微流控芯片的制作方法

1.本发明涉及细胞分选技术领域，特别是涉及一种微流控芯片。


背景技术：

2.癌症在全球正常死因中排名第二，每6人中就有1人死于癌症。肿瘤转移是引起癌症90％的死亡原因。肿瘤转移过程就是肿瘤细胞从原发灶或转移灶上脱落，在淋巴系统或外周血中循环，从而入侵远端的组织，并形成新的肿瘤灶，最终导致患者死亡。这些脱落下来的肿瘤细胞就称为循环肿瘤细胞(circulating tumor cell,ctc)。因而通过检查血液中循环肿瘤细胞的数量和种类，即可监测肿瘤病变的动态变化，评估治疗效果。对分离出来的循环肿瘤细胞进行免疫分型、基因组测序等分析，可以找到药物靶点，从而实现个性化精准治疗。循环肿瘤细胞对于肿瘤早期筛查也极为重要，肿瘤在1-2毫米时，影像学等手段很难检测出来。但是在很多中癌症的早期阶段，血液中就含有一定数量的循环肿瘤细胞。对于一些有高风险患者，定期的进行循环肿瘤细胞检测，有助于癌症的早发现，早治疗，避免病情恶化。因此，从血液中分选和富集循环肿瘤细胞显得尤为重要，但是循环肿瘤细胞含量极低。
3.分选和富集循环肿瘤细胞的技术大致分为：免疫磁珠法、密度梯度离心法、膜过滤法、微流控芯片技术。其中，微流控芯片技术将样品导入微流控芯片的流道内，利用物理原理对样品中的不同粒子进行分离，微流控芯片的流道如螺旋流道或线性弧形流道，但传统的螺旋通道制造难度大且导致微流控芯片尺寸较大，而且循环肿瘤细胞的回收纯度低；而传统的线性弧形流道往往需要设置较长的管道才能使粒子惯性聚集，导致微流控芯片尺寸较大，而且聚集成带的循环肿瘤细胞与白细胞容易重叠，也会导致循环肿瘤细胞的回收纯度低。


技术实现要素：

4.基于此，有必要针对上述的问题，提供一种微流控芯片，不仅能缩短流道长度，而且能提高回收的循环肿瘤细胞的纯度。
5.一种微流控芯片，包括功能板，所述功能板上设有：
6.过渡流道，所述过渡流道的一端用于与入口流道连接，所述过渡流道垂直其延伸方向上的宽度大于所述入口流道垂直其延伸方向上的宽度；
7.分选流道，所述分选流道与所述过渡流道的另一端连接，所述分选流道垂直其延伸方向上的宽度大于所述过渡流道垂直其延伸方向上的宽度，且所述分选流道的一侧挖设有加深流道，所述加深流道沿所述分选流道延伸方向设置，所述加深流道的深度大于所述分选流道的深度。
8.使用上述微流控芯片进行粒子如血液中循环肿瘤细胞的分选时，样品从入口流道进入后依次流入过渡流道与分选流道，由于惯性升力、迪恩曳力等的受力影响，红细胞的直径较小，在入口流道中混乱无序的流动，而白细胞和循环肿瘤细胞的直径较大，在入口流道
中作用力的平衡下，会初步聚集成带；由于分选流道的宽度往往比入口流道的宽度大较多，通过设置宽度小于分选流道的过渡流道使样品由入口流道过渡到分选流道，起到缓冲作用，避免样品由较小流道突然进入较宽流道，扰乱原来粒子的运动轨迹，避免破坏粒子原来的惯性聚集轨迹，也避免需要流过更长的大宽度的分选流道后才能使得粒子贴近流道内壁聚集成细带；粒子经过渡流道流入分选流道内，此时直径大的粒子如循环肿瘤细胞刚聚体成细带，并靠近分选流道内壁底部，而直径稍小的粒子如白细胞还未聚集于管道内壁底部，但白细胞和循环肿瘤细胞聚集的带靠得很近，通过在分选流道中远离循环肿瘤细胞聚集的一侧挖设有加深流道，加深流道沿所述分选流道延伸方向设置且所述加深流道的深度大于所述分选流道的深度，打乱了分选流道外壁附近的液体流动状态，使得惯性升力与迪恩曳力改变，破坏原有的平衡，从而使得白细胞能产生无序的运动状态，进而使得白细胞在分选流道中分布更加均匀，避免白细胞聚体的带和循环肿瘤细胞重叠，同理直径小的粒子如红细胞也分布得更加均匀，既保证了不干扰循环肿瘤细胞的聚体，也防止了白细胞聚集于分选流道内壁底部，便于后续把循环肿瘤细胞与白细胞分离开，利于循环肿瘤细胞的回收。该微流控芯片中通过设计宽度小于分选流道的过渡流道，同时在分选流道中设计深度大于分选流道的加深流道，便于样品中的粒子在进入分选流道前能在较短的流道长度下惯性聚集成带，在大粒子如循环肿瘤细胞与中粒子白细胞未完全重叠前，在远离循环肿瘤细胞的一侧开设加深流道扰乱白细胞的运动状态，不仅能缩短流道整体长度，而且能提高回收的循环肿瘤细胞的纯度。
9.在其中一实施例中，所述过渡流道包括交替设置的第一弯管单元与第二弯管单元，所述第一弯管单元的曲率半径大于所述第二弯管单元的曲率半径；
10.所述分选流道包括交替设置的第三弯管单元与第四弯管单元，所述第三弯管单元的曲率半径大于所述第四弯管单元的曲率半径,最末端的第二弯管单元与最始端的所述第三弯管单元连接；其中所述第一弯管单元垂直其延伸方向上的宽度为a，所述第三弯管单元垂直其延伸方向上的宽度为b，a《b。
11.在其中一实施例中，第一弯管单元包括相对设置的第一侧壁与第二侧壁，所述第一侧壁与第二侧壁为非对称的曲面，第二弯管单元包括相对设置的第三侧壁与第四侧壁，所述第三侧壁与第四侧壁为非对称的曲面，所述第三侧壁与所述第二侧壁连接，所述第四侧壁与所述第一侧壁连接；
12.所述第三弯管单元包括相对设置的第五侧壁与第六侧壁，所述第五侧壁与第六侧壁为非对称的曲面，第四弯管单元包括相对设置的第七侧壁与第八侧壁，所述第七侧壁与第八侧壁为非对称的曲面，所述第五侧壁与所述第八侧壁连接，所述第六侧壁与第七侧壁连接；
13.所述第一弯管单元与第二弯管单元朝不同的方向凸出设置，所述第三弯管单元与第四弯管单元朝不同的方向凸出设置，且所述第一弯管单元与所述第三弯管单元朝相同的方向凸出设置。
14.在其中一实施例中，所述第三侧壁的曲率半径小于所述第四侧壁的曲率半径，所述第七侧壁的曲率半径小于所述第八侧壁的曲率半径，所述加深流道设置在靠近所述第八侧壁的一侧。
15.在其中一实施例中，所述第一侧壁的曲率半径小于所述第二侧壁的曲率半径，所
述第五侧壁的曲率半径大于第六侧壁的曲率半径。
16.在其中一实施例中，b比a大0.4mm-1.2mm；或者b比a大0.7mm-0.9mm。
17.在其中一实施例中，所述加深流道的深度比所述分选流道的深度大50μm-200μm；或者所述加深流道的深度比所述分选流道的深度大70μm-120μm。
18.在其中一实施例中，所述功能板上还设有第一转弯流道，所述第一转弯流道的曲率半径大于所述分选流道的曲率半径，所述第一转弯流道与所述分选流道流通，所述加深流道对应地延伸至所述第一转弯流道中。
19.在其中一实施例中，所述功能板上还设有去除流道，所述去除流道与所述第一转弯流道远离分选流道的一端连通，所述加深流道对应地延伸至所述去除流道中，所述去除流道中开设有贯穿所述去除流道壁面的分流孔。
20.在其中一实施例中，沿所述去除流道的延伸方向依次设有多个分流孔，所述功能板上与所述去除流道所在侧面相对的侧面设有多个呈往复回折结构的缓冲流道，所述缓冲流道与所述分流孔一一对应连通；所述去除流道中对应所述分流孔入口处设有阻挡件，且所述阻挡件位于所述分流孔远离所述加深流道的一侧，所述阻挡件沿所述去除流道的延伸方向的宽度大于所述分流孔的直径。
21.在其中一实施例中，所述功能板上还设有第二转弯流道，所述第二转弯流道的曲率半径大于所述去除流道的曲率半径，所述第二转弯流道与所述去除流道远离所述第一转弯流道的一端连通，所述加深流道对应地延伸至所述第二转弯流道中；
22.所述第二转弯流道远离所述去除流道的一端设有相互独立的回收流道与废液流道，所述废液流道与所述第二转弯流道中靠近加深流道的一侧连通，所述回收流道与所述第二转弯流道中远离加深流道的一侧连通。
23.在其中一实施例中，所述的微流控芯片还包括上盖板与下盖板，所述上盖板与所述功能板的其中一侧面叠置连接，所述下盖板与所述功能板的另一侧面叠置连接，所述功能板上所述分选流道所在侧面设有入口流道，所述上盖板上开设有与所述入口流道连通的样品入口，所述下盖板上开设与所述回收流道连通的回收孔、与所述废液流道连通的废液孔以及与所述缓冲流道连通的排出孔，所述回收管道及废液管道均呈往复回折结构。
附图说明
24.图1为一实施例中微流控芯片的上盖板的示意图；
25.图2为一实施例中微流控芯片的功能板的第一侧面的示意图；
26.图3为一实施例中循微流控芯片的功能板的第二侧面的示意图；
27.图4为一实施例中微流控芯片的下盖板的示意图；
28.图5为血液样品中循环肿瘤细胞、白细胞、红细胞在过渡流道及分选流道中的运动状态示意图；
29.图6为图2中沿剖面线a-a的剖视示意图；
30.图7为血液样品中循环肿瘤细胞、白细胞、红细胞在第一转弯流道中的运动状态示意图；
31.图8为血液样品中循环肿瘤细胞、白细胞、红细胞在去除流道中的运动状态示意图；
32.图9为血液样品中循环肿瘤细胞、白细胞、红细胞在第二转弯流道中的运动状态示意图。
33.附图标记说明：
34.01、红细胞；02、白细胞；03、循环肿瘤细胞；1、功能板；10、入口流道；11、进样孔；210、过渡流道；13、第一弯管单元；13a、第一侧壁；13b、第二侧壁；14、第二弯管单元，14a、第三侧壁；14b、第四侧壁；220、分选流道；15、第三弯管单元；15a、第五侧壁；15b、第六侧壁，16、第四弯管单元；16a、第七侧壁；16b、第八侧壁；30、加深流道；40、第一转弯流道；50、去除流道；51、分流孔；52、阻挡件；60、第二转弯流道；70、回收管道；71、第一流出孔；80、废液管道；81、第二流出孔；90、缓冲流道；2、上盖板；21、样品入口；3、下盖板；31、回收孔；32、废液孔；33、排出孔。
具体实施方式
35.为使本发明的上述目的、特征和优点能够更加明显易懂，下面结合附图对本发明的具体实施方式做详细的说明。在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明。但是本发明能够以很多不同于在此描述的其它方式来实施，本领域技术人员可以在不违背本发明内涵的情况下做类似改进，因此本发明不受下面公开的具体实施例的限制。
36.请参阅图1-4，一实施例提供一种微流控芯片，包括功能板1，所述功能板1上设有过渡流道210及分选流道220。进一步地，功能板1上还设有入口流道10。微流控芯片还包括上盖板2与下盖板3。所述上盖板2与所述功能板1的第一侧面叠置连接，所述下盖板3与所述功能板1的第二侧面叠置连接，所述上盖板2上开设有与入口流道10连通的样品入口21。
37.参照图2、5，在其中一实施例中，所述过渡流道210的一端用于与入口流道10连接，所述过渡流道210垂直其延伸方向上的宽度大于所述入口流道10垂直其延伸方向上的宽度。参照图2、6，在其中一实施例中，所述分选流道220与所述过渡流道210的另一端连接，所述分选流道220垂直其延伸方向上的宽度大于所述过渡流道210垂直其延伸方向上的宽度，且所述分选流道220的一侧挖设有加深流道30，所述加深流道30沿所述分选流道220延伸方向设置，所述加深流道30的深度大于所述分选流道220的深度。
38.使用上述微流控芯片进行粒子如血液中循环肿瘤细胞03的分选时，样品从入口流道10进入后依次流入过渡流道210与分选流道220。由于惯性升力、迪恩曳力等的受力影响，红细胞01的直径较小，在入口流道10中混乱无序的流动，而白细胞02和循环肿瘤细胞03的直径较大，在入口流道10中作用力的平衡下，会初步聚集成带；由于分选流道220的宽度往往比入口流道10的宽度大较多，通过设置宽度小于分选流道220的过渡流道210使样品由入口流道10过渡到分选流道220，起到缓冲作用，避免样品由较小流道突然进入较宽流道，扰乱原来粒子的运动轨迹，避免破坏粒子原来的惯性聚集轨迹，也避免需要流过更长的大宽度的分选流道220后才能使得粒子贴近流道内壁聚集成细带；粒子经过渡流道210流入分选流道220内，此时直径大的粒子如循环肿瘤细胞03刚聚体成细带，并靠近分选流道220内壁底部，而直径稍小的粒子如白细胞02还未聚集于管道内壁底部，但白细胞02和循环肿瘤细胞03聚集的带靠得很近，通过在分选流道220中远离循环肿瘤细胞03聚集的一侧挖设有加深流道30，加深流道30沿所述分选流道220延伸方向设置且所述加深流道30的深度大于所述分选流道220的深度，打乱了分选流道220外壁附近的液体流动状态，使得惯性升力与迪
恩曳力改变，破坏原有的平衡，从而使得白细胞02能产生无序的运动状态，进而使得白细胞02在分选流道220中分布更加均匀，避免白细胞02聚体的带和循环肿瘤细胞03重叠，同理直径小的粒子如红细胞01也分布得更加均匀，既保证了不干扰循环肿瘤细胞03的聚体，也防止了白细胞02聚集于分选流道220内壁底部，便于后续把循环肿瘤细胞03与白细胞02分离开，利于循环肿瘤细胞03的回收。该微流控芯片中通过设计宽度小于分选流道220的过渡流道210，同时在分选流道220中设计深度大于分选流道220的加深流道30，便于样品中的粒子在进入分选流道220前能在较短的流道长度下惯性聚集成带，在大粒子如循环肿瘤细胞03与中粒子白细胞02未完全重叠前，在远离循环肿瘤细胞03的一侧开设加深流道30扰乱白细胞02的运动状态，不仅能缩短流道整体长度，而且能提高回收的循环肿瘤细胞03的纯度。该微流控芯可用于分选富集血液样品中的循环肿瘤细胞03，也可用于分选富集其他生物粒子。
39.参照图2，在其中一实施例中，所述入口流道10呈往复回折结构。血液样品由功能板的进样孔11进入入口流道10的入口端时，红细胞01、白细胞02和循环肿瘤细胞03均匀的分布在流道中。红细胞01直径约为6-8μm和白细胞02直径约为8-12μm，循环肿瘤细胞03直径约为20-30μm。当液体流过入口流道10的几个拐弯处时，由于惯性升力、迪恩曳力等的受力影响，直径较小的粒子如红细胞01在入口流道10中混乱无序的流动，而直径较大的粒子如白细胞02、循环肿瘤细胞03在入口流道10中作用力的平衡下，会初步聚集成带，再流入过渡流道210逐渐形成更细的聚集带，有利于粒子的惯性聚集，而且加工难度相较螺旋形管道或者传统的线性弧形流道也更容易，由于往复回折使整体流道布局更集中，能有效缩短流道长度。
40.相比过渡流道210及分选流道220，入口流道10为细长的流道。可选地，入口流道10的宽度为0.3mm-1.2mm。优选地，入口流道10的宽度为0.5mm-0.9mm。可选地，入口流道10的深度为0.06mm-0.3mm。优选地，入口流道10的深度为0.1mm-0.2mm。如此设置，使进入入口流道10的血液样品流速趋于平稳，同时使循环肿瘤细胞03和白细胞02能初步聚集成带，便于后续对循环肿瘤细胞03进行分选。
41.在其中一实施例中，所述过渡流道210包括交替设置的第一弯管单元13与第二弯管单元14，所述第一弯管单元13的曲率半径大于所述第二弯管单元14的曲率半径。所述分选流道220包括交替设置的第三弯管单元15与第四弯管单元16，所述第三弯管单元15的曲率半径大于所述第四弯管单元16的曲率半径,最末端的第二弯管单元14与最始端的所述第三弯管单元15连接。其中所述第一弯管单元13垂直其延伸方向上的宽度为a，所述第三弯管单元15垂直其延伸方向上的宽度为b，a《b。过渡流道210通过曲率半径大的第一弯管单元13与曲率半径小的第二弯管单元14交替连接形成，分选流道220通过曲率半径大的第三弯管单元15与曲率半径小的第四弯管单元16交替连接形成。所述过渡流道210垂直其延伸方向上的宽度主要指第一弯管单元13垂直其延伸方向上的宽度，所述分选流道220垂直其延伸方向上的宽度主要指第三弯管单元15垂直其延伸方向上的宽度。根据细胞直径、流道高度和宽度、液体流速等因素，综合惯性升力、迪恩曳力等的受力分析，循环肿瘤细胞03靠近分选流道220内壁底部，白细胞02也逐渐靠近分选流道220内壁底部。可选地，b比a大0.4mm-1.2mm。优选地，b比a大0.7mm-0.9mm。
42.参照图5，进一步地，第一弯管单元13包括相对设置的第一侧壁13a与第二侧壁
13b，所述第一侧壁13a与第二侧壁13b为非对称的曲面。第二弯管单元14包括相对设置的第三侧壁14a与第四侧壁14b，所述第三侧壁14a与第四侧壁14b为非对称的曲面。所述第三侧壁14a与所述第二侧壁13b连接，所述第四侧壁14b与所述第一侧壁13a连接。所述第三弯管单元15包括相对设置的第五侧壁15a与第六侧壁15b，所述第五侧壁15a与第六侧壁15b为非对称的曲面。第四弯管单元16包括相对设置的第七侧壁16a与第八侧壁16b，所述第七侧壁16a与第八侧壁16b为非对称的曲面。所述第五侧壁15a与所述第八侧壁16b连接，所述第六侧壁15b与第七侧壁16a连接。所述第一弯管单元13与第二弯管单元14朝不同的方向凸出设置，所述第三弯管单元15与第四弯管单元16朝不同的方向凸出设置，且所述第一弯管单元13与所述第三弯管单元15朝相同的方向凸出设置。如此设置非对称曲面，形成非对称惯性聚集，使循环肿瘤细胞在流道横截面中稳定位置(流道的内壁底部)聚焦形成一个带，形成聚焦流动，流向下游。
43.参照图5，在其中一实施例中，所述第三侧壁14a的曲率半径小于所述第四侧壁14b的曲率半径，所述第七侧壁16a的曲率半径小于所述第八侧壁16b的曲率半径，所述加深流道30设置在靠近所述第八侧壁16b的一侧。即加深流道30设置在分选流道220中远离大粒子如循环肿瘤细胞03惯性聚集的一侧，不会影响循环肿瘤细胞03的运行轨迹。可选地，分选流道220中与过渡流道210连接的一端未设置加深流道30，远离过渡流道210的一端设有加深流道30。
44.在其中一实施例中，所述第一侧壁13a的曲率半径小于所述第二侧壁13b的曲率半径，所述第五侧壁15a的曲率半径大于第六侧壁15b的曲率半径。从而使第一侧壁13a与第二侧壁13b之间的距离小于第五侧壁15a与第六侧壁15b之间的距离，实现流体由过渡流道210到分选流道220的缓冲。
45.参照图2、7，在其中一实施例中，所述功能板1上还设有第一转弯流道40，所述第一转弯流道40的曲率半径大于所述分选流道220的曲率半径，所述第一转弯流道40与所述分选流道220流通，所述加深流道30对应地延伸至所述第一转弯流道40中。在加深流道30的作用下，使得白细胞02在第一转弯流道40中分布更加均匀，避免与循环肿瘤细胞03重叠。在分选流道220连接了一个第一转弯流道40，由于第一转弯流道40的半径大，惯性升力的相对优势更加大。经过第一转弯流道40处时,流道中间流体受到的离心力最大,从而流向通道外侧边缘。靠近通道壁的流体流速最小,所受离心力也最小,从而受到中间流体的挤压。从而在第一转弯流道40的作用下，循环肿瘤细胞03能大限度地贴近管道内壁底部，为后续分选循环肿瘤细胞03和排除白细胞02做准备。
46.参照图2、6，可选地，所述加深流道30的深度比所述分选流道220的深度大50μm-200μm。可选地，精筛流道的深度为100μm-200μm。优选地，所述加深流道30的深度比所述分选流道220的深度大70μm-120μm。优选地，精筛流道的深度为110μm-150μm。图6为加深流道30在第一转弯流道40中的截面示意图，其中分选流道220延伸至与第一转弯流道40连接，第一转弯流道40中对应也开设有加深流道30，加深流道30与第一转弯流道40的深度差h为50μm-200μm，优先70μm-120μm。既能保证循环肿瘤细胞03在分选流道220或第一转弯流道40中能尽可能地靠近流道内壁底部流动，同时扰动加深流道30一侧的液体流动状态，避免白细胞02聚体的带和循环肿瘤细胞03重叠而影响后续循环肿瘤细胞03的回收率及纯度。
47.进一步地，参照图2、8，在其中一实施例中，所述功能板1上还设有去除流道50，所
述去除流道50与所述第一转弯流道40远离分选流道220的一端连通，所述加深流道30对应地延伸至所述去除流道50中，所述去除流道50中开设有贯穿所述去除流道50壁面的分流孔51。血液继续在去除流道50中流动，流经分流孔51，循环肿瘤细胞03继续贴着去除流道50内壁底部运动，由于白细胞02和红细胞01在管道中分布较为均匀，部分白细胞02和红细胞01则从分流孔51流出，便于后续循环肿瘤细胞03的回收。
48.参照图2、7、8，由于随着液体从分流孔51流出，流道中液体的流速相对会变低，循环肿瘤细胞03运动轨迹会发生微小的变化，容易向着远离流道内壁的方向运动，循环肿瘤细胞03易靠近分流孔51，而通过在去除流道50之前衔接一个曲率半径大的第一转弯流道40，使循环肿瘤细胞03流过大弯的第一转弯流道40后，紧贴着流道内壁底部流动，避免循环肿瘤细胞03流入分流孔51，提高循环肿瘤细胞03的回收率。
49.参照图2、3、8，在其中一实施例中，沿所述去除流道50的延伸方向依次设有多个分流孔51，所述功能板1上与所述去除流道50所在侧面相对的侧面设有多个呈往复回折结构的缓冲流道90，所述缓冲流道90与所述分流孔51一一对应连通。沿液体流动方向设置多个分流孔51对白细胞02和红细胞01进行多次去除，有利于后续循环肿瘤细胞03的回收，由于无需聚集白细胞02与红细胞01，流道的宽度和高度也可以设计得较宽，利于提高液体流速，提高分选效率。同时在所述去除流道50中对应所述分流孔51入口处设有阻挡件52，且所述阻挡件52位于所述分流孔51远离所述加深流道30的一侧，所述阻挡件52沿所述去除流道50的延伸方向的宽度大于所述分流孔51的直径。通过阻挡件52保护循环肿瘤细胞03不被流入分流孔51，白细胞02和红细胞01则从分流孔51流出，垂直流入功能板1的第二侧面，流入缓冲流道90。
50.参照图8，在其中一实施例中，沿样品流动方向，多个所述分流孔51与对应的所述加深流道30的距离l逐渐增大。随着液体的排出，白细胞02和红细胞01则会逐渐向远离加深流道30的一侧流动，对应沿样品流动方向，将所述分流孔51逐渐向远离加深流道30的方向设置，便于白细胞02和红细胞01从后续分流孔51流出。
51.参照图2、9，在其中一实施例中，所述功能板1上还设有第二转弯流道60，所述第二转弯流道60的曲率半径大于所述去除流道50的曲率半径，所述第二转弯流道60与所述去除流道50远离所述第一转弯流道40的一端连通，所述加深流道30对应地延伸至所述第二转弯流道60中。血液流过分流孔51后，白细胞02和红细胞01含量逐渐减少，同时流速也逐渐减小。通过衔接曲率半径大于所述去除流道50的曲率半径的第二转弯流道60，能起到稳定循环肿瘤细胞03的运动轨迹的作用，便于后续对循环肿瘤细胞03的回收。
52.进一步地，所述第二转弯流道60远离所述去除流道50的一端设有相互独立的回收流道70与废液流道80，所述废液流道80与所述第二转弯流道60中靠近加深流道30的一侧连通，所述回收流道70与所述第二转弯流道60中远离加深流道30的一侧连通。循环肿瘤细胞03紧贴第二转弯流道60内壁流入回收流道70，白细胞02和红细胞01流入废液流道80。在其中一实施例中，所述废液流道80与所述回收流道70呈往复回折结构，起到稳定液体流动状态，防止液体后续从废液孔32、回收孔31跌落的过程中，影响了第二转弯流道60末端循环肿瘤细胞03的运动轨迹。
53.参照图1-4，在其中一实施例中，所述上盖板2与所述功能板1的第一侧面粘接，所述下盖板3与所述功能板1的第二侧面粘接，使功能板1的第一侧面与第二侧面的各流道形
成密封的通道。所述上盖板2上开设与功能板1的第一侧面的入口管道10连通的样品入口21，便于血液样品从样品入口21导入微流控芯片内。下盖板3上开设有回收孔31、废液孔32及排出孔33，所述分流孔51与所述排出孔33连通，部分白细胞02和红细胞01在去除流道50由分流孔51流向功能板1的第二侧面，并从下盖板3的排出孔33流出微流控芯片，所述回收流道70通过贯穿功能板1第一侧面与第二侧面的第一流出孔71与所述回收孔31连通，分选出的循环肿瘤细胞03由下盖板3的回收孔31流出微流控芯片，所述废液流道80通过贯穿功能板1第一侧面与第二侧面的第二流出孔81与所述废液孔32连通，剩余的其他液体由下盖板3的废液孔32流出微流控芯片。
54.在本发明的描述中，需要理解的是，术语“中心”、“纵向”、“横向”、“长度”、“宽度”、“厚度”、“上”、“下”、“前”、“后”、“左”、“右”、“竖直”、“水平”、“顶”、“底”、“内”、“外”、“顺时针”、“逆时针”、“轴向”、“径向”、“周向”等指示的方位或位置关系为基于附图所示的方位或位置关系，仅是为了便于描述本发明和简化描述，而不是指示或暗示所指的装置或元件必须具有特定的方位、以特定的方位构造和操作，因此不能理解为对本发明的限制。
55.此外，术语“第一”、“第二”仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。在本发明的描述中，“多个”的含义是至少两个，例如两个，三个等，除非另有明确具体的限定。
56.在本发明中，除非另有明确的规定和限定，术语“安装”、“相连”、“连接”、“固定”等术语应做广义理解，例如，可以是固定连接，也可以是可拆卸连接，或成一体；可以是机械连接，也可以是电连接；可以是直接相连，也可以通过中间媒介间接相连，可以是两个元件内部的连通或两个元件的相互作用关系，除非另有明确的限定。对于本领域的普通技术人员而言，可以根据具体情况理解上述术语在本发明中的具体含义。
57.在本发明中，除非另有明确的规定和限定，第一特征在第二特征“上”或“下”可以是第一和第二特征直接接触，或第一和第二特征通过中间媒介间接接触。而且，第一特征在第二特征“之上”、“上方”和“上面”可是第一特征在第二特征正上方或斜上方，或仅仅表示第一特征水平高度高于第二特征。第一特征在第二特征“之下”、“下方”和“下面”可以是第一特征在第二特征正下方或斜下方，或仅仅表示第一特征水平高度小于第二特征。
58.需要说明的是，当元件被称为“固定于”或“设置于”另一个元件，它可以直接在另一个元件上或者也可以存在居中的元件。当一个元件被认为是“连接”另一个元件，它可以是直接连接到另一个元件或者可能同时存在居中元件。本文所使用的术语“垂直的”、“水平的”、“上”、“下”、“左”、“右”以及类似的表述只是为了说明的目的，并不表示是唯一的实施方式。
59.以上所述实施例的各技术特征可以进行任意的组合，为使描述简洁，未对上述实施例中的各个技术特征所有可能的组合都进行描述，然而，只要这些技术特征的组合不存在矛盾，都应当认为是本说明书记载的范围。
60.以上所述实施例仅表达了本发明的几种实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。