碳酸钠处理藻体；
步骤e、藻体的碱液提取:氮气保护条件下，向水洗碳酸钠处理藻体中加入氢氧化钠和焦磷酸钠，并用去离子水稀释，使溶液中氢氧化钠和焦磷酸钠的浓度均为0.lmol/L,且溶液中固液比为1:10，搅拌溶液4-6 h，静置20-28 h后，离心得到上层清液I和藻体残渣I ; 氮气保护条件下，向上层清液I中加入6mol/L盐酸，使溶液pH =1.0，搅拌30-60 min,静置20-28h后，离心得固体标记为腐殖酸I ;
氮气保护条件下，向藻体残渣I中加入氢氧化钠和焦磷酸钠，并用去离子水稀释，使溶液中氢氧化钠和焦磷酸钠的浓度均为0.1 mol/L，且溶液中固液比为1:10，搅拌4-6 h，静置20-28 h后，离心得到上层清液2和藻体残渣2 ;
氮气保护条件下，向上层清液2中加入6mol/L盐酸，使其pH =1.0，搅拌30-60 min，静置20-28 h后，离心得固体标记标记为腐殖酸2 ;
将腐殖酸I和腐殖酸2合并，标记为粗提腐殖酸；
步骤f、藻体腐殖酸除硅:氮气保护条件下，用含有0.lmol/L氢氧化钠和0.3mol/L氯化钠的溶液将步骤e中的粗提腐殖酸溶解，使其浓度为1-2 g/L，搅拌30 -60 min，高速离心分离，得到上层清液3;
将上层清液3用6 mol/L盐酸酸化至pH=l.0，再加入浓氢氟酸，使氢氟酸浓度为0.3mol/L,持续搅拌4-6 h，静置20_28h后，高速离心分离得固体标记为无硅腐殖酸；
步骤g、藻体腐殖酸除富里酸:向步骤f中的无硅腐殖酸中加入0.lmol/L盐酸溶液，使其固液比为1:10，持续搅拌4-6h，并静置20-28 h后，离心得到上层清液4及纯化腐殖酸；步骤h、藻体腐殖酸的亚组分分级:在氮气保护条件下，用氢氧化钠将步骤g中的纯化腐殖酸溶解，加入去离子水使溶液中的腐殖酸浓度在1-2 g/L，用盐酸和氢氧化钠调节溶液pH=2后，以15倍柱体积/h的速度流过XAD-8树脂柱，流出液弃去；
以5柱体积/h的速度，依次用pH=3、pH=5和pH=7的0.lmol/L焦磷酸钠缓冲液淋洗XAD-8树脂柱，分别收集流出液并立即酸化至pH=l，搅拌4 h后，离心得到固体三份分别标记为粗提藻体腐殖酸亚组分1、粗提藻体腐殖酸亚组分2、粗提藻体腐殖酸亚组分3 ;
在氮气保护下，以5柱体积/h的速度，依次用pH=9、pH= 11和pH=13的0.lmol/L焦磷酸钠缓冲液淋洗XAD-8树脂柱，分别收集流出液并立即酸化至pH=l，搅拌4 h后，离心得到固体三份分别标记为粗提藻体腐殖酸亚组分4、粗提藻体腐殖酸亚组分5、粗提藻体腐殖酸亚组分6 ；
步骤1、藻体腐殖酸亚组分除盐及固化:在氮气保护下，用0.1 mol/L的氢氧化钠分别溶解粗提藻体腐殖酸亚组分I至粗提藻体腐殖酸亚组分6，用盐酸调节每份溶解液的pH=5-9，并使每份溶解液的固液比均为1:2，共计得到六份腐殖酸亚组分溶液；
将六份腐殖酸亚组分溶液分别置入6个7000道尔顿透析袋，并将每个透析袋置于超纯水中，组成透析体系，搅拌12 h，盐分通过透析袋进入超纯水，将每个透析袋中的腐殖酸亚组分溶液冷冻干燥得到六份腐殖酸亚组分固体，命名为藻体腐殖酸亚组分1、藻体腐殖酸亚组分2、藻体腐殖酸亚组分3、藻体腐殖酸亚组分4、藻体腐殖酸亚组分5、藻体腐殖酸亚组分
6o
[0030]所述步骤g中，所得上层清液4用溶解有机碳测定仪器测定其溶解有机碳含量，如果上层清液4中溶解有机碳T0C>5mg/L，则重复步骤g，直到测得T0C〈5 mg/L后，再进行步骤h0
[0031]实施例3:本实施例与实施例2的不同之处在于，本实施例中步骤h中，当以某一PH值的焦磷酸钠缓冲液淋洗XAD-8树脂柱时，每收集2-50 ml流出液即用特定波长紫外/可见波长进行测定，流出液的紫外/可见吸光值先增大后减小，当流出液紫外/可见吸光值小于最大吸光值的0.5%时，停止该pH值的焦磷酸钠缓冲液的淋洗。
[0032]本实施例步骤i中，每个透析袋的透析体系搅拌12h后，先用钼酸铵分光光度法和硝酸银法分别测定步骤i中去离子水中总磷的含量和氯离子含量，如果总磷含量>0.01mg/L或者有氯化银存在，则多次更换透析体系中的超纯水，每次加入去离子水，搅拌12 h后，再次测定，直到测得的总磷含量〈0.01 mg/L且检测不到氯离子。
[0033]实施例4:本实施例与实施例2的不同之处在于，本实施例中还包括步骤j:取少量步骤i所得的六份藻体腐殖酸亚组分I至藻体腐殖酸亚组分6，在80-100°C下烘干24 h后，采用热重分析法测定灰分，如果其中某份藻体腐殖酸亚组分以干重计灰分大于0.1 %，则将该藻体腐殖酸亚组分在氮气保护条件下，用0.1 mol/L氢氧化钠溶解，加入去离子水使溶液中藻体腐殖酸浓度=1 一3 g/L后，调节溶液pH=5-9，再加入浓盐酸、浓氢氟酸和去离子水，使溶液固液比为1:10且盐酸浓度为0.lmol/L、氢氟酸浓度为0.3mol/L，持续搅拌4 h，静置24 h后，离心分离得固体后重复操作步骤i，并再次用热重分析法测定其灰分，直到其灰分小于或等于0.1%。
[0034]实施例5:本实施例与实施例2的不同之处在于，本实施例步骤c中氯化钙溶液的质量百分数为1% ;步骤c中所用的盐酸的浓度为0.1 mol/L ;步骤d中碳酸钠溶液的质量百分数为0.5%。
[0035]实施例6:本实施例与实施例2的不同之处在于，本实施例步骤b中，
首先将藻体粉末置于索式提取器中，用乙醚为提取液进行索氏提取，索提过程中，每隔5h，在220nm波长的紫外可见光下测定索提液吸光度，当吸光度大于或等于0.01时，继续该索提过程，当吸光度小于0.01时，结束乙醚提取液的提取；所得固体标记为乙醚索提藻体；将乙醚索提藻体置于索式提取器中，用丙酮为提取液进行索氏提取，索提过程中，每隔5h，在220 nm波长的紫外可见光下测定索提液吸光度，当吸光度大于或等于0.01时，继续该索提过程；当吸光度小于0.01时，结束丙酮提取液的提取；所得固体标记为丙酮索提藻体；
将丙酮索提藻体置于索式提取器中，用95%乙醇为提取液进行索氏提取，索提过程中，每隔5h，在220 nm波长的紫外可见光下测定索提液吸光度，当吸光度大于或等于0.01时，继续该索提过程；当吸光度小于0.01时，结束95%乙醇提取液的提取；所得固体标记为乙醇索提藻体；
将乙醇索提藻体置于索式提取器中，用二氧杂环己烷为提取液进行索氏提取，索提过程中，每隔5h，在220 nm波长的紫外可见光下测定索提液吸光度，当吸光度大于或等于0.01时，继续该索提过程；当吸光度小于0.01时，结束二氧杂环己烷提取液的提取；所得固体标记为二氧杂环己烷索提藻体；
将二氧杂环己烷索提藻体置于索式提取器中，用去离子水为提取液进行索氏提取，索提过程中，每隔5h，在220 nm波长的紫外可见光下测定索提液吸光度，当吸光度大于或等于0.01时，继续该索提过程；当吸光度小于0.01时，结束去离子水提取液的提取；所得固体标记为去离子水索提藻体。
[0036]以上所述仅为本发明的实施例，并非因此限制本发明的专利范围，凡是利用本发明说明书内容所作的等效结构或等效流程变换，或直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的专利保护范围内。
【主权项】
1.一种藻体中腐殖酸大孔径树脂分级方法，其特征在于，所述分级提取方法包括如下步骤: 步骤a、藻体预处理: 取风干后的藻体，剔除杂物，在30-50°C下烘干，碾磨后过筛，得到藻体粉末； 步骤b、藻体索氏提取: 将藻体粉末置于索式提取器中，依次用乙醚、丙酮、95%乙醇、二氧杂环己烷作为提取液进行索提；索提过程中，当采用其中一种索提液索提时，则每隔5h，在220nm波长的紫外可见光下测定索提液的吸光度，当测得的索提液的吸光度大于或等于0.0l时，则继续该索提过程；当测得的吸光度小于0.01时，更换下一个索提液进行索提； 步骤C、藻体的氯化钙处理: 向去离子水索提藻体中加入氯化钙溶液，使固液比达到1:10，在40-70°C条件下连续搅拌10-40 min后，离心弃去上层清液，得到氯化妈处理藻体I ; 向氯化钙处理藻体I中加入氯化钙溶液，使固液比达到1:10，在40-70°C条件下连续搅拌10-40 min后，离心弃去上层清液，得到氯化钙处理藻体2 ; 向氯化钙处理藻体2中加入去离子水，使固液比达到1:10，连续搅拌10-60 min后，离心弃去上层清液，得到去离子水处理藻体； 向去离子水处理藻体中加入盐酸，使固液比达到1:10，连续搅拌10 -60 min后，离心弃去上层清液，得到盐酸处理藻体I ; 向盐酸处理藻体I中加入盐酸，使固液比达到1: 10，连续搅拌10-60 min后，离心弃去上层清液，