一组用于鉴别紫灵芝和赤灵芝菌种的特异性分子标记及鉴别方法和应用与流程

文档序号:19419324发布日期:2019-12-14 01:15阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一组用于鉴别紫灵芝和赤灵芝菌种的特异性分子标记,其特征在于该特异性分子标记的引物为glmi001、glmi002和glmi003,各引物核苷酸序列如下:

上游引物glmi001-f如seqidno.1所示;

下游引物glmi001-r如seqidno.2所示;

上游引物glmi002-f如seqidno.3所示;

下游引物glmi002-r如seqidno.4所示;

上游引物glmi003-f如seqidno.5所示;

下游引物glmi003-r如seqidno.6所示。

2.一种利用权利要求1所述的用于鉴别紫灵芝和赤灵芝菌种的特异性分子标记的鉴别方法,其特征在于该鉴别方法包括以下步骤:

1)首先提取待测紫灵芝和赤灵芝菌种样本的基因组dna为模板,利用特异性分子标记glmi001、glmi002和glmi003进行pcr扩增得到扩增产物;

2)对步骤1)得到的扩增产物进行电泳检测,若电泳结果分别出现187bp、365bp和168bp的dna条带,则待测样本为紫灵芝菌种;若电泳结果未出现187bp、365bp和168bp的dna条带,则待测样本为赤灵芝菌种。

3.如权利要求2所述的用于鉴别紫灵芝和赤灵芝菌种的特异性分子标记的鉴别方法,其特征在于pcr扩增体系按总体积30μl:10×pcrbuffer(含mg2+)3μl,10mmol/ldntps0.9μl,20μmol/l上游引物0.6μl,20μmol/l下游引物0.6μl,5u/μltaq酶0.5μl,dna模板(50ng/μl)1μl,ddh2o23.4μl。

4.如权利要求2所述的用于鉴别紫灵芝和赤灵芝菌种的特异性分子标记的鉴别方法,其特征在于pcr反应过程为:94℃预变性5分钟;30个循环:94℃变性30秒,glmi001退火温度为54℃、glmi002退火温度为60℃、glmi003退火温度为61℃,复性45秒,72℃延伸90秒;最后72℃延伸10分钟。

5.权利要求1所述的用于鉴别紫灵芝和赤灵芝菌种的特异性分子标记glmi001、glmi002和glmi003在紫灵芝和赤灵芝菌种鉴定中的应用。


技术总结
本发明公开了一组用于鉴别紫灵芝和赤灵芝菌种的分子标记,上游引物GLMI001‑F、GLMI002‑F及GLMI003‑F核苷酸序列分别如SEQ.ID No1、SEQ.ID No3、SEQ.ID No5所示,下游引物GLMI001‑R、GLMI002‑R及GLMI003‑R核苷酸序列分别如SEQ.ID No2、SEQ.ID No4及SEQ.ID No6所示。本特异性分子标记GLMI001、GLMI002和GLMI003用于紫灵芝和赤灵芝菌种的鉴定检测,规范灵芝菌种市场,检测掺假行为,保证灵芝药材安全;还可用于灵芝产品的检测,对于保证灵芝种质纯度,提高生产效率,具有很大的应用潜力和较好的经济价值。

技术研发人员:卢江杰;刘玉洋;孟一君;何金宇;李振皓;王慧中;亢介玉
受保护的技术使用者:杭州师范大学;浙江寿仙谷植物药研究院有限公司
技术研发日:2019.09.26
技术公布日:2019.12.13
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