一种高度多孔明胶微球的制作方法

文档序号:21275175发布日期:2020-06-26 23:12阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种高度多孔明胶微球制备方法,其特征在于:edc(1-(3-二甲氨基丙基)-3-乙基碳二亚胺盐酸盐)和nhs(n-羟基琥珀酰亚胺)与明胶微球冷冻交联形成具有优良生物相容性的高度多孔明胶微球,制备方法如下:

s1:15%明胶溶液缓慢倒入含有石蜡油和食用油的250ml烧杯中,在恒温磁力搅拌器上磁子加热搅拌,磁子冷却搅拌,静置5min;

s2:微球与油出现分层,将油倒掉,由于微球周围还有大量油,将其倒入筛子中用二氧六环和丙酮冲洗干净,用20ml无水乙醇洗三次,用50目和150目的筛子分选出目的微球,在无水乙醇中储存备用;

s3:制备的明胶微球置入含有50mmedc和25mmnhs50mlpbs溶液中(4-0℃,最好0℃),置入液氮中3min,放入-20℃冰箱,冷冻交联12h解冻(重复冷冻交联一次),用0℃无菌双蒸水冲洗一遍,沉淀5分钟,使水刚好摸过微球,-20℃冷冻,冻干得多孔微球(重复2次,每次浸透微球,注意此步骤一定要在冰上进行);

s4:微球内部有5-80um的孔径,大部分在10-40um,可在水中快速溶胀;

s5:石蜡油和食用油要充分混匀,55℃预热30min,15%明胶溶液20ml,石蜡油60ml,食用油20ml比例为1:3:1;

s6:磁子加热搅拌700r/min55℃,30min;磁子冷却搅拌700r/min,30min。

2.根据权利要求1所述的一种高度多孔明胶微球制备方法,其特征在于:微球与油出现分层,将油倒掉,由于微球周围还有大量油,然后将其倒入150目的筛子中,用20ml二氧六环冲洗掉微球周围大量的油,然后将筛子中的微球转移到含有10ml二氧六环的250ml的烧杯中浸泡30min,倒掉二氧六环,加入10ml丙酮浸泡30min,重复3次。

3.根据权利要求1所述的一种高度多孔明胶微球制备方法,其特征在于:制备多孔明胶微球的过程要在冰上进行,防止微球融化。

4.根据权利要求2所述的一种高度多孔明胶微球制备方法,其特征在于:所述二氧六环和丙酮放入4℃遇冷,二氧六环不要重复使用,丙酮可重复使用,此步骤一定要在通风橱里操作。

5.根据权利要求1所述的一种高度多孔明胶微球制备方法,其特征在于:明胶溶液中可以加入羟基磷灰石等材料。


技术总结
本发明公开了一种高度多孔明胶微球的制备方法,以EDC(1‑(3‑二甲氨基丙基)‑3‑乙基碳二亚胺盐酸盐)和NHS(N‑羟基琥珀酰亚胺)与明胶微球冷冻交联形成具有优良生物相容性的高度多孔明胶微球此水凝胶,采用冷冻交联,冻干的方法合成的高度多孔微球,具有良好的生物相容性,其内部含有多孔,细胞将被更深入地迁移到支架中且由于微球吸水可以将外部营养吸收到微球内部,多孔微球内部细胞可以利用其营养不易死亡,同时利用细胞外基质将各个微球黏附在一起,可以作为组织工程/修复支架材料等,在生物医学材料领域有广泛的用途。

技术研发人员:孙鹏;董作祥;范长江;占树华
受保护的技术使用者:青岛大学附属医院
技术研发日:2020.03.25
技术公布日:2020.06.26
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