一种去除含色拉油废水cod的高效复合菌剂及其应用
【技术领域】
[0001]本发明涉及一种去除含色拉油废水COD的高效复合菌剂，还涉及去除色拉油废水COD的复合菌剂应用方法。
【背景技术】
[0002]随着色拉油需求量急剧上升，色拉油加工中的高浓度含油废水对环境造成的影响已引起关注。色拉油加工废水是指对大豆等压榨或浸出所得的毛油进行脱胶、脱酸、脱色、脱臭、脱蜡、脱酯等处理所产生的废水。此精炼过程中产生大量的有机废水，这种废水的特点是高0?(0 01)可达100001^/1以上)、油含量大(P Qil可达3000mg/L以上)、B/C
0.5-0.6。目前对于色拉油加工废水的处理多采用物化法预处理除油及活性污泥工艺或厌氧工艺处理。部分油脂进入污水处理系统后，通常会导致产生气泡，并会促进丝状菌的生长，影响污水处理生化系统的运行。因此为强化色拉油废水处理过程中的生化系统的除油功能，加快对油脂的降解，降低系统出水超标的可能性，减少产生的泡沫，本发明提供的色拉油废水处理的核心一一强化微生物，利用从自然界中筛选得到的酵母菌及细菌构成的功能菌群，在好氧生物处理工艺中对高浓度的脂肪酸、甘油酯及其它有机物进行高效分解，以实现提高污水处理系统的出水水质。
【发明内容】
[0003]针对现有技术中的缺陷，本发明的目的是提供一种高效的去除色拉油废水COD的复合菌剂及其制备方法。
[0004]本发明的另一目的是提供上述复合菌剂的应用方法。
[0005]为了实现上述发明目的，本发明采用的技术方案如下:
[0006]一种去除含色拉油废水COD的复合菌剂，其特征在于，所述复合菌剂包括菌株:热带假丝酵母HY-A-3，CGMCC N0.10424 ;沙雷氏菌SH-AB-1，CGMCC N0.10427 ;热带假丝酵母SZ2-A-3，CGMCC N0.10425 ;粘质沙雷氏菌 LB1-AB-2，CGMCC N0.10426。
[0007]进一步，所述热带假丝酵母HY-A-3、沙雷氏菌SH-AB-1、热带假丝酵母SZ2-A-3和粘质沙雷氏菌LB1-AB-2的菌量分别占总菌量体积的25-45%、25-45%、8-25%和2-25%。
[0008]进一步，所述热带假丝酵母HY-A-3、沙雷氏菌SH-AB-1、热带假丝酵母SZ2-A-3和粘质沙雷氏菌LB1-AB-2的菌量分别占总菌量体积的30-40 %、30-40 %、15-20 %、3-20 %。
[0009]进一步，所述热带假丝酵母HY-A-3、沙雷氏菌SH-AB-1、热带假丝酵母SZ2-A-3和粘质沙雷氏菌LB1-AB-2的菌量分别占总菌量体积的33%、33%、17%、17%。
[0010]本发明还提供了一种去除含色拉油废水COD的复合菌剂的制备方法，包括以下步骤:分别取假丝酵母HY-A-3和SZ2-A-3单菌落接种于10mL酵母浸出粉胨葡萄糖培养基中，取沙雷氏菌SH-AB-1和粘质沙雷氏菌LB1-AB-2单菌落接种于10mL牛肉膏蛋白胨液体培养基中，在180rpm、28°C下振荡培养18h ;将培养18h的四株菌进行复合。
[0011]本发明还提供了一种去除含色拉油废水COD的方法，包括如下步骤:将包含热带假丝酵母HY-A-3、沙雷氏菌SH-AB-1、热带假丝酵母SZ2-A-3和粘质沙雷氏菌LB1-AB-2的复合菌剂分别按占总菌量体积的25-45%、25-45%、8-25%和2-25%的配比接种于色拉油废水中，以及培养2?3天。
[0012]进一步，所述热带假丝酵母HY-A-3、沙雷氏菌SH-AB-1、热带假丝酵母SZ2-A-3和粘质沙雷氏菌LB1-AB-2的菌量分别占总菌量体积的30-40%、30-40%、15-20%和3_20%。
[0013]更进一步，所述热带假丝酵母HY-A-3、沙雷氏菌SH-AB-1、热带假丝酵母SZ2-A-3和粘质沙雷氏菌LB1-AB-2的菌量分别占总菌量体积的33%、33%、17%和17%。
[0014]进一步，所述复合菌剂以菌液形式接种，其接种量为处理废水体积的1-5% (v/
V) O
[0015]更进一步，所述的接种量为处理废水体积的1.5-2.5% (v/v)。
[0016]本发明的效果在于:采用本发明所述的复合菌剂及其应用，对含色拉油废水COD的去除率可达75%以上。
【附图说明】
[0017]图1热带假丝酵母Candida tropicalis HY-A-3的系统进化树；
[0018]图2沙雷氏菌Serratia sp.SH-AB-1的系统进化树；
[0019]图3热带假丝酵母Candida tropicalis SZ2-A-3的系统进化树；
[0020]图4粘质沙雷氏菌Serratia marcescens LB1-AB-2的系统进化树。
[0021]分类命名:热带假丝酵母，拉丁文学名:Candida tropicalis HY-A-3
[0022]保藏日期:2015年I月22日；
[0023]保藏单位全称及简称:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)
[0024]保藏编号:CGMCCN0.10424 ；
[0025]分类命名:沙雷氏菌，拉丁文学名:Serratia sp.SH-AB-1
[0026]保藏日期:2015年I月22日；
[0027]保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)
[0028]保藏编号:CGMCCN0.10427 ；
[0029]分类命名:热带假丝酵母，拉丁文学名:Candida tropicalis SZ2-A-3
[0030]保藏日期:2015年I月22日；
[0031]保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)
[0032]保藏编号:CGMCCN0.10425 ；
[0033]分类命名:粘质沙雷氏菌，拉丁文学名:Serratia marcescens LB1_AB_2
[0034]保藏日期:2015年I月22日；
[0035]保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(CGMCC)
[0036]保藏编号:CGMCCN0.10426 ；
【具体实施方式】
[0037]以下举例说明本发明，但是并不用于限定本发明的保护范围。
[0038]为了解决上述问题，本发明采集某购物中心餐厅下水道污水、农贸市场肉摊旁下水沟污水、污水处理厂生化反应池污泥及某植物油加工厂污水处理池旁泥渣等样品，经富集、驯化，分离、纯化，筛选出具有去除色拉油废水COD的纯菌株，再经初筛、复筛，选出高效功能菌，构建去除色拉油废水COD的复合菌剂。
[0039]本发明中的HY-A-3分离于某购物中心餐厅下水道污水中；SH-AB_1分离于北京某农贸市场肉摊旁下水沟污水中；SZ2-A-3分离于河北某污水处理厂生化反应池污泥中；LB1-AB-2分离于北京某植物油加工厂污水处理池旁泥渣。对复合菌剂中4株菌分别进行形态特征观察和部分生理生化鉴定。HY-A-3菌体形态呈椭圆形，大小约为5?6X7?9μπι，在酵母浸出粉胨葡萄糖培养基(YB)培养基)上菌落呈圆形、乳白色、光滑、凸起、边缘整齐，在10%的NaCl溶液中仍能较好生长；SH-AB-1菌体呈短杆状，大小约为0.5?0.8X0.9?
1.3 μπι，无芽孢，菌落呈圆形、凸起、光滑、乳白色，革兰氏染色阴性，接触酶阳性，淀粉水解阴性，不能在7%浓度以上的NaCl溶液中生长；SZ2-A-3菌体形态呈椭圆形，大小约为5?7 X 8?9 μ m，在YPD培养基上菌落圆形、光滑、凸起、乳白色，接触酶阳性，在10 %的NaCl溶液中仍能较好生长；LBl-AB-2菌体呈短杆状，大小约为0.5?0.8X0.6?1.0 μ m，无芽孢，菌落圆形、光滑、凸起、红色，革兰氏染色阴性，接触酶阳性，淀粉水解阴性，不能在7%浓度以上的NaCl溶液中生长。对4株菌分别进行分子生物学鉴定，HY-A-3和SZ2-A-3提取基因DNA后进行18S rDNA的PCR扩增，SH-AB-1和LB1-AB-2进行16S rDNA的PCR扩增，将获得的片段用于测序。测序后序列结果在Genbank中进行Blast比对，并构建系统进化树，如图1-图4所示。
[0040]由测序结果及构建的系统进化树，结合4株菌形态特征、生长条件、生理生化鉴定结果，可以初步鉴定菌株HY-A-3和SZ2-A-3为热带假丝酵母(Candida tropicalis)，LB1-AB-2 为粘质沙雷氏菌(Serratia marcescens), SH-AB-1 属于沙雷氏菌属(Serratiasp.)。上述四种菌株均保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(地址:北京市朝阳区北辰西路I号院3号)。
[0041]本发明复合菌剂中，热带假丝酵母HY-A-3、沙雷氏菌SH-AB-1、热带假丝酵母SZ2-A-3、粘质沙雷氏菌LB1-AB-2的菌量分别占总菌量体积的25-45%、25_45%、8_25%和2-25%，优选为分别占总菌量体积的30-40%、30-40%、15-20%和3-20%。
[0042]上述复合菌剂的制备方法是，分别取假丝酵母HY-A-3和SZ2-A-3单菌落接种于10mL酵母浸出粉胨葡萄糖培养基(YPD液体培养基)中，取沙雷氏菌SH-AB-1和粘质沙雷氏菌LB1-AB-2单菌落接种于10mL牛肉膏蛋白胨液体培养基中，在180rpm、28°C下振荡培养18h。将培养18h的热带假丝酵母HY-A-3、沙雷氏菌SH-AB-1、热带假丝酵母SZ2-A-3、粘质沙雷氏菌LB1-AB-2按菌量比占总菌量体积的30-40%、30-40%、15-20%和3-20%进行复合。
[0043]上述复合菌剂的应用，将复合菌剂按1-5%的浓度接种于含色拉油量为1000-2000mg/L的油脂废水，对废水COD的去除率可达75%以上。
[0044]实施