本发明涉及黄苷酸二钠制备技术领域，具体为一种黄苷酸二钠的制备方法。
背景技术：
5’-黄苷酸是核酸生物合成过程中的一个中间体，其在动物和植物体中有重要的生理学意义，被用于食品、医疗和其他各领域。5’-黄苷酸是嘌呤核苷生物合成过程中的一个中间产物。被广泛用于生产具有高纯度的5’-鸟苷酸的方法是微生物发酵方法，该发酵方法首先生产5’-黄苷酸，然后通过酶促将其转化成5’-鸟苷酸。
生产5’-黄苷酸的传统方法包括化能合成、核糖核酸在酵母中分解所产生的5’-鸟苷酸的脱氨基作用、向发酵培养基中添加黄嘌呤作为前体材料的发酵方法、使用微生物的突变菌株的发酵方法、添加抗生素材料的方法等，在这些方法中，通过微生物的突变菌株对5’-黄苷酸直接发酵的方法比较普遍。但是，微生物发酵法存在生产过程中含有大量杂质，不易分离，产品纯度不高。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种黄苷酸二钠的制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种黄苷酸二钠的制备方法,包括以下步骤：
a、将5’-鸟苷酸二钠、亚硝酸钠和去离子水混合，滴加酸和/或酸酐，并在滴加结束后继续反应0－6小时，得到反应溶液1；
b、当鸟苷酸残留量低于1.0％时，调节反应溶液1的ph值至7.0－8.5，得到反应溶液2；
c、将反应溶液2和95v/v％乙醇混合，结晶、过滤，得到5’-黄苷酸二钠粗品；
d、将5’-黄苷酸粗品经上柱、结晶、过滤、干燥后，得到5’-黄苷酸二钠。
优选的，所述步骤a中混合物在反应釜中搅拌，搅拌速率为80-120转/分，时间为4min-8min。
优选的，所述步骤c中混合液在混合罐中搅拌混合，混合速率为40-80转/分，时间为12min-16min。
优选的，所述步骤d中干燥温度为80-120℃，时间为10min-16min。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明提供的制备工艺简单，采用了“一锅煮法”，操作方便，反应体系中杂质简单，易于纯化，得到的产品纯度高，品质好。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例一：
本发明提供如下技术方案：一种黄苷酸二钠的制备方法,包括以下步骤：
a、将5’-鸟苷酸二钠、亚硝酸钠和去离子水混合，滴加酸和/或酸酐，并在滴加结束后继续反应1小时，得到反应溶液1；
b、当鸟苷酸残留量低于1.0％时，调节反应溶液1的ph值至7.0－8.5，得到反应溶液2；
c、将反应溶液2和95v/v％乙醇混合，结晶、过滤，得到5’-黄苷酸二钠粗品；
d、将5’-黄苷酸粗品经上柱、结晶、过滤、干燥后，得到5’-黄苷酸二钠。
本实施例中，步骤a中混合物在反应釜中搅拌，搅拌速率为80转/分，时间为4min。
本实施例中，步骤c中混合液在混合罐中搅拌混合，混合速率为40转/分，时间为12min。
本实施例中，步骤d中干燥温度为80℃，时间为16min。
实施例二：
一种黄苷酸二钠的制备方法,包括以下步骤：
a、将5’-鸟苷酸二钠、亚硝酸钠和去离子水混合，滴加酸和/或酸酐，并在滴加结束后继续反应6小时，得到反应溶液1；
b、当鸟苷酸残留量低于1.0％时，调节反应溶液1的ph值至7.0－8.5，得到反应溶液2；
c、将反应溶液2和95v/v％乙醇混合，结晶、过滤，得到5’-黄苷酸二钠粗品；
d、将5’-黄苷酸粗品经上柱、结晶、过滤、干燥后，得到5’-黄苷酸二钠。
本实施例中，步骤a中混合物在反应釜中搅拌，搅拌速率为120转/分，时间为8min。
本实施例中，步骤c中混合液在混合罐中搅拌混合，混合速率为80转/分，时间为16min。
本实施例中，步骤d中干燥温度为120℃，时间为10min。
实施例三：
一种黄苷酸二钠的制备方法,包括以下步骤：
a、将5’-鸟苷酸二钠、亚硝酸钠和去离子水混合，滴加酸和/或酸酐，并在滴加结束后继续反应2小时，得到反应溶液1；
b、当鸟苷酸残留量低于1.0％时，调节反应溶液1的ph值至7.0－8.5，得到反应溶液2；
c、将反应溶液2和95v/v％乙醇混合，结晶、过滤，得到5’-黄苷酸二钠粗品；
d、将5’-黄苷酸粗品经上柱、结晶、过滤、干燥后，得到5’-黄苷酸二钠。
本实施例中，步骤a中混合物在反应釜中搅拌，搅拌速率为85转/分，时间为5min。
本实施例中，步骤c中混合液在混合罐中搅拌混合，混合速率为45转/分，时间为3min。
本实施例中，步骤d中干燥温度为85℃，时间为11min。
实施例四：
一种黄苷酸二钠的制备方法,包括以下步骤：
a、将5’-鸟苷酸二钠、亚硝酸钠和去离子水混合，滴加酸和/或酸酐，并在滴加结束后继续反应5小时，得到反应溶液1；
b、当鸟苷酸残留量低于1.0％时，调节反应溶液1的ph值至7.0－8.5，得到反应溶液2；
c、将反应溶液2和95v/v％乙醇混合，结晶、过滤，得到5’-黄苷酸二钠粗品；
d、将5’-黄苷酸粗品经上柱、结晶、过滤、干燥后，得到5’-黄苷酸二钠。
本实施例中，步骤a中混合物在反应釜中搅拌，搅拌速率为115转/分，时间为7min。
本实施例中，步骤c中混合液在混合罐中搅拌混合，混合速率为75转/分，时间为15min。
本实施例中，步骤d中干燥温度为115℃，时间为15min。
实施例五：
一种黄苷酸二钠的制备方法,包括以下步骤：
a、将5’-鸟苷酸二钠、亚硝酸钠和去离子水混合，滴加酸和/或酸酐，并在滴加结束后继续反应2小时，得到反应溶液1；
b、当鸟苷酸残留量低于1.0％时，调节反应溶液1的ph值至7.0－8.5，得到反应溶液2；
c、将反应溶液2和95v/v％乙醇混合，结晶、过滤，得到5’-黄苷酸二钠粗品；
d、将5’-黄苷酸粗品经上柱、结晶、过滤、干燥后，得到5’-黄苷酸二钠。
本实施例中，步骤a中混合物在反应釜中搅拌，搅拌速率为90转/分，时间为7min。
本实施例中，步骤c中混合液在混合罐中搅拌混合，混合速率为50转/分，时间为15min。
本实施例中，步骤d中干燥温度为95℃，时间为12min。
实施例六：
一种黄苷酸二钠的制备方法,包括以下步骤：
a、将5’-鸟苷酸二钠、亚硝酸钠和去离子水混合，滴加酸和/或酸酐，并在滴加结束后继续反应4小时，得到反应溶液1；
b、当鸟苷酸残留量低于1.0％时，调节反应溶液1的ph值至7.0－8.5，得到反应溶液2；
c、将反应溶液2和95v/v％乙醇混合，结晶、过滤，得到5’-黄苷酸二钠粗品；
d、将5’-黄苷酸粗品经上柱、结晶、过滤、干燥后，得到5’-黄苷酸二钠。
本实施例中，步骤a中混合物在反应釜中搅拌，搅拌速率为105转/分，时间为7min。
本实施例中，步骤c中混合液在混合罐中搅拌混合，混合速率为55转/分，时间为14min。
本实施例中，步骤d中干燥温度为105℃，时间为12min。
实施例七：
一种黄苷酸二钠的制备方法,包括以下步骤：
a、将5’-鸟苷酸二钠、亚硝酸钠和去离子水混合，滴加酸和/或酸酐，并在滴加结束后继续反应5小时，得到反应溶液1；
b、当鸟苷酸残留量低于1.0％时，调节反应溶液1的ph值至7.0－8.5，得到反应溶液2；
c、将反应溶液2和95v/v％乙醇混合，结晶、过滤，得到5’-黄苷酸二钠粗品；
d、将5’-黄苷酸粗品经上柱、结晶、过滤、干燥后，得到5’-黄苷酸二钠。
本实施例中，步骤a中混合物在反应釜中搅拌，搅拌速率为98转/分，时间为7min。
本实施例中，步骤c中混合液在混合罐中搅拌混合，混合速率为65转/分，时间为4min。
本实施例中，步骤d中干燥温度为108℃，时间为12min。
实施例八：
一种黄苷酸二钠的制备方法,包括以下步骤：
a、将5’-鸟苷酸二钠、亚硝酸钠和去离子水混合，滴加酸和/或酸酐，并在滴加结束后继续反应3小时，得到反应溶液1；
b、当鸟苷酸残留量低于1.0％时，调节反应溶液1的ph值至7.0－8.5，得到反应溶液2；
c、将反应溶液2和95v/v％乙醇混合，结晶、过滤，得到5’-黄苷酸二钠粗品；
d、将5’-黄苷酸粗品经上柱、结晶、过滤、干燥后，得到5’-黄苷酸二钠。
本实施例中，步骤a中混合物在反应釜中搅拌，搅拌速率为100转/分，时间为6min。
本实施例中，步骤c中混合液在混合罐中搅拌混合，混合速率为60转/分，时间为14min。
本实施例中，步骤d中干燥温度为100℃，时间为13min。
实验例：
在干燥的1000m1四口瓶中，安装尾气吸收装置，机械搅拌装置，物料滴加装置。加入50g5’-鸟苷酸二钠，150m1去离子水，搅拌溶解。加入25g亚硝酸钠，搅拌溶解。开始滴加醋酸，共加入醋酸50ml，滴加完醋酸后，继续反应3小时，整个过程控制温度在50℃以下。取样采用hplc法检测，5’-鸟苷酸二钠的残留量为0.29％。用液碱调节反应液的ph值至7.0～8.5，加入3倍量的95％乙醇结晶，过滤，得5’-黄苷酸二钠粗品。将向上述粗品中加入50ml水混合，上201*7型阴离子交换树脂纯化，用氯化钠溶液分步洗脱，得到5’-黄苷酸洗脱液，用氢氧化钠条件ph值至7.0～8.5，加入95％乙醇结晶，过滤、烘干，得5’-黄苷酸二钠产品。hplc:99.2％。
综上所述，本发明提供的制备工艺简单，采用了“一锅煮法”，操作方便，反应体系中杂质简单，易于纯化，得到的产品纯度高，品质好。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。