苯并咪唑类化合物1-7(0.1 lOg)，以乙醚（6mL)作 溶剂，通入HCl气体，室温（18~25°C )下搅拌反应至无沉淀生成，抽滤、乙醚洗涤、干燥得 到 0· 790g，产率 70%。
[0107] 化合物 1-19 :黄棕色固体；熔点：215 - 217°C !1H NMR(600MHz, DMS0-d6) δ ： 10. 34 (s, 1H) , 7. 91 (d, J = 7. 5Hz, 1H) , 7. 86 (d, J = 7. 3Hz, 1H) , 7. 59 -7. 54 (m, 2H), 7. 36 (d, J = 8. 4Hz, 2H), 7. 33 (s, 1H), 7. 18 (d, J = 8. 1Hz, 2H), 6. 95 (s ,1H), 6. 80 (s, 1H), 6. 00 (s, 1H), 5. 92 (s, 1H), 5. 68 (d, J = 15. 8Hz, 1H), 5. 51 (d, J = 16. 2Hz, 1H), 4. 67 (s, 1H), 4. 60 (d, J = 15. 7Hz, 1H), 4. 37 (d, J = 15. 0Hz, 1H), 3. 85 (d, J = 6. 5Hz, 1H), 3. 75 (s, 3H), 3. 44 - 3. 40 (m, 3H), 3. 27 - 3. 21 (m, 1H), 2. 86 (d, J = 12. 2Hz, 1H) ppm〇
[0108] 实施例20、化合物1-20的制备
[0110] 在50mL圆底烧瓶中，加入黄连素苯并咪唑类化合物1-10(0.1 lOg)，以乙醚（6mL) 作溶剂，通入HCl气体，室温（18~25°C )下搅拌反应至无沉淀生成，抽滤、乙醚洗涤、干燥 得到0.95(^，产率85%。
[0111] 化合物 1-20 :黄棕色固体；熔点：219 - 221 °C !1H NMR(600MHz, DMS0-d6) δ ： 10. 25 (s, 1H), 7. 86 (dd, J = 27. 8, 6. 5Hz, 2H), 7. 54 - 7. 48 (m, 3H), 7. 47 (s, 1H), 7. 22 (s ,1H), 7. 04 (d, J = 7. 7Hz, 1H), 6. 93 (s, 1H), 6. 81 (s, 1H), 5. 99 (s, 1H), 5. 92 (s, 1H), 5. 65 ( d, J = 16. 3Hz, 1H), 5. 49 (d, J = 16. 3Hz, 1H), 4. 68 - 4. 57 (m, 2H), 4. 37 (s, 1H), 3. 86 (d, J =6. 6Hz, 1H), 3. 73 (s, 3H), 3. 42 (d, J = 10. 7Hz, 3H), 3. 29 - 3. 24 (m, 1H), 2. 86 (d, J = 12. 3Hz, 1H) ppm〇
[0112] 实施例21、化合物1-21的制备
[0114] 在50mL圆底烧瓶中，加入黄连素苯并咪唑类化合物1-11 (0· 100g)，以乙醚（6mL) 作溶剂，通入HCl气体，室温（18~25°C )下搅拌反应至无沉淀生成，抽滤、乙醚洗涤、干燥 得到0.91(^，产率82%。
[0115] 化合物 1-21 :黄棕色固体；熔点：201 - 203 °C !1H NMR(600MHz, CDCl3) δ ： 10. 13(s, 1H), 7. 85 - 7. 75(m, 2H), 7. 53(d, J = 8. 3Hz, 1H),7.49-7. 41 (m, 3H), 7. 13 (s, 1H), 7. 00 (d, J = 7. 8Hz, 1H), 6. 86 (s, 1H), 6. 80 (s, 1H), 5. 99 (s, 1H), 5. 91 (s, 1H), 5. 60 (d, J = 16. 4Hz, 1H), 5. 46 (d, J = 16. 3Hz, 1H), 4. 69 - 4. 58 (m, 2H), 4. 35 (d, J =14. 3Hz, 1H) , 3. 86 (s, 1H) , 3. 72 (s, 3H) , 3. 45 - 3. 36 (m, 3H) , 3. 26 (d, J = 12. 7Hz, 1H), 2. 85 (d, J = 13. 1Hz, 1H) ppm〇
[0116] 实施例22、化合物1-22的制备
[0118] 在50mL圆底烧瓶中，加入黄连素苯并咪唑类化合物1-17(0.1 lOg)，以乙醚（6mL) 作溶剂，通入HCl气体，室温（18~25°C )下搅拌反应至无沉淀生成，抽滤、乙醚洗涤、干燥 得到0· 840g，产率80%。
[0119] 化合物 1-22 :黄棕色固体；熔点：203 - 205°C !1H NMR(600MHz, CDCl3) δ ： 13. 15 (s, 1H), 8. 04 (d, J = 7. 5Hz, 3H), 7. 56 (s, 1H), 7. 49 (t, J = 7. 0Hz, 1H) ,7.43-7. 37(m, 4H), 7. 33(d, J = 7. 9Hz, 2H), 7. 18 (t, J = 7. 1Hz, 2H), 6. 97 (s, 1H), 6. 74 (s, 1H), 6. 48 (s, 1H), 5. 83 (s, 1H), 5. 75 (s, 1H), 4. 69 (dd, J = 62. 6, 49. 2Hz, 3H), 4. 32 - 4. ll(m, 6H),3. 87 - 3. 67 (m, 6H), 3. 46 (s, 3H), 3. 26 (s, 1H), 2. 71 (d, J = 15. 5Hz, 1H), 1.77- 1. 65 (m, 4H), I. 56 (s, 1H) ppm〇
[0120] 其余化合物可以按照上述相同的方法制备黄连素苯并咪唑类化合物的可药用盐 形式，且溶剂可用乙醇、四氢呋喃和三氯甲烷中的任一种或多种混合溶剂中，HCl可用硝酸 或醋酸代替，也可使用水溶液形式。
[0121] 实施例23 :体外抗微生物活性实验
[0122] 采用符合1993年美国国家委员会制定的临床实验标准（National Committee for Clinical Laboratory Standards, NCCLS)的96孔微量稀释法，检测实施例1制得的黄连 素苯并咪唑类化合物或其可药用盐对MRSA、金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、枯草杆菌、变形 杆菌、大肠杆菌、伤寒沙门杆菌、铜绿假单胞菌、痢疾志贺菌、产朊假丝酵母菌、黄曲霉菌、啤 酒酵母菌、白色念珠菌、假丝酵母菌的最低抑菌浓度（MIC)，将待测化合物用少量二甲亚砜 溶解，再加水稀释制成浓度为I. 28mg/mL的溶液，再用培养液稀释至1024 μ g/mL，37°C培养 24~72小时，将培养板置振荡器上充分搅匀后，在波长490nm处测定MIC ( μ g/mL)。结果 见表1和表2。
[0123] 表1黄连素苯并咪唑类化合物或其可药用盐的抗细菌活性（MIC，μ g/mL)
[0126] 由表1可以看出，几乎所有待测化合物对所测试细菌均表现出一定的抑制活性。 与参考药物氯霉素相比，化合物1-3、1-7、1-8和1-18对所有测试细菌均表现出较好的抗菌 活性，甚至对某些测试细菌的抑制活性与氯霉素相当或强于氯霉素，尤其是化合物1-3对 除金黄色葡萄球菌和藤黄微球菌外的所有测试菌的最低抑制浓度等于或低于参考药物氯 霉素，这一结果说明黄连素苯并咪唑化合物1-3有进一步研究的价值。然而，化合物1-16 和1-17几乎对所有测试细菌均无抑制作用，这可能是由于分子量太大，不利于穿过细胞膜 而致。
[0127] 表2黄连素苯并咪唑类化合物或其可药用盐的抗真菌活性（MIC，μ g/mL)
[0130] 由表2可以看出，除化合物1-2以外，所有待测化合物对所测试真菌均表现出一定 的抑制活性，其中，化合物1-3、1-7表现出较好的抗真菌活性。而盐酸盐类化合物1-21对 假丝酵母菌的抑制活性达到2 μ g/mL，强于氟康唑（MIC = 4 μ g/mL)。此外，几乎所有化合 物对黄曲霉菌的抑制活性与参考药物氟康唑相当或优于氟康唑。
[0131] 最后说明的是，以上实施例仅用于说明本发明的技术方案，并不构成对本发明内 容的限制。尽管通过上述实施例已经对本发明做了较为详细的例举，但本领域技术人员仍 然可以根据
【发明内容】
部分和实施例部分所描述的技术内容，在形式上和细节上对其作出各 种各样的改变，而不偏离所附权利要求书所限定的本发明的精神和范围。
【主权项】
1. 通式I所示的黄连素苯并咪唑类化合物或其可药用盐： 式中：R1为氢、硝基； R2为氢、氟、氯、溴、甲氧基、硝基、三氟甲基； R3为氢、氯； R4为氢、4-氣苄基、3-氣苄基、2-氣苄基、4-氯苄基、3-氯苄基、2-氯苄基、2, 4-二氯节 基、3, 4-二氯苄基、2, 4-二氣苄基、3, 4-二氣苄基、4-硝基苄基、4-甲基苄基、4-甲氧基节 基、苯基、乙基、1_丙基、1_丁基、1 _戊基、1_己基、1_庚基、1_辛基、1_壬基、1 _癸基、1_十一 烷基、1-十二烷基、9-乙基咔唑、9-丙基咔唑、9-丁基咔唑、9-戊基咔唑、9-己基咔唑。2. 根据权利要求1所述的黄连素苯并咪唑类化合物或其可药用盐，其特征在于， R1为氢； R2为氢、氟、氯； R3为氢； R4为氛、4-氣苄基、3-氣苄基、2-氣苄基、4-氣苄基、3-氣苄基、2-氣苄基、2, 4_二氣 苄基、3, 4_二氣苄基、4_甲氧基苄基、乙基、1-丙基、1-辛基、1-十二烷基、9_己基味P坐。3. 权利要求1和2任一项所述的黄连素苯并咪唑类化合物或其可药用盐，其特征在于， 为下述化合物中的任一种：4. 根据权利要求3所述的黄连素苯并咪唑类化合物或其可药用盐，其特征在于，所述 可药用盐为盐酸盐、硝酸盐或醋酸盐。5. 权利要求1至4任一项所述的黄连素苯并咪唑类化合物或其可药用盐的制备方法， 其特征在于：通式I所示黄连素苯并咪唑类化合物的制备：以黄连素为起始原料经去甲基化及还原 反应得到9-去甲基四氢黄连素，再在三氟乙酸溶液中与六次甲基四胺反应获得四氢黄连 素醛II，中间体II在DMF-水溶液中与多种取代的邻苯二胺反应即可制得通式I所示化合 物。6. 根据权利要求5所述的黄连素苯并咪唑类化合物或其可药用盐的制备方法，其特征 在于：所述DMF-水混合溶液比例为9:1.。7. 根据权利要求5所述的黄连素苯并咪唑类化合物或其可药用盐的制备方法，其特征 在于，通式I所示黄连素苯并咪唑类化合物的可药用盐的制备：将通式I所示黄连素苯并咪 唑类化合物溶于乙醇、乙醚、四氢呋喃和三氯甲烷中的任一种或多种混合溶剂中，在搅拌条 件下加入盐酸水溶液/气体、硝酸水溶液或醋酸水溶液，搅拌反应至无沉淀生成，即制得通 式I所示黄连素苯并咪唑类化合物的盐酸盐、硝酸盐或醋酸盐。8. 权利要求1至4任一项所述的黄连素苯并咪唑类化合物或其可药用盐在制备抗细菌 和/或抗真菌药物中的应用。9. 根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述细菌为金黄色葡萄球菌、耐甲氧西林 金黄色葡萄球菌、藤黄微球菌、枯草杆菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌、痢疾志贺菌 和伤寒沙门菌中的任一种或多种；所述真菌为产朊假丝酵母菌、黄曲霉菌、啤酒酵母菌、白 色念珠菌和假丝酵母菌中的任一种或多种。
【专利摘要】本发明公开了通式I所示的黄连素苯并咪唑类化合物或其可药用盐；还公开了该类化合物的制备方法，以黄连素为起始原料经去甲基化及还原反应得到9-去甲基四氢黄连素，再在三氟乙酸溶液中与六次甲基四胺反应获得四氢黄连素醛，后者在DMF-水溶液中与多种取代的邻苯二胺反应即可制得通式I所示化合物。本发明的黄连素苯并咪唑类化合物或其可药用盐对革兰阳性菌、革兰阴性菌、真菌都有一定抑制活性，可用于制备抗细菌和/或抗真菌类药物。通用分子式中R1、R2、R3和R4如权利要求书所定义。
【IPC分类】A61P31/10, C07D455/03, A61P31/04
【公开号】CN105218537
【申请号】CN201510667383
【发明人】周成合, 玛尼·杰克库玛, 彭莘媚
【申请人】西南大学
【公开日】2016年1月6日
【申请日】2015年10月14日