一种促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明属于培养基技术领域，涉及一种促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基，特别涉及一种促使难于产生游动孢子囊的辣椒疫霉菌菌株产生游动孢子囊的培养基。
【背景技术】
[0002]研宄中一般采用胡萝卜培养基来培养辣椒疫霉菌。但是，由于辣椒疫霉菌菌株P2和P3在红颜色胡萝卜培养基上很难产生游动孢子囊，因此无法满足获得大量游动孢子进行接种的要求。因此需要探索一种能够促使不易产生孢子囊的培养基来诱导游动孢子囊的形成，进而完成接种实验。
【发明内容】
[0003]本发明的目的在于克服现有技术中存在的缺点与不足，提供一种促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基的制备方法。
[0004]本发明的另一目的在于提供由上述制备方法得到的能够促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基。
[0005]本发明的再一目的在于提供应用所述的促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基诱导辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的方法。
[0006]本发明的目的通过下述技术方案实现:一种促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基的制备方法，包括如下步骤:将胡萝卜去皮后取200g，切成小块，于1500ml沸水中煮30分钟，然后过滤，取滤液，往滤液中加水补至1000ml，加入15g琼脂，搅拌均匀，121°C灭菌15分钟，得到促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基(黄色胡萝卜培养基)。
[0007]所述的胡萝卜为黄色胡萝卜。
[0008]所述的过滤优选采用纱布过滤；
[0009]所述的纱布优选为两层纱布。
[0010]一种促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基，由上述制备方法得到。
[0011]应用所述的促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基诱导辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的方法，包括如下步骤:
[0012]将辣椒疫霉菌的菌块(d = 8mm)接种于所述的促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基(黄色胡萝卜培养基)上，28°C暗培养5天后于间歇光照条件下诱导，得到游动孢子裳；
[0013]所述的间歇光照为12h光照后12h黑暗。
[0014]于第3天开始观察孢子囊的产生情况并计数，计数的方法如下:用移液枪吸取5ml无菌水于培养基上，然后用毛笔轻轻地刷洗培养基，使得游动孢子囊脱落在水里；然后用纱布滤去菌丝体，得到滤液；用移液抢吸取20ul的滤液置于载玻片上，并在显微镜下观察并记录游动孢子囊产生数量。每个样本重复观察5次，求平均值作为该菌株平均产孢量。
[0015]本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果:本发明通过采用黄色胡萝卜进行配置培养基，使得得到的培养基能够有效的诱导并促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊，解决了由于辣椒疫霉菌菌株P2和P3在红颜色胡萝卜培养基上很难产生游动孢子囊的问题，能够有效满足获得大量游动孢子进行接种的要求，有利于研宄者定量研宄这些菌株的致病力。
【附图说明】
[0016]图1是不同辣椒疫霉菌的菌株在红色胡萝卜培养基上产生游动孢子囊的数量的结果比较图；
[0017]图2是不易产生孢子囊的辣椒疫霉菌菌株分别在红色胡萝卜培养基和黄色胡萝卜培养基上诱导产生的游动孢子囊的结果。
【具体实施方式】
[0018]下面结合实施例及附图对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
[0019]实施例1
[0020]一种促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基的制备方法，包括如下步骤:将黄色胡萝卜去皮后取200g，切成小块，于1500ml沸水中煮30分钟，然后采用两层纱布过滤，取滤液，往滤液中加水补至1000ml，加入15g琼脂，搅拌均匀，121°C灭菌15分钟，得到促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基(黄色胡萝卜培养基)。
[0021]实施例2
[0022]应用实施例1的促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基诱导辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的方法，包括如下步骤:
[0023]将辣椒疫霉菌的菌块(d = 8mm)接种于实施例1的促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基(黄色胡萝卜培养基)上，28°C暗培养5天后于间歇光照条件下诱导，得到游动孢子囊；
[0024]间歇光照为12h光照后12h黑暗。
[0025]于第3天开始观察孢子囊的产生情况并计数，计数的方法如下:用移液枪吸取5ml无菌水于培养基上，然后用毛笔轻轻地刷洗培养基，使得游动孢子囊脱落在水里；然后用纱布滤去菌丝体，得到滤液；用移液抢吸取20ul的滤液置于载玻片上，并在显微镜下观察并记录游动孢子囊产生数量。每个样本重复观察5次，求平均值作为该菌株平均产孢量。结果如图2所示。
[0026]对比实施例
[0027]I)将6个不同地点采集的辣椒疫病病株上分离到的疫霉菌菌株(P1-P6)的菌块(d = 8mm)分别接种于红色胡萝卜培养基和黄色胡萝卜培养基上，28°C暗培养5天后于间歇光照条件下诱导，分别在第3天、第6天和第9天观察两种胡萝卜培养基上疫霉菌孢子囊的形成；
[0028]2)具体观察和计数方法如下:用移液枪吸取5ml无菌水于培养基上，然后用毛笔轻轻地刷洗培养基，使得游动孢子囊脱落在水里；然后用纱布滤去菌丝体，得到滤液；用移液抢吸取20ul的滤液置于载玻片上，并在显微镜下观察并记录游动孢子囊产生数量。每个样本重复观察5次，求平均值作为该菌株平均产孢量。
[0029]结果如图1和图2所示。从图中可以看出，黄色胡萝卜培养基可以促使原本在红色胡萝卜培养基上不产生游动孢子囊的P3菌株或产生极少量游动孢子囊P2菌株产生游动孢子囊。
[0030]上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基的制备方法，其特征在于，包括如下步骤:将胡萝卜去皮后取200g，切成小块，于1500ml沸水中煮30分钟，然后过滤，取滤液，往滤液中加水补至1000ml，加入15g琼脂，搅拌均匀，121°C灭菌15分钟，得到促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基。
2.根据权利要求1所述的促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基的制备方法，其特征在于，所述的胡萝卜为黄色胡萝卜。
3.根据权利要求1所述的促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基的制备方法，其特征在于，所述的过滤采用纱布过滤。
4.一种促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基，由权利要求1-3任一项所述的制备方法得到。
5.应用权利要求4所述的促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基诱导辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的方法，其特征在于，包括如下步骤:将辣椒疫霉菌的菌块接种于所述的促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基上，28°C暗培养5天后于间歇光照条件下诱导，得到游动孢子囊；所述的间歇光照为12h光照后12h黑暗；所述的辣椒疫霉菌的菌块为d =8mm的辣椒疫霉菌菌块。
【专利摘要】本发明具体公开了一种促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基，属于培养基技术领域。该培养基通过如下方法得到：将胡萝卜去皮后取200g，切成小块，于1500ml沸水中煮30分钟，然后过滤，取滤液，往滤液中加水补至1000ml，加入15g琼脂，搅拌均匀，121℃灭菌15分钟，得到促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊的培养基。本发明通过采用黄色胡萝卜进行配置培养基，使得得到的培养基能够有效的诱导并促使辣椒疫霉菌产生游动孢子囊，解决了由于辣椒疫霉菌菌株P2和P3在红颜色胡萝卜培养基上很难产生游动孢子囊的问题，能够有效满足获得大量游动孢子进行接种的要求，有利于研究者定量研究这些菌株的致病力。
【IPC分类】C12N1-14, C12R1-645, C12N3-00
【公开号】CN104726390
【申请号】CN201510116381
【发明人】杨叔青, 赵君, 刘湘萍, 王勇, 陈聪, 胡栓红, 王凯, 张之为, 杨志刚, 朱春侠, 高婧, 郑红丽, 聂惠
【申请人】内蒙古农业大学, 内蒙古自治区农牧业科学院
【公开日】2015年6月24日
【申请日】2015年3月17日