1.一种高度多孔明胶微球制备方法,其特征在于:edc(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)和nhs(n-羟基琥珀酰亚胺)与明胶微球冷冻交联形成具有优良生物相容性的高度多孔明胶微球,制备方法如下:
s1:15%明胶溶液缓慢倒入含有石蜡油和食用油的250ml烧杯中,在恒温磁力搅拌器上磁子加热搅拌,磁子冷却搅拌,静置5min;
s2:微球与油出现分层,将油倒掉,由于微球周围还有大量油,将其倒入筛子中用二氧六环和丙酮冲洗干净,用20ml无水乙醇洗三次,用50目和150目的筛子分选出目的微球,在无水乙醇中储存备用;
s3:制备的明胶微球置入含有50mmedc和25mmnhs50mlpbs溶液中(4-0℃,最好0℃),置入液氮中3min,放入-20℃冰箱,冷冻交联12h解冻(重复冷冻交联一次),用0℃无菌双蒸水冲洗一遍,沉淀5分钟,使水刚好摸过微球,-20℃冷冻,冻干得多孔微球(重复2次,每次浸透微球,注意此步骤一定要在冰上进行);
s4:微球内部有5-80um的孔径,大部分在10-40um,可在水中快速溶胀;
s5:石蜡油和食用油要充分混匀,55℃预热30min,15%明胶溶液20ml,石蜡油60ml,食用油20ml比例为1:3:1;
s6:磁子加热搅拌700r/min55℃,30min;磁子冷却搅拌700r/min,30min。
2.根据权利要求1所述的一种高度多孔明胶微球制备方法,其特征在于:微球与油出现分层,将油倒掉,由于微球周围还有大量油,然后将其倒入150目的筛子中,用20ml二氧六环冲洗掉微球周围大量的油,然后将筛子中的微球转移到含有10ml二氧六环的250ml的烧杯中浸泡30min,倒掉二氧六环,加入10ml丙酮浸泡30min,重复3次。
3.根据权利要求1所述的一种高度多孔明胶微球制备方法,其特征在于:制备多孔明胶微球的过程要在冰上进行,防止微球融化。
4.根据权利要求2所述的一种高度多孔明胶微球制备方法,其特征在于:所述二氧六环和丙酮放入4℃遇冷,二氧六环不要重复使用,丙酮可重复使用,此步骤一定要在通风橱里操作。
5.根据权利要求1所述的一种高度多孔明胶微球制备方法,其特征在于:明胶溶液中可以加入羟基磷灰石等材料。