戴尔福特菌lw26及其在降解氯苯中的应用_3

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转速为均160rpm)。分别在Oh和24h取样,检测摇瓶中的氯苯浓度和菌株 的菌密度。
[0057] 结果如图4所示,在pH为6. 0、7. 0、8. 0、9. 0时,戴尔福特菌LW26生长状况良好, 在24h内对氯苯的去除率均达90%以上,对氯苯去除效率较高。而在pH为4、10的培养基 中,经24h的培养,菌密度仍然很低,氯苯的去除率均在30%以下,表明在过酸或过碱的条 件下,戴尔福特菌LW26都难以生存。
[0058] (3)戴尔福特菌LW26对不同初始浓度的氯苯的降解情况
[0059] 在不同氯苯初始浓度下,实施戴尔福特菌LW26对氯苯的降解,结果发现LW26最高 可降解500mg/L氯苯,具体实验方案如下:
[0060] 在300mL的摇瓶中加入50mL无机盐培养基,pH值7. 0,110°C灭菌40分钟后,中加 入氯苯作唯一碳源,使氯苯的初始浓度分别为l〇〇、200、300、400、500mg/L。再分别加入lmL 实施例2方法经斜面和种子培养至对数生长期的戴尔福特菌LW26菌悬液(0D_= 0. 15)。 实验过程中,每个初始浓度设计三个平行样和一个空白对照(不加LW26菌悬液)。将各个 样品放置在30°C的摇床中恒温培养(摇床转速为均160rpm),每隔2h取样,检测氯苯浓度 和菌株的菌密度,绘制戴尔福特菌LW26对氯苯的降解曲线图以及其生长曲线图。
[0061] 结果如图5所示,当氯苯初始浓度在400mg/L及以下时,戴尔福特菌LW26可快速 降解氯苯,细菌生长状况良好。当氯苯初始浓度在400mg/L以上时,由于底物的抑制作用, 降解能力略有下降,该菌株对氯苯的最高降解浓度可达500mg/L。
[0062] 实施例4 :戴尔福特菌LW26净化模拟氯苯废气
[0063] 利用生物滴滤塔处理模拟氯苯废气,工艺流程如图6所示。
[0064] 由空气栗1鼓出的空气分为两路,一路经质量流量计2进入装有氯苯废液的吹脱 瓶4中,用于吹脱氯苯,吹脱出的氯苯气体与另一路经过转子流量计3进入混合瓶5的空气 混合均匀后,通过控制质量流量计和转子流量计模拟得到不同浓度的氯苯废气。气体自下 而上流经填料塔,填料塔中填料为鲍尔环,循环营养液则由蠕动栗11提升至塔顶后向下喷 淋,为填料上附着的微生物提供其所需营养元素,在填料取样口 10取样测定生物量,在塔 顶的气体采样口测定出气浓度,处理后的废气经尾气排放口 8流出,营养液喷淋后流入储 液瓶6,通过碱液瓶7调节储液瓶6内液体pH值。装置的操作温度由缠绕于塔体的电热丝 及控温器控制在30°C左右。营养液的喷淋量为5~6L/h,每隔4d更换一次营养液,其pH采 用0. 5mol/L的NaOH水溶液调节以维持在6. 8~7. 2之间。将按照实施例2方法经斜面、 种子和发酵培养制备的戴尔福特菌LW26菌悬液(0D_= 0. 5)接种至生物滴滤塔中,接种 量为2L。挂膜启动过程中停留时间为90s,初始氯苯进气浓度为200mg/m3。
[0065] 如图7所示,滤塔运行22d后,挂膜启动成功,当氯苯进口浓度为750~850mg/m3 时,氯苯的去除率仍大于90%。
[0066] 实施例5 :戴尔福特菌LW26处理模拟氯苯废水
[0067] 利用SBR反应器处理模拟氯苯废水工艺流程如图8所示。
[0068] 在反应器中按照1 : 1的比例接种活性污泥和LW26菌液(按照实施例2方法经斜 面、种子和发酵培养制备)。反应器总容积为4L,有效容积为3L,每个周期运行时间为8h, 具体运行参数如下:采用瞬时进水和瞬时出水,每个周期内曝气时间和沉淀时间分别为7h 和lh。运行期间,反应器内DO为2~4mg/L,MLSS为1. 5~3g/L,pH6. 5~7. 5,温度通过 温控仪控制在25±1°C。
[0069] 如图9所示,SBR运行稳定后,当进水氯苯浓度为110mg/L时氯苯去除效率可达到 92%以上。
【主权项】
1. 戴尔福特菌(Delftia tsuruhatensis)LW26,保藏于中国典型培养物保藏中心,保藏 日期为2015年3月15日,保藏编号CCTCC No :M 2015113,地址:中国,武汉,武汉大学,邮 编 430072。2. -种权利要求1所述的戴尔福特菌LW26在微生物降解氯苯中的应用。3. 如权利要求2所述的应用,其特征在于所述的应用是将戴尔福特菌LW26接种至含有 氯苯的无机盐培养基中,于23~40°C,pH 4. 0~10. 0的条件下培养,实现对氯苯的降解。4. 如权利要求3所述的应用,其特征在于所述氯苯在无机盐培养基中初始浓度为 100~500mg/L ;所述戴尔福特菌LW26以种子培养或发酵培养后的湿菌体经无机盐培养基 稀释获得的〇D6。。= 0. 1-0. 5的菌悬液形式加入,菌悬液体积接种量为1-5%。5. 如权利要求3所述的应用,其特征在于所述的无机盐培养基组成为:CaCl 20. 023g/ L,MgSO4O. 2g/L,(NH4) 2S042. 5g/L,KH2PO4L Og/L,Na2HP044. 5g/L,微量元素母液 lmL/L,溶剂 为水,pH 7. 0~7. 5 ;所述的微量元素母液组成为:FeS04.7H20 I. 0g/L,CuS04.5H20 0? 02g/ L,H3BO30.0 14g/L,MnSO4 ? 4H20 0? 10g/L,ZnSO4 ? 7H20 0? 10g/L,Na2MoO4 ? 2H20 0? 02g/L, CoCl2 ? 6H20 0? 02g/L,溶剂为水。6. 如权利要求4所述的应用,其特征在于,所述的菌悬液按如下步骤获得: (1)斜面培养:将戴尔福特菌LW26接种于R2A固体培养基,28~32°C培养48h,获得斜 面菌体;所述R2A固体培养基组成为:酵母粉0. 50g/L,胰蛋白胨0. 50g/L,干酪素0. 50g/L, 葡萄糖 0? 50g/L,可溶性淀粉 0? 50g/L,丙酮酸钠 0? 30g/L,KH2PO4O. 45g/L,MgSO40.0 5g/L,琼 脂15~18g/L,溶剂为水,pH 7. 2 ; ⑵种子培养:从步骤⑴斜面上挑取一接种环菌落接种至种子培养基中,28~32°C 培养24~36h,获得种子液;所述的种子培养基为R2A液体培养基,除无琼脂外,其余组分与 R2A固体培养基相同; (3) 发酵培养:将步骤(2)获得的种子液以体积浓度5~10%的接种量接种至发酵 培养基,于28~32°C,pH 6. 0~8. 0条件下培养24~36h,获得发酵液;所述发酵培养 基组成为:酵母粉 〇? 5g/L,CaCl20.0 23g/L,MgSO4O. 2g/L,(NH4) 2S042. 5g/L,KH2PO4L Og/L, Na2HP044. 5g/L,微量元素母液lmL/L,溶剂为水,pH 7. 0~7. 5 ; (4) 菌悬液制备:将发酵液在6000rpm离心10min,弃上清液,用已灭菌的无机盐培养基 清洗菌体,然后6000rpm离心10min,弃上清液,重复洗涤2次,将获得的湿菌体用无菌无机 盐培养基悬浮,获得所述的菌悬液。
【专利摘要】本发明提供了一株可高效降解氯苯的菌株—戴尔福特菌(Delftiatsuruhatensis)LW26及其在微生物分解处理氯苯方面的应用,所述戴尔福特菌LW26,保藏于中国典型培养物保藏中心,地址:中国,武汉,武汉大学,430072,保藏日期:2015年3月15日,保藏编号:CCTCC?NO:M2015113;本发明提供的氯苯降解菌能利用氯苯作为唯一碳源与能源繁殖并将其完全矿化成CO2和H2O;该菌株于23℃~30℃、pH6.0~9.0的环境中能高效降解氯苯;该菌株有较强的环境适应能力,本发明将在氯苯废气和废水治理实践中发挥重要作用。CCTCC NO:M201511320150315
【IPC分类】C12N1/20, C02F3/34, C02F101/36, B01D53/84, B01D53/70, C12R1/01
【公开号】CN105039222
【申请号】CN201510498197
【发明人】陈建孟, 叶杰旭, 陈东之, 李伟, 林彤晖, 诸葛蕾, 江宁馨
【申请人】浙江工业大学
【公开日】2015年11月11日
【申请日】2015年8月14日
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