一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法及应用与流程

文档序号:25322196发布日期:2021-06-04 17:13阅读:来源:国知局

技术特征:
1.一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法,其特征在于:该含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂包括如下等重量份的菌种:布拉迪酵母菌、丁酸梭菌、凝结芽孢杆菌、嗜酸乳杆菌、保加利亚乳酸杆菌、嗜热链球菌、开菲尔乳杆菌、毕赤酵母、酿酒酵母和东方醋酸菌;该含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法包括如下步骤:步骤s1:将无菌水、培养基a、培养基b、培养基c分别加入4个洗净烘干的三角瓶中,加量到三角瓶的瓶身三分之二,使用三角瓶封口膜封口,放入高压灭菌锅,设置温度115℃,灭菌30~35min,灭菌结束后取出置于4℃冰箱保存待用;步骤s2:将培养罐a、培养罐b、培养罐c、培养罐d用高压灭菌袋包好,放入高压蒸汽灭菌锅中,设置温度121℃,灭菌20~30min,灭菌结束后取出装有培养罐a、培养罐b、培养罐c、培养罐d的高压灭菌袋,置于鼓风干燥箱,于70~80℃烘干5~10min,然后使用质量分数为75%的酒精喷洒高压灭菌袋表面,转移至无菌室的无菌操作台,在进入无菌操作台之前再喷洒一次质量分数为75%的酒精,同时将步骤s1置于冰箱保存待用三角瓶取出,瓶身使用质量分数为75%的酒精喷洒灭菌,然后转移至上述无菌操作台;步骤s3:在无菌操作台中打开培养罐a的罐盖,将布拉迪酵母菌、毕赤酵母、酿酒酵母与培养基a加入培养罐a中,关闭罐盖摇匀待用;打开培养罐b的罐盖,将丁酸梭菌、凝结芽孢杆菌、嗜热链球菌与培养基b加入培养罐b中,关闭罐盖摇匀待用;打开培养罐c的罐盖,将嗜酸乳杆菌、保加利亚乳酸杆菌、开菲尔乳杆菌、东方醋酸菌与培养基c加入培养罐c中,关闭罐盖摇匀待用;打开培养罐d的罐盖,将无菌水加入培养罐d中,待用;控制操作后的培养罐a、培养罐b、培养罐c以及培养罐d的质量比为1:1:1:1;步骤s4:打开活化培养设备的紫外灯一(31)与紫外灯二(42),进行紫外杀菌处理30~45min,关闭紫外灯一(31)与紫外灯二(42),打开箱门一(11),将培养罐a、培养罐b、培养罐c以及培养罐d分别加入活化培养设备的四个放罐筒(453)中,关闭箱门一(11)设置温控器一(34)为温度30~37℃,设置转动电机(49)转速为100~180r/min,发酵2~3d,期间换气扇(33)工作进行换气,然后将气缸(46)降下,使离心盘(45)落入离心组件(41)的内部,然后齿轮(415)转动,带动盖板(412)滑动,闭合离心组件(41),然后启动转动电机(49),设置转速2000~2500r/min,设置温控器二(411)温度为0~5℃,离心10~15min,然后打开箱门二(12),齿轮(415)反向转动,打开盖板(412),然后取出培养罐a、培养罐b、培养罐c,在无菌操作台中将培养罐a、培养罐b、培养罐c中的浓缩菌液取出混合,得到各活化菌株;步骤s5:将原培养罐a、培养罐b、培养罐c中得到的各活化菌株分别加入放有灭菌的培养基a、培养基b、培养基c的发酵罐,均加入细胞保护剂,分别在温度30℃、40℃、37℃条件下放大培养3

5d,培养结束后取出置于冷冻干燥箱于温度

50~

40℃冻干24~36h,然后按等细胞数目混合,即得到一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂,所述培养基a、培养基b、培养基c的体积用量为发酵罐体积的五分之三。2.根据权利要求1所述的一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法,其特征在于:所述培养基a由如下步骤制成:将土豆去皮切块,置于铁锅中,加入去离子水煮沸,保持20~30min,结束后冷却至室温,使用纱布过滤,补充去离子水,控制最终土豆与去离子水的用量比为2g:10ml;然后加入无水葡萄糖,控制无水葡萄糖与去离子水的用量比为20g:1l;无水葡萄糖完全融化后,加入
增殖因子a,即得到培养基a;所述增殖因子a为0.1~0.3mg/ml锌离子、0.04~0.06mg/ml的生物素以及0.05~0.06mg/ml的肌醇混合而得,所述增殖因子a的用量为去离子水体积的1%~3%。3.根据权利要求1所述的一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法,其特征在于:所述培养基b由如下步骤制成:在烧杯中加入去离子水、胰蛋白胨、酵母粉、氯化钠,在温度40~45℃,转速200~600r/min条件下搅拌至胰蛋白胨、酵母粉、氯化钠完全溶解,然后调节ph至7.0~7.1,加入增殖因子b,即得到培养基b;所述去离子水、胰蛋白胨、酵母粉、氯化钠以及增殖因子b的用量比为1l:10g:5g:5g:10~20ml,所述增殖因子b为0.1~0.3mg/ml镁离子、质量分数为10%~20%葡萄糖混合而得。4.根据权利要求1所述的一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法,其特征在于:所述培养基c由如下步骤制成:在烧杯中加入质量分数为10~15%的脱脂牛奶,加入蛋白水解酶与增殖因子,转速50~150r/min搅拌5~10min,搅拌结束后调节ph至6.5,即得到培养基c;所述蛋白水解酶、脱脂牛奶、增殖因子c的用量比为1000u:1l:10~20ml,所述增殖因子c为0.3~0.5g/l的麦芽汁、0.1g~0.3g/l的酵母粉以及1~5g/l的番茄汁混合而得。5.根据权利要求1所述的一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法,其特征在于:步骤s3所述培养罐a的罐盖可通气,培养罐b和培养罐c的罐盖为密封设置。6.根据权利要求1所述的一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法,其特征在于:所述步骤s4所述活化培养设备包括机箱(1)和底座(2);所述底座(2)固定设置于机箱(1)底部的四个顶角的位置,所述机箱(1)的正面设有箱门一(11)与箱门二(12),所述机箱(1)包括培养室(3)与离心室(4),所述培养室(3)位于离心室(4)的上方,所述培养室(3)与离心室(4)之间设有隔板(13),且隔板(13)内部开设有孔洞(14);所述培养室(3)内壁的顶部固定安装有紫外灯一(31),所述培养室(3)的侧壁设有换气口(32),所述换气口(32)贯穿培养室(3)的侧壁与培养室(3)的内部连通,所述培养室(3)的内部位于换气口(32)一侧的位置设有换气扇(33),所述换气扇(33)的中心设有转轴,所述转轴的两端分别与培养室(3)正面的内部和背面的内部转动连接,所述换气扇(33)设有电机,所述培养室(3)内壁的底部位于换气扇(33)下方的位置固定连接有温控器一(34)。7.根据权利要求6所述的一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂的制备方法,其特征在于:所述离心室(4)的内部设有离心组件(41)与紫外灯二(42),所述离心组件(41)包括外壳(43)、内壳(44)、离心盘(45)、气缸(46)、转动轴(47)、稳定座(48)、转动电机(49)、固定柱(410)、温控器二(411)以及盖板(412),所述外壳(43)位于离心室(4)的内部,所述外壳(43)的底部与离心室(4)内壁的底部固定连接,所述内壳(44)固定连接于外壳(43)的内部,所述气缸(46)位于内壳(44)的内部,所述气缸(46)的底部与稳定座(48)的顶部固定连接,所述气缸(46)的顶部与离心盘(45)的底部中心位置固定连接,所述稳定座(48)的底部与转动轴(47)的顶部固定连接,所述转动轴(47)的底部与转动电机(49)的输出轴通过联轴器固定连接,所述转动电机(49)位于电机框的内部,所述电机框与内壳(44)的底部固定连接,所述固定柱(410)位于内壳(44)的下方,所述固定柱(410)的顶部与内壳(44)的底部固定连接,所
述固定柱(410)的底部与外壳(43)内壁的底部固定连接,所述固定柱(410)的内部设有减震弹簧,所述温控器二(411)安装于内壳(44)的底部;所述离心盘(45)包括十字支架(451)、连接件(452)以及放罐筒(453),所述连接件(452)的上端通过转轴与十字支架(451)的一端转动连接,四个所述放罐筒(453)分别位于十字支架(451)的四个端点下方,且放罐筒(453)顶部与连接件(452)的底部固定连接;所述盖板(412)位于外壳(43)的顶部,所述盖板(412)内部设有滑动板(413),所述滑动板(413)的底部设有齿牙(414),所述内壳(44)的内部设有与齿牙(414)相适配的齿轮(415);所述紫外灯二(42)固定连接于离心室(4)的侧壁。8.根据权利要求1所述的方法制备的一种含有布拉迪酵母菌的开菲尔发酵剂在液体制品和功能性固体饮料制备中的应用。
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