一种从加纳籽中提取五羟基色氨酸的生产工艺的制作方法
【技术领域】
[0001]本发明涉及五羟基色氨酸领域，特别涉及一种从加纳籽中提取五羟基色氨酸的生产工艺。
【背景技术】
[0002]五羟基色氨酸(又名5-羟基色氨酸、五羟基色氨酸)是一种天然的植物提取物，分子量为220.23。五羟基色氨酸主要是从加纳籽中提取，加纳籽是热带豆科灌木植物加纳谷物Griffonia simplicifolia的干燥种子，野生于加纳、象牙海岸和多哥等西非国家。五轻基色氨酸具有多种生物学作用，是重要的神经类药物和保健药原料，临床上应用非常广泛，有重要的利用价值和广阔的市场前景。目前，国内生产五羟基色氨酸存在得率偏低，晶体外光色泽较深，含量不稳定，采用甲醇提取的溶剂残留较多，树脂处理往往周期较长等缺点。
【发明内容】
[0003]针对上述问题，本发明的目的在于提供一种产品纯度好、收率高、处理周期短的从加纳籽中提取五羟基色氨酸的生产工艺。
[0004]为达到上述目的，本发明所提出的技术方案为:一种从加纳籽中提取五羟基色氨酸的生产工艺，其特征在于，包括如下步骤:
步骤I粉碎:将加纳籽原料粉碎至40目-100目大小；
步骤2闪式套提:常温下，加纳籽粉末采用闪式提取器进行提取，包括三次提取，其中:第一次提取，溶剂:原料质量比=6:1-10:1，添加溶液质量0.5%-1%的NaHS03，提取时间为5-15分钟，固液分离后得第一次提取液和第一次提取料渣；其中第一次提取液进入步骤3中过滤；
第二次提取:溶剂:第一次提取料渣质量比=4:1-8:1，添加溶液质量0.5%-1%的NaHS03，提取时间为6-10分钟，固液分离后得第二次提取液和第二次提取料渣；
第三次提取:纯水:第二次提取料渣质量比=4:1-8:1，添加溶液质量0.25%-0.75%的NaHS03，提取时间为6-10分钟，固液分离后得第三次提取液和第三次提取料渣；
所述的闪式套提一次为提取15批，其中第I批提取中第一次提取、第二次提取的溶剂为纯水，第2批-第15批提取中第一次提取的溶剂采用上一批次第二次提取液，第二次提取的溶剂采用上一批次提取的第三次提取液；
步骤3过滤:将第一次提取液先用板框过滤器过滤；板块过滤液再采用微滤膜分离装置过滤，微滤膜分离装置中的微滤膜分离孔径为5-15 μ m，得微滤透析液；
步骤4大孔树脂吸附解析:微滤透析液采用大孔树脂吸附，解析后得解析液；
步骤5调pH除杂:解析液用酸调pH至4.5±0.2，静置lh_3h ；
步骤6真空浓缩:将静置好的解析液过滤，过滤后加入解析液质量1%_5%的NaHS03，60°C以下真空浓缩至料液中五羟基色氨酸含量大于70mg/ml，得五羟基色氨酸浓缩液；
步骤7结晶:五羟基色氨酸浓缩液在析晶罐静置6小时以上； 步骤8离心:五羟基色氨酸浓缩液经离心机离心后，得五羟基色氨酸半成品，五羟基色氨酸半成品用1-3倍质量的水洗晶体I到2次；
步骤9干燥:60°C以下真空干燥，得五羟基色氨酸晶体。
[0005]进一步，步骤4中所述的大孔树脂吸附中上样流速为lBV/h，吸附至HPLC检测流出液浓度达到0.4mg/ml ;然后将树脂柱中剩余的料液放空；加入解析液，解析液为20%乙醇+0.5%酸度，流速为lBV/h，得解析液，其中解析终点为解析液流出浓度至0.4mg/ml。
[0006]采用上述技术方案，本发明所述的从加纳籽中提取五羟基色氨酸的生产工艺，具体产品纯度好、收率高等优点，在此工艺条件下验证实验得出:吸附量在50mg/ml左右，解析率可达到97%以上，晶体纯度达到99%以上，浓缩损失在1%以下，结晶率达65%以上，总得率8.5%以上。
【具体实施方式】
[0007]下面结合具体实施例，对本发明做进一步说明。
[0008]实施例1
步骤I粉碎:加纳籽原料200g，粉碎至40-100目，分两份提取，每份10g ；
步骤2闪式套提:常温下，加纳籽粉末采用闪式提取器进行提取，
第一批提取
第一次提取:第一份原料添加800ml纯水，添加Ig的NaHSO3，常温闪提lOmin，采用抽滤固液分离，得一次提取液，料液备用；
第二次提取:第一次提取料渣加入600ml的纯水，添加Ig的NaHSO3,常温提取8min，采用抽滤固液分离，得第二次提取液，料液备用；
第三次提取:第二次提取料渣中加入600ml的纯水，添加0.5gNaHS0j^，常温提取6min,采用抽滤固液分离，得第三次提取液，料液备用；
第二批提取
第一次提取:第一批提取的第二次提取液补水到800ml加入到第二份原料中，添加Ig的NaHSO3,常温提取lOmin，采用抽滤固液分离，得第二份原料第一次提取液，料液和第一份原料第一批提取的第一次提取液混合备用；
第二次提取:第一批提取的第三次提取液补水到600ml加入到，添加Ig的NaHSO3,常温提取8Min，采用抽滤固液分离，得第二次提取液，料液备用；
第三次提取:第二次提取渣加入600ml的纯水，添加0.5g的NaHSO3,常温提取6min，采用抽滤固液分离，得第三次提取液，料液备用；
步骤3过滤:合并两批提取的第一次提取液，共1250ml，过滤至澄清透亮无杂质，浓度为 13.8mg/ml ；
步骤4大孔树脂吸附解析:第一次提取液过装有350ml大孔吸附树脂的层析柱，流速为350ml/h，流出液浓度达到0.4mg/ml，即吸附饱和；放空层析柱里面的料液；解析液为20%乙醇+0.5%酸度，流速为350ml/h，解析终点为，解析液流出浓度至0.4mg/ml ；
步骤5调pH除杂:解析液用盐酸调pH4.56，静置lh，过滤沉淀物，得1450ml解析液； 步骤6:过滤后的解析液加入0.5g的NaHSO3,60°C以下真空浓缩，浓缩到200ml放置析晶; 步骤7结晶:五羟基色氨酸浓缩液在析晶罐静置6小时以上；
步骤8离心:五羟基色氨酸浓缩液经离心机离心后，得五羟基色氨酸半成品，五羟基色氨酸半成品用1-3倍质量的水洗晶体I到2次；
步骤9干燥:60°C以下真空干燥，得12.8g纯白色