ⅱ温度为15～35℃，分离釜ⅱ压力为2～18mpa，萃取时间为60～360min；所述原料为工业大麻的花絮和叶片中的一种或两种的混合物。
进一步地限定，步骤1)中所述烘干条件为40℃～90℃条件下烘干6～12h。
进一步地限定，步骤1)中所述烘干后，原料含水量低于3％～5％。
进一步地限定，步骤2)所述分离，具体方法为：将获得的初提取物加入柱层析硅胶填料，加甲醇拌匀后烘干，过动态轴向压缩工业制备色谱柱，进行梯度洗脱，梯度洗脱所用流动相由流动相a与流动相b组成，其中流动相a为正己烷、石油醚、二氯甲烷或氯仿，流动相b为丙酮、乙酸乙酯、甲醇或乙醇；分别收集含大麻二酚成分的主段洗脱液，合并后经浓缩后80-120目滤网或板框压滤机过滤，滤液经回收溶剂后干燥获得大麻二酚结晶。
进一步地限定，步骤2)所述流动相为下述几种情况中的一种：
①正己烷与丙酮的混合物，所述正己烷与丙酮的体积比为(12:1)～(3:1)；
②正己烷与乙酸乙酯的混合物，所述正己烷与乙酸乙酯的体积比为(10:1)～(2:1)；
③正己烷与甲醇的混合物，所述正己烷与甲醇的体积比为(15:1)～(5:1)；
④正己烷与乙醇的混合物，所述正己烷与乙醇的体积比为(12:1)～(4:1)；
⑤二氯甲烷与甲醇的混合物，所述二氯甲烷与甲醇的体积比为(90:1)～(10:1)；
⑥二氯甲烷与乙醇的混合物，所述二氯甲烷与乙醇的体积比为(95:1)～(15:1)；
⑦二氯甲烷与乙酸乙酯的混合物，所述二氯甲烷与乙酸乙酯的体积比为(60:1)～(5:1)；
⑧二氯甲烷与丙酮的混合物，所述二氯甲烷与丙酮的体积比为(80:1)～(20:1)；
⑨石油醚与丙酮的混合物，所述石油醚与丙酮的体积比为(15:1)～(3:1)；
⑩石油醚与乙酸乙酯的混合物，所述石油醚与乙酸乙酯的体积比为(12:1)～(3:1)；
进一步地限定，步骤2)所述柱层析硅胶填料粒径为300～1400目。
进一步地限定，步骤2)所述浓缩为减压浓缩。
进一步地限定，步骤2)所述干燥为冷冻干燥、喷雾干燥或减压干燥。
更进一步地限定，步骤2)冷冻干燥条件：预冻温度-35℃～-45℃，预冻时间7h～9h，隔板温度50℃～60℃，干燥时间28h～32h；喷雾干燥条件为进风温度:70～80℃，雾化压力：28～36psi，物料温度:50～60℃，出风温度：35～50℃；减压干燥条件为真空度-0.09～-0.1mpa，45-60℃，干燥至水分在3％以下。
有益效果
本发明采用超临界二氧化碳萃取与动态轴向压缩(dac)工业制备色谱，两步法相结合的技术，制备获得的大麻二酚纯度可高达98％。
具体实施方式
本发明涉及的仪器、设备或试剂，如无特殊说明，均可通过商业化途径购买获得。
实施例1.高纯度大麻二酚的制备方法。
1)萃取：以工业大麻为原料，通过超临界二氧化碳流体萃取，获得初提取物。具体方法为：将工业大麻的花絮和叶于40℃条件下烘干12h，控制含水量控制在5％，烘干后粉碎，过10目筛，装入萃取釜内；萃取温度30℃，萃取压力10mpa，co2流量10l/h，分离釜ⅰ温度为20℃，分离釜ⅰ压力为5mpa，分离釜ⅱ温度为15℃，分离釜ⅱ压力为2mpa，萃取时间为60min，收集萃取馏分，得大麻二酚初提取物。
2)分离：将初提取物经动态轴向压缩工业色谱分离，获得大麻二酚。具体方法为：将获得的初提取物加入1000目的柱层析硅胶填料，加适量甲醇拌匀后烘干(甲醇用量为能够溶解初提取物，使其与硅胶填料混合即可)过动态轴向压缩工业制备色谱柱，进行梯度洗脱，梯度洗脱所用流动相由流动相a与流动相b组成，其中流动相a为正己烷，流动相b为丙酮；梯度洗脱是指流动相a与流动相b按照(12:1)～(3:1)的体积比例(流动相a与流动相b的体积比从12:1降低至3:1)进行梯度洗脱。分别收集含大麻二酚成分的主段洗脱液，合并后依次经减压浓缩、120目滤网过滤，滤液经减压回收溶剂后，冷冻干燥，条件为预冻温度-35℃，预冻时间7h，隔板温度60℃，干燥时间30h。
本实施例制备方法获得的大麻二酚结晶，经hplc检测纯度95％。
实施例2.高纯度大麻二酚的制备方法。
1)萃取：以工业大麻为原料，通过超临界二氧化碳流体萃取，获得初提取物。具体方法为：将工业大麻的花絮和叶于90℃条件下烘干6h，控制含水量低于3％，烘干后粉碎，过100目筛，装入萃取釜内；萃取温度60℃，萃取压力35mpa，co2流量180l/h，分离釜ⅰ温度为55℃，分离釜ⅰ压力为30mpa，分离釜ⅱ温度为35℃，分离釜ⅱ压力为18mpa，萃取时间为360min，收集萃取馏分，得大麻二酚初提取物。
2)分离：将初提取物经动态轴向压缩工业色谱分离，获得大麻二酚。具体方法为：将获得的初提取物加入1400目的柱层析硅胶填料，加适量甲醇拌匀后烘干(甲醇用量为能够溶解初提取物，使其与硅胶填料混合即可)，过动态轴向压缩工业制备色谱柱，进行梯度洗脱，梯度洗脱所用流动相由流动相a与流动相b组成，其中流动相a为石油醚，流动相b为乙酸乙酯；梯度洗脱是指流动相a与流动相b按照(12:1)～(3:1)的体积比例(流动相a与流动相b的体积比从12:1降低至3:1)进行梯度洗脱。分别收集含大麻二酚成分的主段洗脱液，合并后依次经减压浓缩、板框压滤机过滤，滤液经减压回收溶剂后，喷雾干燥，喷雾干燥条件为进风温度:70℃，雾化压力：36psi，物料温度:60℃，出风温度：50℃。
本实施例制备方法获得的大麻二酚结晶，经hplc检测纯度98％。
实施例3.高纯度大麻二酚的制备方法。
1)萃取：以工业大麻为原料，通过超临界二氧化碳流体萃取，获得初提取物。具体方法为：将工业大麻的花絮和叶于60℃条件下烘干9h，控制含水量低于4％，烘干后粉碎，过50目筛，装入萃取釜内；萃取温度40℃，萃取压力20mpa，co2流量90l/h，分离釜ⅰ温度为30℃，分离釜ⅰ压力为18mpa，分离釜ⅱ温度为20℃，分离釜ⅱ压力为10mpa，萃取时间为200min，收集萃取馏分，得大麻二酚初提取物。
2)分离：将初提取物经动态轴向压缩工业色谱分离，获得大麻二酚。具体方法为：将获得的初提取物加入800目的柱层析硅胶填料，加适量甲醇拌匀后烘干(甲醇用量为能够溶解初提取物，使其与硅胶填料混合即可)，过动态轴向压缩工业制备色谱柱，进行梯度洗脱，梯度洗脱所用流动相由流动相a与流动相b组成，其中流动相a为二氯甲烷，流动相b为丙酮；梯度洗脱是指流动相a与流动相b按照(80:1)～(20:1)的体积比例(流动相a与流动相b的体积比从80:1降低至20:1)进行梯度洗脱。分别收集含大麻二酚成分的主段洗脱液，合并后依次经减压浓缩、80目滤网过滤，滤液经减压回收溶剂后，减压干燥，真空度-0.09mpa，45℃，干燥至水分在3％以下。
本实施例制备方法获得的获得大麻二酚结晶，经hplc检测纯度78％。
实施例4.高纯度大麻二酚的制备方法。
1)萃取：以工业大麻为原料，通过超临界二氧化碳流体萃取，获得初提取物。具体方法为：将工业大麻的花絮和叶于60℃条件下烘干9h，控制含水量低于3％，烘干后粉碎，过50目筛，装入萃取釜内；萃取温度40℃，萃取压力20mpa，co2流量90l/h，分离釜ⅰ温度为30℃，分离釜ⅰ压力为18mpa，分离釜ⅱ温度为20℃，分离釜ⅱ压力为10mpa，萃取时间为300min，收集萃取馏分，得大麻二酚初提取物。
2)分离：将初提取物经动态轴向压缩工业色谱分离，获得大麻二酚。具体方法为：将获得的初提取物加入300目的柱层析硅胶填料，加适量甲醇拌匀后烘干，过动态轴向压缩工业制备色谱柱，进行梯度洗脱，梯度洗脱所用流动相由流动相a与流动相b组成，其中流动相a为氯仿，流动相b为甲醇；梯度洗脱是指流动相a与流动相b按照(95:1)～(20:1)体积比例(流动相a与流动相b的体积比从95:1降低至20:1)进行梯度洗脱。分别收集含大麻二酚成分的主段洗脱液，合并后依次经减压浓缩、板框压滤机过滤，滤液经减压回收溶剂后，减压干燥，真空度-0.09mpa，45℃，干燥至水分在3％以下。
本实施例制备方法获得的获得大麻二酚结晶，经hplc检测纯度74％。