用于鉴别中国马鹿和赤鹿的SNP标记及检测引物对、试剂盒和应用的制作方法

文档序号:21407949发布日期:2020-07-07 14:42阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种用于鉴别中国马鹿和赤鹿的snp标记,其特征是,所述snp标记包括5个snp标记位点:s-1、s-2、s-3、s-4、s-5;

所述s-1表示该snp位点位于seqidno.3所示核苷酸序列第65bp处,该处核苷酸序列为g/a;

所述s-2表示该snp位点位于seqidno.3所示核苷酸序列第139bp处,该处核苷酸序列为c/t;

所述s-3表示该snp位点位于seqidno.3所示核苷酸序列第208bp处,该处核苷酸序列为t/c;

所述s-4表示该snp位点位于seqidno.3所示核苷酸序列第286bp处,该处核苷酸序列为a/g;

所述s-5表示该snp位点位于seqidno.3所示核苷酸序列第418bp处,该处核苷酸序列为t/c。

2.如权利要求1所述的用于鉴别中国马鹿和赤鹿的snp标记,其特征是,所述5个snp标记位点位于鹿mtdna基因组的cox3基因上。

3.如权利要求1所述的用于鉴别中国马鹿和赤鹿的snp标记,其特征是,所述5个snp标记所在dna片段可由序列如seqidno.1和seqidno.2所示的引物扩增得到。

4.如权利要求1所述的用于鉴别中国马鹿和赤鹿的snp标记,其特征是,当所述snp标记s-1~s-5位点的碱基分别是g、c、t、a、t,为赤鹿;当所述snp标记s-1~s-5位点的碱基分别是a、t、c、g、c,为中国马鹿。

5.一种用于鉴别中国马鹿和赤鹿的引物对,其特征是,所述引物对的序列如seqidno.1和seqidno.2所示。

6.如权利要求5所述用于鉴别中国马鹿和赤鹿的引物对,其特征是,用所述引物对扩增待测样品,若扩增得到的片段序列的第65bp处、第139bp处、第208bp处、第286bp处、第418bp处的碱基,分别为g、c、t、a、t,则待测样品为赤鹿;若分别为a、t、c、g、c,则待测样品为中国马鹿。

7.权利要求1所述的snp标记或权利要求5所述的引物对在鉴别中国马鹿和赤鹿中的应用。

8.权利要求1所述的snp标记或权利要求5所述的引物对在制备试剂盒或在检测方法中的应用,其特征在于,所述试剂盒或检测方法的用途为鉴别中国马鹿和赤鹿。

9.一种鉴别中国马鹿和赤鹿的方法,其特征是,所述方法是:提取待测样本dna,用seqidno.1和seqidno.2所示引物对进行pcr扩增;对pcr产物进行测序,根据snp标记位点碱基即可鉴别待测样品是赤鹿还是中国马鹿。

10.一种鉴别中国马鹿和赤鹿的试剂盒,其特征是,所述试剂盒包括权利要求5所述的引物对。


技术总结
本发明提供一种用于鉴别中国马鹿和赤鹿的SNP标记及检测引物对、试剂盒和应用。本发明提供了准确鉴别中国马鹿和赤鹿的5个特异性SNP位点,及一对鉴别引物,并建立了准确可靠的检测方法。本发明方法具有很好的特异性、稳定性和高灵敏度,检测限为0.25ng/ul。本发明首次将分子标记的技术应用于鉴别中国马鹿和赤鹿,有效避免了因外观形态难以区分造成的经济损失。用本发明方法检测了市场上100个鹿茸及副产品,准确率为100%。本发明简化了鉴别程序,操作简单,易于掌握,推广性强。弥补了本领域目前尚无精准鉴别中国马鹿与赤鹿产品的检测技术的不足,实现对中国马鹿与赤鹿产品的精准鉴别。

技术研发人员:邢秀梅;朱燕敏;王天骄;刘华淼;董依萌
受保护的技术使用者:中国农业科学院特产研究所
技术研发日:2020.05.16
技术公布日:2020.07.07
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