选0.01-1，更优选0.05-1 ;CuBr与四苯基乙烯星形引发剂的质量比 为0.001-1.6,优选0.01-1，更优选0.05-0.08;有机溶剂与四苯基乙烯星形引发剂的质量比 为 50-500，优选50-450，更优选70-400;
[0015] 2)开环反应:在30-35°C无氧环境下向步骤1)得到的聚合产物中加入溶剂搅拌溶 解，然后加入乙醇胺或/和乙二胺在80-90°C温度下反应30-50min;其中溶剂与聚合产物的 质量比为200-500,优选150-450,更优选120-350;乙醇胺或/和乙二胺与聚合产物的质量比 为300-600，优选450-600，更优选450-500;
[0016] 3)步骤2)开环反应后的产物加水透析，最后冷冻干燥即得到具有聚集诱导发光效 应的阳离子基因载体，加水量与开环反应后的产物的比例为100_350mL/g。
[0017]步骤1)中聚合反应温度为0-60°C，优选5-55°C，更优选10_50°C;聚合反应时间为 12h-48h，优选12h-24h，更优选20h-24h。
[0018]步骤1)中所述的聚合反应体系的各组分加入顺序一为:先将四苯基乙烯星形引发 剂溶于有机溶剂中，然后加入单体，再加入配体，最后加入CuBr引发活性可控自由基聚合。
[0019]步骤1)中所述的聚合反应体系的各组分加入顺序二为:将四苯基乙烯星形引发剂 溶于有机溶剂中，然后加入单体，再加入CuBr，最后加入配体引发活性可控自由基聚合。
[0020] 所述的单体为甲基丙烯酸N，N-二甲氨基乙酯、甲基丙烯酸缩水甘油酯、N-异丙基 丙烯酰胺中的一种或者几种。
[0021] 所述的配体为2,2'_联吡啶、1，1，4,7，10，10-六甲基三乙烯四胺、五甲基二乙烯三 胺、4，4 联吡啶中的一种或者几种。
[0022] 步骤1)所述的有机溶剂选自呋喃类、砜类、亚砜类、酰胺类、醇类中的一种或者几 种。
[0023]所述呋喃类为呋喃，四氢呋喃中的一种或两种；醇类为甲醇、乙醇、正丙醇、正丁 醇、异丙醇、异丁醇、叔丁醇、异戊醇、正己醇中的一种或者几种;砜类为二甲砜、二乙砜、二 丙砜、二丁砜、二苯砜、二苄基砜、甲基苯基砜、环丁砜中的一种或者几种；亚砜类为二甲基 亚砜、二乙基亚砜、二丙基亚砜、二丁基亚砜、二戊基亚砜、二己基亚砜中的一种或者几种。 [00 24] 当使用CuBr聚合反应速率过快时，步骤1)还加入CuBr2，CuBr与CuBr2的质量比为 (3:1)-(5:1)〇
[0025]所述的四苯基乙烯星形引发剂结构式如下：
[0027]所述的四苯基乙烯星形引发剂的制备方法:将四苯基乙烯四羟基衍生物溶解在四 氢呋喃中，然后加入三乙胺，最后加入二溴异丁酰溴，反应12-18h，然后在二甲基亚砜中沉 淀出四苯基乙烯星形引发剂；其中四苯基乙烯四羟基衍生物与四氢呋喃的质量比为0.02-0.04,优选0.02-0.035,更优选0.03-0.035;四苯基乙烯四羟基衍生物与二溴异丁酰溴的质 量比为1-2，优选1-1.5，更优选1-1.2;四苯基乙烯四羟基衍生物与三乙胺的质量比为1-2， 优选1-1.8,更优选1-1.5;四苯基乙烯四羟基衍生物与二甲基亚砜的质量比为0.8-1.2,优 选0 · 8-1，更优选0· 8-0.85。
[0028]步骤2)中聚合产物中加入溶剂搅拌溶解后，先加入三乙胺、三丙胺或三丁胺，和四 苯基乙烯氨基衍生物在35-40°C温度下反应24-48小时后，再加入乙醇胺或/和乙二胺继续 反应;所述的三乙胺、三丙胺或三丁胺与聚合产物的质量比为20-50,优选15-45,更优选20-40;四苯基乙烯氨基衍生物与聚合产物的质量比为0.3-0.9，优选0.3-0.8，更优选0.35-0.8〇
[0029]步骤2)所述的溶剂选自二甲基亚砜、二乙基亚砜、二丙基亚砜、二丁基亚砜、二戊 基亚砜、二己基亚砜中的一种或几种。
[0030]所述的四苯基乙烯氨基衍生物的结构式如下：
[0032]所述的四苯基乙烯氨基衍生物的制备方法:将单羟基的四苯基乙烯衍生物与三溴 丙胺溶解在N，N-二甲基甲酰胺中，加入碳酸钾反应12-14h，反应温度70-78°C，最后在水中 沉淀得到产物;其中单羟基的四苯基乙烯衍生物与三溴丙胺的质量比为0.5-0.8,优选0.5-〇. 75，更优选0.5-0.6;单羟基的四苯基乙烯衍生物与碳酸钾的质量比为0.3-0.5，优选0.3-〇.45,更优选0.3-0.4;单羟基的四苯基乙烯衍生物与N，N-二甲基甲酰胺的质量比为0.03-0.08，优选0.04-0.08，更优选0.05-0.07，单羟基的四苯基乙烯衍生物与水的质量比为 0 · 001-0 · 003，优选 0 · 001-0 · 002，更优选 0 · 0015-0 · 002。
[0033]有益结果:通过四苯基乙烯星形引发剂引发活性聚合，然后再通过开环反应得到 一系列具有聚集诱导发光效应的阳离子基因载体，其数均分子量(Μη)为6000-14000,分子 量分布窄，分布系数(Mw/Mn)在1.2-1.5。这类基因载体在拖口62、拖13丄6、〇)57、51^!1902细 胞系中都有较好的转染效率，同时相对于PEI还具优良的细胞成像能力。本发明简单易行， 其聚合方法保证了分子量的有效可控，而且相对于一般的阳离子基因载体，本发明制得的 基因载体通过亲疏水作用形成胶束，从而增加细胞的转染效率。
【附图说明】
[0034]图1为转染效率图；实施例1-9制得的具有聚集诱导发光效应的阳离子基因载体可 增加细胞吞噬率和转染效率。
[0035]图2为细胞内毒性图；PEI为金标，实施例1-9制得的具有聚集诱导发光效应的阳离 子基因载体可增加细胞吞噬率和转染效率。
【具体实施方式】
[0036] 实施例1:
[0038]如化学方程式所示，取0.4g四苯基乙烯四羟基衍生物，溶解在20mL的四氢呋喃中， 加入420yL的三乙胺，最后加入2mL的二溴异丁酰溴，反应14h，反应后在5mL二甲基亚砜中沉 淀得到产物四苯基乙烯星形引发剂。
[0039] (1)取O.lg四苯基乙烯星形引发剂完全溶解于lOmL无水四氢呋喃（THF)中，再将 561yL的甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)和83.5yL的五甲基二乙烯三胺(PMDETA)溶于该溶液 中，以鼓泡方式通氮气3min后迅速加入57.4mg的溴化亚铜(CuBr)，立即用橡皮塞密封;体系 于27-30°C下无氧氮气保护环境下反应24h，开瓶塞静置2-3min，然后用甲醇沉淀，再用甲醇 洗两次，以除去roMETA，CuBr，以及未反应的GMA和大部分的溶剂THF。离心之后除去上层清 液，并将下层沉淀中的残留甲醇吹干，真空干燥，得到白色固体。此聚合物记为TPE-PGMA1。 聚合物(TPE-PGMA1)的数均分子量(Μη)为6073,分子量分布指数(Mw/Mn)为1.35。
[0040] (2)取50mg步骤（1)制得的TPE-PGMA1溶解于lmL的DMS0中，向其中加入2mL的乙醇 胺，以鼓泡方式通氮气5min后，体系于80°C，磁力搅拌下反应30min。之后取少量滴加入纯水 中发现产物溶解，则说明开环反应彻底完成。
[0041 ] (3)将步骤(2)的反应液加入50mL水中，并用10000的透析袋透析1天以除去EA，之 后取出透析袋中的液体冻干得到白色絮状产物，即为具有聚集诱导发光效应的阳离子基因 载体，记为TPE-PGEA1。
[0042]实施例2
[0043] (1)将四苯基乙烯星形引发剂溶解于无水四氢呋喃中，先加入甲基丙烯酸缩水甘 油酯，再加入溴化亚铜，最后加入五甲基二乙烯三胺，加入的甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA) 的体积为lmL，其余反应条件同实施例1的步骤（1)，得到的聚合物记为TPE-PGMA2。聚合物 (TPE-PGMA2)的数均分子量(Μη)为10996,分子量分布指数(Mw/Mn)为1.43。也可以先加入 57.4mg的溴化亚铜(CuBr)，再加入83.5yL的五甲基二乙烯三胺(PMDETA)，最后密封。
[0044] (2)取50mg步骤（1)得到的TPE-PGMA2溶解于lmL的DMS0中，反应条件同实施例1的 步骤(2);
[0045] (3)同实施例1的步骤(3)，得到的絮状聚合物即为具有聚集诱导发光效应的阳离 子基因载体，记为TPE-PGEA2。
[0046] 实施例3
[0047] (1)加入的甲基丙烯酸缩水甘油酯(GMA)的体积为2.42mL，加入溴化亚铜的同时加 入20mg的溴化铜，其余反应条件同实施例1的步骤（1)，得到的聚合物记为TPE-PGMA3。聚合 物(TPE-PGMA3)的数均分子量(Μη)为13830，分子量分布指数(Mw/Mn)为1 · 32。
[0048] (2)取50mg步骤（1)得到的TPE-PGMA3溶解于lmL的DMS0中，反应条件同实施例1的 步骤(2);
[0049] (3)同实施例1的步骤(3)，得到的絮状聚合物即为具有聚集诱导发光效应的阳离