皮肤化妆护理系统和方法

专利名称：皮肤化妆护理系统和方法
技术领域：
本发明涉及皮肤化妆护理系统和方法，它包括静磁体(staticmagnet)和羟基酸。
电流产生的磁场牵涉包括癌症在内的许多疾病。相比之下，可以认为静磁场是安全的，可以在医疗上用于治疗疼痛和用来刺激循环。静磁体(也知道其是“永久磁体”)以不同的尺寸和强度被使用。它们可以用肩带(strap)、腰带(belt)或线带(tape)附着在身体上。
在化妆领域，公开过含有磁体颗粒如六铁酸钡的组合物。1996年的K.Stanzl会议文摘公开，这样的组合物减少皮肤的皱折，增大皮肤的测量的结实程度和湿润水平。
也请见Happi在1996年3月的文章《安全有效的Cellulite治疗》(A Safe Effective Cellulite Treatment)，该文叙述了使用含有磁化六铁酸钡晶体治疗Cellul ite的皮肤乳脂。
Lancaster的德国专利申请书DE 4325071叙述了使用加到在磷脂囊中含有氟碳化合物的化妆基础物中的磁化颗粒来刺激血液循环和改善毛发的生长。该组合物可以呈皂、乳脂、凝胶、绷带、膏药或喷雾剂等形式。该组合物可以含有抗氧化剂。
据认为，在化妆组合物中的磁化颗粒具有随机的取向。
SRL公司Eidos的西班牙专利申请书ES 2099685公开了磁化的化妆制剂，它含有片状的磁体单元，能产生直至12,000Gauss(在S.I.单位是1.2Tesla)的磁场强度。
Rhenmagnet Horst Baermann公司的德国专利申请书DE 3613280公开了含有小永久磁体(0.5～30mm)的化妆面膜。该面膜还含有使皮肤结实和平滑的物质，比如植物或动物提取物。据说这些物质可以更好地渗入皮肤，由于使用了磁体产生的加热和促进血液循环其作用更得到改善。这些磁体可以具有两个磁极，也可以具有多个交变的磁极。
Bioflex公司将含有交变磁极的同心环形磁体商品化以减少面部的皱纹。
上述的先有技术方法都没有公开任何将永久磁体的S极和化妆活性物敷在皮肤上的皮肤化妆护理方法。类似地，先有技术没有公开由永久磁体层和化妆成分层组成的二元化妆贴片，后者优选是一种经皮的或水凝胶贴片。
本发明在其第一个实施方案(A)中包括一种化妆处理皮肤的方法，该方法包括(a)在皮肤上贴上含有至少一个N极和一个S极的静磁体的S极；以及(b)在皮肤上涂布在可化妆用的载体中含有有化妆效果成分的皮肤化妆护理的组合物。
按照本发明的方法，可以同时或先后贴上磁体和涂布组合物。
在本发明的第二个实施方案(B)中，还包括含有如下组成的二元化妆贴片(i)静磁体层；(ii)载有化妆活性物的化妆成分层；其中两层相互贴合，而且(i)层的S极向着(ii)层定向。
除了在操作实施例和对照实施例中，或者另外专门指出，在此说明中，所有指出指材料的数量或反应条件、材料的物理性能和/或用途的数字都要理解为用“大约”一词来修饰。
除非专有说明，所有的数量都以水包油乳液的重量计。
文中使用的术语“皮肤”包括在面部、颈部、背部、腿部、臂部、手部和头部的皮肤。
实施方案A皮肤的化妆护理方法本发明的皮肤化妆护理方法涉及将永久磁体的S极贴布在皮肤上。本发明的该磁体可以具有任何的形状或形式。优选条形磁体(具有一个N极和一个S极)。可以借助于肩带或膏药，或者布带或粘接剂将该磁体贴布在皮肤上。为了使本发明方法所获得的化妆效果最佳化，该磁体的厚度优选至少是1.0cm，最优选至少是1.5cm。适合于本发明的磁体一般强度为0.00004～0.2Tesla，优选0.01～0.1Tesla。
本发明的皮肤化妆护理方法包括将含有有化妆效果成分的化妆组合物涂布在皮肤上。该化妆效果成分优选自羟基酸、类视黄醇、维生素C、植酸和皮肤去色素剂如育亨宾和曲酸。
羟基羧酸加强增生作用，增加角质细胞中神经酰胺的生物合成，增加表皮厚度，以及加大正常皮肤的脱屑作用，致使皮肤更光滑，看起来更年轻。
该羟基酸可以选自α-羟基酸、β-羟基酸如水杨酸、其它羟基酸如二羟基羧酸、羟基二元羧酸、羟基三元羧酸和它们的混合物，或者它们各种立体异构体(DL、D或L)的混合物。
优选地，α-羟基羧酸选自具有如下通式(1)α-羟基酸
这里M是H或饱和或不饱和、直链或分支的含有1～27个碳原子的烃基链。
甚至更优选选自乳酸、2-羟基辛酸、羟基月桂酸、羟基乙酸、邻羟基苯甲酸和它们混合物的羟基羧酸。当存在有立体异构体时，最优选L异构体。
应该理解，按照组合物的pH值不同，羟基酸可以以其盐的形式，比如铵盐、钾盐或钠盐的形式存在。
某些羟基酸酯，特别是水杨酸C1～C30酯具有抗老化性和油控制活性，可以包括在组合物中。特别优选的酯是水杨酸十三烷基酯。
羟基酸组分的数量优选是0.01～20％(重量)，更优选是0.05～10％(重量)，最优选是0.1～3％(重量)。
该化妆组合物优选含有选自维生素A化合物(类视黄醇)和维生素C的维生素。
类视黄醇在活体外加强角质细胞的增生作用，通过皮肤的成纤维细胞增加表皮厚度增加胶原的合成。这导致防护了阳光损害和使起皱的皮肤变得更光滑。在本文中使用的术语“类视黄醇”包括视黄酸、视黄醇、视黄醛和C2～C20的视黄酯。包括在术语“视黄酸”中的是13-顺式视黄酸和全反式视黄酸。
术语“视黄醇”包括视黄醇的下列异构体全反式视黄醇、13-顺式视黄醇、11-顺式视黄醇、9-顺式视黄醇、3，4-二脱氢视黄醇。优选的异构体是全反式视黄醇、13-顺式视黄醇、3，4-二脱氢视黄醇、9-顺式视黄醇。最优选的是全反式视黄醇，因为其商业来源广泛。
视黄酯是视黄醇的酯。术语“视黄醇”如上所定义。适合于本发明使用的视黄酯是视黄醇的C2～C20酯。视黄酯的例子包括但不限于棕榈酸视黄酯、甲酸视黄酯、乙酸视黄酯、丙酸视黄酯、丁酸视黄酯、戊酸视黄酯、异戊酸视黄酯、己酸视黄酯、庚酸视黄酯、辛酸视黄酯、壬酸视黄酯、癸酸视黄酯、十一碳酸视黄酯、月桂酸视黄酯、十三碳酸视黄酯、肉豆蔻酸视黄酯、十五碳酸视黄酯、十七碳酸视黄酯、硬脂酸视黄酯、异硬脂酸视黄酯、十九碳酸视黄酯、花生酸视黄酯、山嵛酸视黄酯、亚油酸视黄酯、油酸视黄酯、乳酸视黄酯、羟基乙酸视黄酯、羟基辛酸视黄酯、羟基月桂酸视黄酯、酒石酸视黄酯。最优选的酯选自C2、C3和C16酯，因为它们最容易在市场上得到，或者是亚油酸酯，因为它们的效果优异。
本发明组合物中类视黄醇的含量为每克组合物33～330,000IU，优选330～16,500IU，最优选1,650～6,600IU。
该组合物优选包括曲酸或育亨宾作为皮肤脱色素剂，或者是数量从0.0001～50％，优选0.001～25％的植酸作为抗炎剂。
在本发明方法中使用的组合物还含有可用于化妆品的载体，用作组合物中有化妆效果成分的稀释剂、分散剂或载体，当该组合物涂布到皮肤上时使它们容易分散开。
该载体可以是含水的、无水的或乳液。该组合物优选是含水的或者是乳液，特别是油包水或水包油型乳液。当有水存在时，其含量可以是5～99％(重量)，优选20～70％(重量)，最优选是35～60％(重量)。
除了水以外，也可以用挥发性的溶剂在本发明的组合物中作为载体。最优选的是单羟基C1～C3烷醇。这包括乙醇、甲醇和异丙醇。单羟基烷醇的含量可以是1～70％(重量)，优选是10～50％(重量)，最优选是15～40％(重量)。
也可以用润肤材料作为可以用于化妆的载体，它们可以呈硅油或合成酯的形状。该润肤材料的量可以为0.1～50％，优选1～20％(重量)。
硅油可以分成挥发性和非挥发性两种。这里使用的术语“挥发性”指的是在环境温度下该材料具有可以测量的蒸气压。挥发性硅油优选选自含有3～9个硅原子，更优选含有4～5个硅原子的环状或直线的聚二甲基硅氧烷。直线的挥发性硅油的粘度在25℃下一般小于大约5cSt，而环状挥发性硅油的粘度一般小于大约10cSt。用作润肤材料的非挥发性硅油包括聚烷基硅氧烷、聚烷基芳基硅氧烷和聚醚硅氧烷共聚物。在这里可以使用的基本不挥发聚烷基硅氧烷包括比如在25℃下粘度为500～2500万cSt的聚二甲基硅氧烷。在本发明中可以使用的优选非挥发性润肤材料中是在25℃下粘度大约为10～400cSt的聚二甲基硅氧烷。
在酯类润肤材料中有(1)具有10～20个碳原子的脂肪酸的链烯基或烷基酯。其例子包括新戊酸异花生醇酯、异壬酸异壬醇酯、肉豆蔻酸油醇酯、硬脂酸油醇酯和油酸油醇酯；(2)醚-酯，如乙氧基化脂肪醇的脂肪酸酯；(3)多元醇的酯。乙二醇单脂肪酸和二脂肪酸酯、二乙二醇单脂肪酸和二脂肪酸酯、聚1，2-亚乙基二醇(200-6000)单和二脂肪酸酯丙二醇。单脂肪酸和二脂肪酸酯、聚丙二醇2000单油酸酯、聚丙二醇2000单硬脂酸酯、乙氧基化的丙二醇单硬脂酸酯、甘油单脂肪酸和二脂肪酸酯、多甘油多脂肪酸酯、乙氧基化的甘油单硬脂酸酯、1，3-丁二醇单硬脂酸酯、1，3-丁二醇二硬脂酸酯、聚氧乙烯多元醇脂肪酸酯、缩水山梨糖醇脂肪酸酯，而聚氧亚乙基缩水山梨糖醇脂肪酸酯是满意的羟基醇酯。
(4)蜡酯，比如蜂蜡、鲸蜡、肉豆蔻酸肉豆蔻醇酯、硬脂酸硬脂醇酯和山萮酸花生醇酯；(5)类固醇酯，其中的例子是胆固醇脂肪酸酯。
也可以包括具有10～30个碳原子的脂肪酸作为可用于本发明组合物的可用于化妆的载体。作为说明的此类物质是壬酸、月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸、异硬脂酸、羟基硬脂酸、油酸、亚麻酸、蓖麻油酸、花生酸、山萮酸和芥酸。
也可以使用多羟基醇类型的湿润剂作为本发明组合物的可以用于化妆品的载体。湿润剂的目的是增加润肤材料的效果、减少起皮、刺激累积的皮屑脱落和改善皮肤的触觉。典型的多羟基醇包括甘油、聚亚烷基二醇，更优选的是亚烷基二醇及其衍生物，这包括丙二醇、二丙二醇、聚丙二醇、聚乙二醇及其衍生物、山梨糖醇、羟丙基山梨糖醇、己二醇、1，3-丁二醇、1，2，6-己三醇、乙氧基化的甘油、丙氧基化的甘油和它们的混合物。为了有最好的结果，该湿润剂优选是丙二醇或透明质酸钠。湿润剂的数量可以是组合物重量的0.5～30％，优选1～15％。
还可以使用增稠剂作为本发明组合物的可用于化妆品载体的一部分。典型的增稠剂包括交联的丙烯酸酯如Carbopol 982、疏水改性的丙烯酸酯如Carbopol 1382、纤维素衍生物和天然橡胶。在可以使用的纤维素衍生物中有羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素、羟丙基纤维素、羟乙基纤维素、乙基纤维素和羟甲基纤维素。本发明适用的天然橡胶包括瓜尔胶、呫吨胶、菌核、鹿角菜胶、果胶和它们的混合物。增稠剂的数量可以为0.0001～5％，一般为0.001～1％，优选为0.01～0.5％(重量)。
可以选择性地把水、溶剂、聚硅氧烷、酯类、脂肪酸、湿润剂和/或增稠剂构成可用于化妆品的载体，其数量为1～99.9％，优选80～99％(重量)。
油或油性物质可以与乳化剂一起存在，以提供油包水型或水包油型乳液，这在很大程度上取决于使用的乳化剂的平均亲水-亲油平衡值(HLB)。
在本发明的化妆组合物中也可以存在着表面活性剂。表面活性剂的总浓度为该组合物重量的0.1～40％，优选1～20％，最优选为1～5％。表面活性剂可以选自阴离子型、非离子型、阳离子型和两性离子型的活性物。特别优选的非离子型表面活性剂是每个分子中具有2～100个缩合的氧化乙烯基或氧化丙烯基的、具有C10～C20脂肪醇或脂肪酸疏水链段的非离子型表面活性剂；与2～20摩尔的氧化烷基缩合的C2～C10烷基酚；乙二醇的单脂肪酸酯和二脂肪酸酯；脂肪酸单甘油酯、缩水山梨糖醇的单和二C8～C20烷脂肪酸酯；嵌段共聚物(环氧乙烷/环氧丙烷)以及聚环氧乙烷缩水山梨糖醇和它们的混合物。烷基多配糖物和糖苷脂肪酰胺(如甲基葡糖酰胺)也是适当的非离子型表面活性剂。
优选是阴离子型表面活性剂包括皂类、烷基醚硫酸盐和磺酸盐、烷基硫酸盐和磺酸盐、烷基苯磺酸钠、烷基和二烷基磺基琥珀酸盐、C8～C20酰基羟乙磺酸盐、酰基谷氨酸盐、C8～C20烷基醚磷酸盐和它们的混合物。
在本发明的化妆组合物中可以存在阳光吸收剂。阳光吸收剂包括一般用来阻隔紫外线的一些材料。说明性的化合物是对氨基苯甲酸、肉桂酸盐和水杨酸盐的衍生物。比如可以使用Avo二苯甲酮(Parsol1789)、甲氧基肉桂酸辛酯和2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮(也叫Benzophenone)。甲氧基肉桂酸辛酯和2-羟基-4-甲氧基二苯甲酮的商品名分别是Parsol MCX和Benzophenone-3。在组合物中使用的阳光吸收剂的确切的数量可以根据所需防护阳光紫外辐射的程度而变化。
许多化妆组合物，特别是含水的化妆组合物必须防止潜含的有害微生物的生长。因此，防腐剂是必需的。适当的防腐剂包括对羟基苯甲酸烷基酯、己内酰脲衍生物、丙酸盐和各种季胺化合物。本发明特别优选的防腐剂是甲基paraben、丙基paraben、苯氧基乙醇和苄醇。防腐剂的一般用量是组合物重量的大约0.1～2％。
可以在本发明的化妆组合物中加入粉末。这些粉末包括白垩、滑石粉、漂白土、高岭土、淀粉、绿土、化学改性的硅酸镁铝、有机改性的蒙脱土、水合硅酸铝、气相法白碳黑、辛烯基琥珀酸淀粉铝和它们的混合物。
该组合物可以包装在适当的容器内，以适应其粘度和便于消费者使用。比如洗剂或流体乳脂可以包装在瓶子或滚珠涂布器中，或者在胶囊中，或者在推进剂驱动的气溶胶装置中，或者是装有适合于用手指操纵的小泵的容器中。当组合物是乳脂时，可以简单地将其储存在不易变形的瓶子或挤压的容器如管或带盖的瓶中。
在使用时，可以将磁体的S极和该组合物相继(可以磁体在先，也可以组合物在先)或同时贴在皮肤的相同区域。磁体贴在皮肤上的时间上几分钟到几小时。从适当的容器或涂布器中挤出，涂在暴露的皮肤上的组合物是比如1～100mL，如果需要，然后用手或手指或适当的工具将其涂布开来和/或在皮肤上摩擦。磁体和组合物可以包装在一起，作为同一个套件的一部分，或者是单独地分别销售。
实施方案B化妆双贴片在其第二个实施方案(B)中，本发明还包括化妆双贴片，它包括(i)一个静磁体层；(ii)一个化妆成分层，其中装有包括有化妆效果成分的化妆组合物；其中的两层相互贴在一起，(i)层的S极向着(ii)层定向。
在此实施方案中，磁体层可以是任何形状和尺寸的，但是是一层薄膜。透过皮肤的或水凝胶层含有如上面实施方案A的所述的化妆活性物。这两层通过粘接系统附着在一起。
该双贴片的形状可以与所附着的所需区域的形状相吻合，比如呈圆形、呈鼻子的条形、呈直角的方形等。该双贴片可以借助于带子或粘接剂敷在皮肤上。该贴片优选贴在最接近皮肤的皮肤层(ii)上。
有化妆效果的成分可以是任何有益于皮肤的成分，但优选选自如上在实施方案A中所叙述的有化妆效果的成分。
下面的特定实施例进一步说明本发明，但不对本发明构成限制。
材料和方法在此研究中使用的条形磁体从New York州，New Brunswick市的Mc Master Carr公司得到。这些磁体是具有N极(N极)和S极(S极)的永久磁体，也称作静磁体(与建立磁场以及叠加的电场的电磁体相对)。在此处叙述的实验中，提到将N极或S极贴到细胞上，这仅仅意味着N极或S极十分接近该细胞，不可能将磁体的一极与另一极分开。在此研究中使用的磁体的生物磁强度是在边缘处700～750Gauss，在磁条的中部是280～300Gauss。
在磁研究中使用的Bioflex生物磁体从Florida州OaklandPark市的Bioflex公司得到。该Bioflex磁体片是永久磁体，是一个同心圆环，交变的磁极沿着环分布。这使得细胞与一系列的S-N极相接触。在此研究中使用的Bioflex磁体在边缘的磁场强度是240Gauss，在磁体的中部是87Gauss。
在这里叙述的所有实验中，为了避免由于在磁体的不同区域内(边缘和中间)磁场的不同而造成的变异性，将在96孔板中60个孔中放置的细胞放在条形磁体或Bioflex磁体的中部。类似地，猪皮活组织也放在磁体的中间。
在此实验中使用的细胞是正常人的角质细胞和猪皮组织培养基。用研磨处理从新生儿包皮分离的正常人角质细胞在丝裂霉素处理的确立了分裂菌落的3T3鼠成纤维细胞存在下，在DME培养基/5％的胎牛血清中生长。在这些条件下角质细胞生长直至其第三代。对于此实验，将第三代角质细胞沉积在含有0.15mM的无血清角质细胞生长培养基(KGM；从California州，San Diego市的Clonetics公司得到)中。从Clonetics公司得到新生儿成纤维细胞，在含有10％的胎牛血清的Dulbecco最低基本培养基(DMEM)中生长。在第4～10代之间的细胞中进行实验。
从Pensylvania州Buckshire Farms得到新切下的2～3周大的小猪的皮。此猪皮先用肥皂彻底清洗，然后用10x含抗菌素(青霉素、链霉素)的培养基清洗。然后将此猪皮切成200μm厚。从此洗过的猪皮打孔得到7mm活体组织。然后再用10x的抗菌素培养基洗涤此活体组织，最后用正常的DMEM洗涤两次。在每个transwell板中用1mL无血清DMEM床从板的底部培养3个活体组织，表皮面朝上。在此条件下平衡此活体组织后3天开始进行实验。
磁力对角质细胞生长的影响角质细胞沉积在96孔板的60个孔中间(3000细胞/孔)。24小时以后，将板放在磁体(条形磁体或Bioflex磁体)中间顶部，再生长4天直至细胞70～80％汇合。每两天或三天更换培养基。对照组放在非磁性金属板的顶部，测试板放在条形磁体(N极或S极向上)的顶部或者Bioflex磁体的中间。在某些研究中测量细胞与磁力的关系，将板彼此摞起放在磁体的顶部，使得底部的板最接近磁体(磁力最高)，而顶部的板离磁体最远(磁力最低)。在不同的培养器中进行评估N极和S极磁体影响的研究，以避免一个磁体对另一个磁体的影响。在生长4天以后，从培养器中取出板，用磷酸盐缓冲液盐水(PBS)洗涤两次，用100μL的二苯基亚胺H33258溶液(从Calbiochem公司得到—基础溶液制备成1mg/mL蒸馏水，储存在4℃的暗处，不超过1周)培养。在室温下的暗处培养15分钟以后，在Milipore Cytofluor 2000(ex/em＝360/460nm)上测量荧光。用牛胸腺DNA标准计算出DNA含量，表示为μg/孔，或表示为未暴露在磁体下的对照孔的百分数。在全部使用单层培养基的研究中，使用至少24个不同孔的平均+/-标准偏差，以用Student t-检验计算统计显著性。
猪皮组织培养物的DNA合成在如上所述制备的猪皮组织培养基平衡3天以后，除去培养基，加入1mL新鲜培养基，通过直接在该培养基中加入由100倍浓缩的原料加水配成的不同浓度的乳酸处理这些孔。与加入乳酸的同时，也把选择的培养基暴露在条形磁体的S极或N极下，或者暴露在Bioflex磁体下。磁体放在培养基碟的顶部，以直接暴露表皮(用在顶部的表皮侧面进行组织培养)。3天以后，改变培养基，重新加入乳酸，每个孔中加入10μC的3H-胸腺嘧啶脱氧核苷。再将板培养24小时。在此培养周期结束时，除去活体组织，边振摇边用PBS洗涤1小时，在10mL2M的溴化钠溶液中振摇培养过夜，以将表皮与真皮分开。用PBS洗涤活体组织，用手术刀小心从真皮上撕下表皮。在50℃下用1mL的0.5N氢氧化钠溶液消化表皮和真皮，用200μL进行放射活性计数。计算出DNA合成速度，表示为cpm/7mm冲下的真皮或表皮活体组织，在某些实验中也表示为对照组的百分数。所有的组织培养实验进行至少6次，用学生t-检验计算出统计分析的平均+/-标准偏差。
实施例1比较不同厚度的磁体。研究了增加厚度[即增加磁力(Bioflex磁体)]对角质细胞单层培养基中角质细胞增生的影响。
磁体厚度DNA含量 比对照组高％P值对照组(无磁体) 820+/-2200.75cm 825+/-451.731cm 855+/-205.12＞0.11.5cm 930+/-2812.4＞0.05此实验评价了不同厚度的Bioflex磁体对角质细胞增生的影响，以确定对于该影响需要什么样的最佳的力。正如从下面表中所看到的，当磁体的厚度增大(因而磁力也加大)时，对增生的影响最大。厚度1.5cm或者更厚的磁体明显地增大了单层培养基中角质细胞的增生。
实施例2评估Bioflex磁体(较弱的磁力，70～100Gauss)和具有较强磁力的条形磁体(300～400Gauss)之间的不同。使用的条形磁体的S极向着此研究的细胞。在3次分别的研究中，磁体增加了角质细胞的增生，然而在3次研究中有2次显示出，条形磁体比Bioflex磁体增加得更多。
实施例3实施例3评价了乳酸和磁场在诱发角质细胞增生中的协同效果。在此研究中，使用了活体外角质细胞培养基，2mM的乳酸使增生增加5.4％。在统计学上此增加是不明显的。单独使用Bioflex磁体时也激发增生达5.5％，在该实验使用的条件下，在统计学上这也是不明显的。然而，在Bioflex磁体存在下，乳酸激发角质细胞增生15％，在统计学上这就是明显的了(p＞0.001)。因此，此实验揭示了乳酸和磁体在激发角质细胞增生方面的协同效果。
乳酸和磁场对角质细胞增生的协同效果如用DNA的含量所测试对照组 乳酸 Bioflex磁体乳酸+(无磁体) (2mM) Bioflex磁体平均 241254 256277标准偏差 5.3 6.315P值 0.35 0.36 0.001实施例4实施例4比较了磁体的几何形状对猪皮组织培养基表皮细胞增生的影响，如N极与S极；条形磁体与Bioflex环形磁体。如在方法中所述进行猪皮的培养。在此实验中，Bioflex磁体对表皮细胞的增生没有明显的影响。条形磁体，无论是N极还是S极，都表现出对增生有较高的刺激。条形磁体N极的影响最小，与对照组相比高24％，在统计学上不是很大。然而，条形磁体的S极明显地刺激了猪表皮细胞的增生，比对照组高87％。此研究表明，条形磁体比Bioflex磁体要好，因为其磁场较强，而条形磁体的S极明显地比N极好。
不同磁体的几何形状对器官培养基表皮影响的比较。磁体几何形状 DNA合成+/-std 对照组之％ P值(cpm/7mm活检)对照组(无磁体)4346+/-2911001Bioflex环形 4427+/-3101020.75条形磁体S极 8125+/-8091870.001条形磁体N极 5411+/-1073 1240.172实施例5实施例5评价了乳酸(LA)的剂量响应和乳酸与条形磁体S极对猪表皮细胞增生的协同效应。在此实验中，2.0mM的乳酸影响不大只有0.02，而0.2mM对表皮细胞没有明显影响。如同在前面所看到的，条形磁体的S极对增生有明显的影响。如同所预期，在不同浓度的乳酸存在下，磁体S极的增生都明显地高于对照组。当与只用S极进行对比时，只是最高浓度的乳酸明显不同，与仅仅最高浓度的乳酸是明显的这一结论相似。用LA和S极观察到协同效应，2mM的乳酸比对照组高43％；只用S极比对照组高87％；乳酸+S极比对照组高165％，这高于加和响应43+87＝130。
DNA合成 是对照p值是p值与S(cpm/活体组织) 组的％对照组 极的对平均+/-STD的倍数 比对照组，无磁体4346+/-291 100 1无乳酸乳酸0.02Mm4670+/-497 107 0.37乳酸0.2Mm 5030+/-958 115 0.30乳酸2.0mM 6216+/-1035 143 0.04只用磁体S极 8125+/-809 187 0.0011.00S极+0.02mM乳酸7915+/-2807 182 0.01 0.90S极+0.2mM乳酸 8402+/-512 193 0.0010.64S极+2.0mM乳酸 11523+/-2123265 0.0010.06实施例6实施例6说明在猪表皮增生中S极与N极和乳酸协同效应的比较。暴露在S极下的猪皮比暴露在N极下的猪皮显示出更高的增生作用。只用0.2mM的乳酸对表皮增生没有明显的影响，与实施例5的数据相似。然而，当与N极或S极磁体合用时，0.2mM乳酸比对照组表现出高得多的增生作用。S极+乳酸组表现出最大的增生响应，比对照组高146％，与单用乳酸或单用S极的对照组相比，这表现出协同效应。N极+乳酸组比对照组的增生响应显示出高112％，但与单用N极的对照组相比，这不是协同效应。因此，此实验证实了前面的结论，即在猪皮组织培养基中，乳酸+S极磁体显示出表皮细胞的协同生长响应。组 DNA合成 是对照p值 p值p值p值(cpm/活体组织)组的％与对照组N极/S极S极/S极N极/N极平均+/-STD 比较 +乳酸较对照组 32958+/-11944 100 1.00无磁体和乳酸S极 60668+/-23675 184 0.0063 1.00 1.00N极 54831+/-12393 166 0.0045 0.59 1.00对照组+ 41076+/-24767 124 0.4070.2mMLAS极+LA 81393+/-11738 246 ＞0.0001 0.07N极+LA 69726+/-29913 211 0.00910.306实施例7在实施例7中，测量真皮增生与乳酸和磁极处理的关系。对于真皮，S极比N极显示出更大的增加。单用乳酸明显地刺激了真皮增生。然而与在表皮中的结论相反，磁体与乳酸的合用对真皮不显示协同效应。组DNA合成 是对照 p值 p值 p值 p值(cpm/活体组织) 组的％ 与对照 N极/S极 S极/S极 N极/N极平均+/-STD 组比较 +乳酸+乳酸较对照组9435+/-2221 100 1.00无磁体和乳酸S极 13940+/-7673142 0.234 1.00 1.00N极 11839+/-4095125 0.235 0.639 1.00对照组+ 15306+/-4656162 0.0190.2mMLAS极+LA17244+/-4259182 0.0025 0.298N极+LA16886+/-2227178 0.00210.092实施例8
组成贴片以提供附着在含活性物层的S极取向磁层，贴在皮肤上，使活性物从其层中在取向的磁场中渗入皮肤。
有如下所详细叙述的4种组成方式8A.非织造的贴片A.磁片(S极朝上)B.粘接剂层C.浸有w/粘接剂和活性物的非织造布D.(任选)粘接剂层实施例羟基酸和各种赋形剂以及水溶性粘接剂一起使用，然后用来浸入非织造布。粘接剂/活性物组合物的例子是80％的阴离子聚合物，如Gantrez S-972％氨基甲基丙醇6％乳酸0.2％防腐剂适量的水B层将A层附着在C层上，是选自表1的粘接剂，与A层和C层都相容。
C层是浸有活性物和水溶性粘接剂的非织造布，可以附着在皮肤上。粘接剂选自表2。在该产品的一个实施方案中，C层中的粘接剂用来将C层粘附在A层上。
另一个实施方案是，压敏粘接剂(PSA)D层涂布在非织造布上。PSA涂布得成为连续层，或者是对水和活性物的可以半渗透的连续层。
8B.水凝胶贴片A.磁片(S极朝下(south side down))B.粘接剂层C.浸有w/水凝胶和羟基酸的非织造布D.(任选)粘接剂层实施例带有浸渍1∶10水凝胶羟的聚酯非织造布。凝胶组合物的例子是55％的水
28％的聚丙烯酸钠盐衍生物15％的甘油1％的呫吨胶1％的NaClB层将A层附着在C层上，是选自表1的粘接剂，与A层和C层都相容。
凝胶的表面张力实现C层与皮肤的粘接。
另一个实施方案是，压敏粘接剂(PSA)D层涂布在非织造布上。PSA涂布得成为非连续层，或者是对水和活性物的可以半渗透的连续层。
8C.压敏粘接剂(PSA)贴片A.简单实施例用含有羟基乙酸的粘接剂A.磁片(S极朝下)B.(任选)粘接剂层F.(任选)塑料薄膜C.含有在实施例中的混合活性物5％羟基乙酸的粘接剂层液体储藏剂的例子5％的甘油4％的琥珀酸2％的羟基乙酸1％的Carbopol0.2％的防腐剂适量的水B.控制释放A.磁片(S极朝下)B.粘接剂层F.塑料薄膜C1.含有2％乳酸的液体储藏剂C2.半渗透膜(控制速度)D.粘接剂层液体储藏剂的例子
5％的甘油4％的琥珀酸2％的羟基乙酸1％的Carbopol0.2％的防腐剂适量的水在简单的贴片中，C层中的粘接剂选自表1，适合于将其粘接在A层上。如果没有该粘接剂，可以加入B层和F层。B层是选自表1的，与A层和C层都相容的粘接剂。F层是包括聚氨酯、聚酯、聚乙烯或聚氯乙烯的塑料薄膜。薄膜的厚度是1.0～10.0mil。该薄膜也可以是发泡的，厚度为20～200mil。
控制释放贴片使用B层和F层，来分隔和包含含有液体加上来自磁片的活性物的储藏剂。粘接剂层D可以是涂布在半渗透膜上的非连续层，或者是对水和活性物的流动没有明显影响的连续层。
8D.聚硅氧烷片贴片
B层将A层附着在C层上，是选自表1的粘接剂，与A层和C层都相容。
聚硅氧烷片适合于疤痕、伤口、伸展痕迹和/或其它皮肤疾患的治疗。在袋中的聚硅氧烷流体或凝胶类似地可用于治疗皮肤疾患。
表1粘接剂的类型丙烯酸 乙烯基丙烯酸 丙烯酸酯苯乙烯-丁二烯环氧树脂Chloropane弹性体 聚乙烯醇聚酰亚胺聚硅氧烷 聚氨酯 聚醋酸乙烯亚乙基乙酸乙烯酯 天然橡胶或合成橡胶表2水溶性粘接剂的类型丙烯酸 丙烯酸酯丙烯酸乙烯酯烷基醋酸乙烯苯乙烯磺酸酯 甜菜碱 聚乙烯醇N-乙烯基环酰胺 琥珀酸酯苯乙烯烷基乙烯基醚 乙烯基吡啶 马来酸酯实施例9用MelanoDerm活皮肤等价物检验在S极磁性存在下或不存在下，植酸(0.5％)对于细胞素释放的影响。在培养的过程中，一组组织暴露在S极磁性下，同样的第二系列不暴露在磁性下，在24小时培养后测试培养培养基的IL1-a和PGE-2。在没有磁性时，培养基中IL-1a和PGE-2的浓度都有明显的增加。在有磁性存在下，此增加被抑制。
材料活皮肤等价物MelanoDermTMMEL-300，是含有有功能黑素细胞的三维表皮模型，由Massachusetts州Ashland市的MatTek公司制造，是在此实验中使用的组织。
植酸在水中以0.5％的浓度测试植酸。在初步的实验中，显示出此浓度对Melano Derm组织是无毒的(按MTT评价对组织的生存活力没有影响)。
磁体Edmund Scientific公司提供的6英寸×4英寸×1英寸的立方体状永久定向铁锰陶瓷磁铁，提供给放在磁铁表面上方培养板水平面的磁场强度大约650+/-200Gauss。
方法活体外培养将50L植酸溶液(0.5％)涂布在4个MEL-300组织的角质层表面上。用8个未曾处理的MEL-300组织作为对照组。将一半组织(即2个植酸和4个未处理的对照组)放在6英寸×4英寸铁锰磁铁的S极表面上，在37℃和5％的二氧化碳气氛下培养24小时。
在培养24小时以后，从培养培养基中取出组织，测试MTT，以确定组织的生存活力。测试培养培养基的细胞素IL1-a和PGE-2的含量。将该组织的试样冷冻，在以后7天进行第二次细胞素测定。用商用的96孔Elisa套件进行细胞素测定。
结果IL-1a和PGE-2的Elisa测试结果汇总在表1中，详细结果在表2中。
表1.磁性对植酸刺激细胞素释放的影响
此结果表明，磁性抑制了植酸从皮肤表皮组织刺激IL-1a和PGE-2。因为IL-1a和PGE-2都是前炎性间介物，磁性抑制其释放就表明了磁性的抗炎性效果。因为在没有活性物存在下，磁铁对细胞素的释放没有明显的影响，此结果表明了磁性对如植酸的刺激皮肤产生炎性间介物的活性物抗炎性的影响。
表II植酸对组织释放IL1-a和PGE-2的影响IL1-a(i) IL1-a(ii) 对未处理 有磁性对无磁 PGE-2(i)PGE-2(ii) 对未处理 有磁性对无磁的T检验 性的对偶T检验 的T检验 性的对偶T检验p(T＜＝t)2-Tail p(T＜＝t)2-Tail未处理的 107.8 90.7 25401520116.4 117.1 31382104172.4 83.7 206991047.2 1460396平均105+/-38 1767+/-882未处理的+磁铁 126.1 63.5 950 228163.7 89.1 1793646235.8 120.2 37362583113.2 42043021平均130+/-56 0.345 2145+/-14740.544植酸/无磁铁285.3 186.2 53265621222.9 141.1 46734923平均209+/-61 0.00075136+/-421 0.001植酸/磁体 239.1 158.2 20561899108.9 98.4 23872030平均151.2+/-640.164 0.0572093+/-208 0.493 0.002从表I和表II的结果可以看出，S极磁性抑制了植酸对皮肤表皮组织的原炎性作用(pro-inflammatory)。
实施例10测试了在有S极磁性存在下和没有S极磁性存在下，曲酸、维生素C和育亨宾降低MelanoDerm活皮肤等价物色素沉着的能力。在培养的过程中，将一系列组织暴露在S极磁性下，相同的另一系列不暴露在S极磁性下，在14天的培养以后，用原发颜色形象分析估计每一组织中形成的黑色素。
结果表明在没有磁性存在下每种活性物能够降低色素沉着，而在有S极磁性存在下，降低色素沉着的能力增强了。
材料活皮肤等价物MelanoDermTMMEL-300是含有有功能黑素细胞的三维表皮模型，由Massachusetts州Ashland市的MatTek公司制造，是在此实验中使用的组织。每个MEL-300套件具有24块组织。
色素沉着活性物将3种色素沉着活性物加入到具有如下最终浓度的Melanoderm培养培养基中，(a)曲酸—500mol(b)育亨宾—25mol(c)抗坏血酸—285mol磁体Edmund Scientific公司提供的6英寸×4英寸×1英寸的立方体状永久定向铁锰陶瓷磁铁，提供给放在磁铁表面上方培养板水平面的磁场强度大约650+/-200Gauss。
方法在活体外培养2个MEL-300套件每个有24块组织块，用同样的活性物制备。每种活性物，即维生素C、曲酸和育亨宾放在如上所规定的浓度下的5块组织的培养培养基上。4块组织是未处理的。其余5块组织用此处未报道的刺激活性物处理，因为它对色素沉着没有明显的影响。将一个如上所制备的MEL-300套件放在6英寸×4英寸的铁锰磁铁S极表面上进行培养，同样的第二个MEL-300套件在同样的而且遮蔽了磁铁的培养器的相反一侧(顶部左边对底部右边)进行培养。
在37℃和标准大气压下(5％的二氧化碳)，在养护培养基中培养14天。养护培养基和活性物每周补足4次。在第7天，从每个活性物和对照组中取出2块组织，每组剩下3块组织(未处理组是2块)，用于第14天的评估。
黑色素产生的评估在第14天完成实验时，每个MEL-300培养板的组织块从上面照相。每块组织看起来象是一个小圆饼，具有不同深度的棕色。将两个MEL-300培养皿的照片(一个在磁铁上培养，一个没有磁铁)扫描进Pentium II计算机。使用在Optimas影象定量软件包中的颜色分析宏来测量每个圆饼的颜色原色含量。用蓝色含量作为黑色素颜料指数(使用此影象分析系统，初步的实验证实，黑色素的原色是蓝色的原则—通过比较高加索人类皮肤彩色照片上周围被没有色素沉着的皮肤包围的棕色雀斑和老年斑确定了这一点)。蓝色强度标尺是0～255，这里0是被蓝色饱和，而255是完全没有蓝色。用计算机计算其总体范围0～255的百分比，将每块组织的实际蓝色标尺读数转变为a％蓝色值。
在下面的表格中给出了关键的结论。
磁性对去色素沉着活性物活性的影响
在没有磁性时，3种去色素沉着活性物显示出比未处理的对照组组织更少的色素沉着。在磁铁S极侧面培养的组织比未处理的对照组，即在没有磁铁时所见到的表现出较强的色素沉着降低。在有磁铁存在下和没有磁铁存在下，活性物之间的差别，在统计上是显著的(p＜0.05)。在对照组所见到的色素沉着，对于没有磁铁(78％)和有磁铁(79％)，没有明显的差别，显示出在没有活性物存在下，S极磁性不具有去色素沉着的作用。因此，该结果表明，S极磁性增强了曲酸、育亨宾和维生素C的去皮肤色素沉着作用。
实施例11此实施例测量各种活性物在与磁体一起使用时，对活体外脂肪细胞(sebocyte)产生脂的影响。
从成年男性得到的人脂肪细胞的二次培养基在48孔组织培养板(Massachusetts州，Cambridge市Costar公司)的内24孔中生长直至汇合。脂肪细胞生长培养基含有Clonetics角质细胞基底培养基(KBM)再补充以14μg/mL的牛垂体提取液、0.4μg/mL的氢化可的松、5μg/mL胰岛素、10ng/mL表皮生长因子、1.2×10-10M霍乱毒素、100单位/mL青霉素和100μg/mL链霉素。全部培养基都在37℃和7.5％的二氧化碳存在下进行培养。培养基每周更换3次。
在实验的第一天，除去生长培养基，用灭菌的Dulbecco改性Eagle培养基(DMEM；无酚红)洗涤脂肪细胞3次。在每个试样(一式三份)中加入新鲜DMEM，同时加入5μL溶解在乙醇中的测试试剂(312.5μM水杨酸三异癸酯或10μM亚麻酸视黄酯；每个试样一式六份)中的测试试剂。对照组包括单加入的乙醇。每块磁铁夹在两个板之间24小时。对于脂肪细胞板中的2个，状态是N极指着上方，对于另外两个，状态相反即S极朝上，一个板作为对照组(没有磁铁)。
在24小时以后，加入14C-乙酸盐缓冲溶液(最终浓度为5mM，56mCi/mmol比活性)。然后将脂肪细胞返回到培养基中经过4小时，在此以后用磷酸盐缓冲液淋洗每个培养基3次，除去未结合的标记物。采集保留在脂肪细胞中的放射性标记物，用Beckman闪烁计数器计数。
用JMP软件包进行统计分析。
用Student T检验比较每一对α＝0.05正值表示一对平均值显著不同缩写Cont没有磁铁的对照组板TDS水杨酸三异癸酯RL亚麻酸视黄酯NTN极磁铁面朝上，组织培养板在磁铁上面NBN极磁铁面朝上，组织培养板在磁铁下面STS极磁铁面朝上，组织培养板在磁铁上面SBS极磁铁面朝上，组织培养板在磁铁下面
权利要求
1.一种化妆用双贴片，它包括(i)一种静磁体层；(ii)一种含有有化妆效果成分的非织造的、穿透皮肤的水凝胶或聚硅氧烷片；其中两层靠粘接剂彼此粘结在一起。
2.一种处理皮肤的化妆方法，该方法包括(a)将静磁体的S极贴在皮肤上；以及(b)将一种在可以用在化妆中的载体中含有有化妆效果的成分组成的皮肤化妆护理组合物涂布在皮肤上。
3.如权利要求2的方法，其中磁体的厚度至少为1cm。
4.如权利要求2的方法，其中有化妆效果的成分选自羟基酸、类视黄醇、维生素C、植酸、育亨宾和曲酸。
全文摘要
基于将静磁体的S极贴在皮肤上,同时在皮肤上涂布一种化妆组合物的皮肤化妆方法。还公开了一种含有一个静磁体层和一种非织造的、含有有化妆效果成分的穿透皮肤的水凝胶或聚硅氧烷片的化妆用双贴片,其中的两层靠粘接剂彼此粘结在一起。
文档编号C08L83/00GK1252966SQ9912363
公开日2000年5月17日 申请日期1999年10月29日 优先权日1998年10月29日
发明者A·P·兹奈登, A·W·约翰逊, C·A·博斯科, S·萨马拉斯 申请人:尤尼利弗公司