精子选择方法及载体的制作方法_3

文档序号:9411465阅读:来源:国知局
逆选择,即选择不表达这一(或若干)性状的精子类型。
[0096]实施例4
[0097]如图4可知,本实施例公开了一种载体。其中,该载体为单精子显微载体I,在对单个精子进行处理的显微操作环境下使用。
[0098]该单精子显微载体I包括载体主体11,该载体主体11为透明状,结构为平面片状,优选为平面正方形或者平面长方形。
[0099]所述载体主体11的载体表面111为超疏水、亲油表面。所述超疏水、亲油表面上设有至少一个第一亲水表面收集区域113及相对应的第二亲水表面收集区域115。即每一个亲水表面收集区域113和第二亲水表面收集区域115 —一对应。具体的,每一所述第一亲水表面收集区域113设有第一标记112,每一所述第二亲水表面收集区域115设有第二标记116,所述第二标记116与所述第一标记112 —一对应。例如,第一亲水表面收集区域113的第一标记为001时,与其对应的第二亲水表面收集区域115的第二标记也为001。
[0100]所述第一亲水表面收集区域及第二亲水表面收集区域为任意平面形状,,如椭圆形、圆形、任意多边形等。
[0101]另外,所述载体中设有易于分离的线状连接结构114,通过所述线状连接结构114可将所述载体分离成两部分,所述第一亲水表面收集区域113全部位于一部分,而所述第二亲水表面收集区域115全部位于另一部分。
[0102]在一个具体实施例中,每一所述第一亲水表面收集区域113可作为单精子存储条,每一所述第二亲水表面收集区域115可作为单精子鞭毛(尾部)收集条。且对应的第一亲水表面收集区域113和第二亲水表面收集区域115收集的为同一个单精子。
[0103]可见,本实施例的载体通过对载体平面内特定区域表面物理特性的结构改变(超疏水、亲水、亲油特性),控制水溶液和培养油的分布,可以将单个精子限制在指定的区域,实现对单个精子的限位、区分、标记和无损该精子授精能力的专项检测。
[0104]以上结合最佳实施例对本发明进行了描述,但本发明并不局限于以上揭示的实施例,而应当涵盖各种根据本发明的本质进行的修改、等效组合。
【主权项】
1.一种精子类型的选择方法,其特征在于,包括步骤: 51、提供一载体,所述载体表面为超疏水亲油表面,所述载体表面上设有--对应的第一亲水表面收集区域及第二亲水表面收集区域; 52、将断离尾部的精子放置在所述载体的第一亲水表面收集区域内,并将所述精子的尾部放置在与所述第一亲水表面收集区域对应的第二亲水表面收集区域内; 53、检验所述第二亲水表面收集区域内的精子尾部,筛选包含目标精子表达特异蛋白的精子尾部; 54、根据包含目标精子表达特异蛋白的尾部找出所对应性状的第一亲水表面收集区域内的精子,完成精子类型的选择。2.如权利要求1所述的精子类型选择方法,其特征在于,所述载体为透明状;优选的,所述载体为片状;优选的,所述载体为平面结构。3.如权利要求1所述的精子类型选择方法,其特征在于,在所述步骤SI后,还包括步骤: 511、在培养皿内使用已经洗涤的精子混悬液制备具有操作液面界线的精子液滴,将所述载体放置在所述培养皿内且靠近所述精子液滴; 512、从所述精子液滴中取出精子,通过对其进行断尾操作。4.如权利要求3所述的精子类型选择方法,其特征在于,在所述步骤S12后,还包括步骤: 513、将规定容量的体外操作缓冲液加入到所述载体的第一亲水表面收集区域和第二亲水表面收集区域上。5.如权利要求4所述的精子类型选择方法,其特征在于,在所述步骤S13后,还包括步骤: 514、往所述培养皿内加入培养油,直至培养油完全覆盖精子液滴和所述载体。6.如权利要求5所述的精子类型选择方法,其特征在于,在所述步骤S2后,还包括步骤: 521、将适量的精子玻璃化冷冻保护剂加入到第一亲水表面收集区域。7.如权利要求1所述的精子类型选择方法,其特征在于,所述载体中设有易于分离的线状连接结构,在所述步骤S2后,还包括步骤: 522、通过所述线状连接结构将所述载体分离成两部分,使所述第一亲水表面收集区域全部位于一部分,而所述第二亲水表面收集区域全部位于另一部分。8.如权利要求7所述的精子类型的选择方法,其特征在于,在所述步骤S22后,好包括步骤: 523、将分离后的第一亲水表面收集区域投入液氮中,以完成精子冷冻。9.如权利要求1所述的精子类型选择方法,其特征在于,每一所述第一亲水表面收集区域设有第一标记,每一所述第二亲水表面收集区域设有第二标记,所述第二标记与所述第一标记 对应。10.如权利要求2所述的精子类型选择方法,其特征在于,第一亲水表面收集区域及第二亲水表面收集区域为任意平面形状。11.如权利要求1所述的精子类型选择方法,其特征在于,在所述步骤S4后,还包括步骤: 55、解冻所述载体中的第一亲水表面收集区域,复苏冷冻的精子; 56、将所选择的规定性状的精子进行单精子卵胞浆内注射,完成授精。12.—种载体,其特征在于:所述载体表面为超疏水亲油表面,所述载体表面上设有一一对应的第一亲水表面收集区域及第二亲水表面收集区域。13.如权利要求12所述的载体,其特征在于:所述载体为透明状;优选的,所述载体为片状;优选的,所述载体为平面结构。14.如权利要求12所述的载体,其特征在于:所述载体中设有易于分离的线状连接结构;通过所述线状连接结构可将所述载体分离成两部分,所述第一亲水表面收集区域全部位于一部分,而所述第二亲水表面收集区域全部位于另一部分。15.如权利要求12所述的载体,其特征在于:所述载体中每一第一亲水表面收集区域有第一标号,每一所述第二亲水表面收集区域设有第二标记,所述第二标记与所述第一标记一一对应。16.如权利要求12所述的载体,其特征在于:所述第一亲水表面收集区域及第二亲水表面收集区域为任意平面形状。17.—种基于遗传性状的精子选择方法,其特征在于,包括步骤: 51、提供一载体,所述载体表面为超疏水亲油表面,所述载体表面上设有—对应的第一亲水表面收集区域及第二亲水表面收集区域; 52、根据遗传性状与特异蛋白的对应关系,获得与目标遗传性状对应的特异蛋白的精子制动抗体或凝集抗体,其中所述目标遗传性状至少为一个; 53、获得包含所述抗体的活性基材; 54、将包含所述抗体的活性基材置于载体的第一亲水表面收集区域; 55、往所述第一亲水表面收集区域加入精子液滴,使所述精子液滴与所述活性基材充分接触,从而得到不包含所述目标遗传性状的精子; 56、将不包含所述目标遗传性状的精子转移到与所述第一亲水表面收集区域对应的第二亲水表面收集区域。18.如权利要求17所述的基于遗传性状的精子选择方法,其特征在于,在所述步骤S2后,还包括步骤: S21、在所述抗体与精子液滴中加入缓冲液,从而实现缓冲功能。19.权利要求17所述的基于遗传性状的精子选择方法,其特征在于,在所述步骤S5后,还包括步骤: 551、将不包含所述目标遗传性状的精子加入放置另一个目标遗传性状的抗体活性基材的第一亲水表面收集区域中,从而获得不包含两个目标遗传性状的精子; 552、依次操作,从而获得不包含N个目标遗传性状的精子,N多2。20.如权利要求17所述的基于遗传性状的精子选择方法,其特征在于, 所述载体为透明状; 优选的,所述载体为片状; 优选的,所述载体为平面结构; 优选的,所述载体及精子液滴为培养油所完全覆盖。21.如权利要求17所述的基于遗传性状的精子选择方法,其特征在于,所述载体中有易于在培养环境中分离的线状连接装置;通过所述线状连接结构可将所述载体分离成两部分,所述第一亲水表面收集区域全部位于一部分,而所述第二亲水表面收集区域全部位于另一部分。22.如权利要求17所述的基于遗传性状的精子选择方法,其特征在于,所述载体中每一第一亲水表面收集区域有第一标号每一所述第二亲水表面收集区域设有第二标记,所述第二标记与所述第一标记 对应; 优选的,第一亲水表面收集区域及第二亲水表面收集区域为任意平面形状。
【专利摘要】本发明公开了一种精子类型的选择方法,包括步骤:S1、提供一载体,所述载体表面为超疏水亲油表面,所述载体表面上设有一一对应的第一亲水表面收集区域及第二亲水表面收集区域;S2、将断离尾部的精子放置在所述载体的第一亲水表面收集区域内,并将所述精子的尾部放置在与所述第一亲水表面收集区域对应的第二亲水表面收集区域内;S3、检验所述第二亲水表面收集区域内的精子尾部,筛选包含目标精子表达特异蛋白的精子尾部;S4、根据包含目标精子表达特异蛋白的尾部找出所对应性状的第一亲水表面收集区域内的精子,完成精子类型的选择。本发明还公开了一种载体和基于遗传性状的精子选择方法。
【IPC分类】C12N5/076, C12M1/00
【公开号】CN105132364
【申请号】CN201510567364
【发明人】徐小杨
【申请人】徐小杨
【公开日】2015年12月9日
【申请日】2015年9月8日
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