一种制备富含甘二酯的油脂的方法
【技术领域】
[0001] 本发明属于食用油脂加工工艺领域，具体涉及一种富含甘二酯稻米油的加工方 法。
【背景技术】
[0002]甘油二酯也称为脂肪酸甘油二酯（DAG)，是天然植物油脂的微量成分及体内脂肪 代谢的内源中间产物，被美国GRAS认定安全。另外，甘二酯也具有多种生理功能，可用于预 防和治疗商血脂症以及与商血脂症密切相关的心脑血管疾病。
[0003] 众多文献对酶法生成甘二酯进行了报道或者公开。
[0004]CN1635068A公开了一种甘油二酯的化学法生产方法。油脂和甘油在催化剂的作用 下，真空或者惰性气体保护进行甘油解，制备含甘油二酯的油脂。
[0005]CN101778946A公开了一种甘油二酯含量高的油脂的制造方法。该方法通过酶解法 水解原料油脂而得到的脂肪酸和甘油发生酯化反应来制造甘油二酯含量高的油脂。
[0006]CN102268464A公开了一种高酸价米糠油生产甘油二酯的方法。首先对毛米糠油进 行水化脱胶，之后在脂肪酶的作用下制备并分离得到甘油二酯。
[0007]CN101974575A公开了一种富含甘油二酯的米糠油的制备方法。以油酸甘油一酯和 高酸价米糠油为原料，在脂肪酶的作用下制备得到甘油二酯高的米糠油。
[0008]CN102199634B公开了一种富含甘油二酯的功能性油脂的制备方法。采用固定化磷 脂酶LecitaseUltra催化植物油甘油解催化制备了富含甘油二酯的油脂方法。
[0009]US12159430公开了一种制备甘二酯的方法。在酶的作用下，甘三酯水解生成甘二 酯、单甘脂以及游离脂肪酸的混合物，之后进行分离，获得甘二酯。
[0010] 上述方法主要从化学法、水解甘三酯成脂肪酸之后再进行酯化等方式生成甘油二 酯，或者在水的参与下酶法水解成甘二酯、单甘脂等混合物之后再进行分离。化学法需要在 催化剂的参与下完成，对环境造成一定的污染。水解甘三酯成脂肪酸在酯化，耗时长，能耗 高。而水解甘三酯生产甘二酯的方法会形成一定量的游离脂肪酸，对后续分离造成一定的 困难或者限制了产品的应用范围。
[0011]CN101040635A公开了一种含中链甘油二酯的食用油脂组合物及其制备方法。通过 将磷脂质、中链脂肪酸甘油三酯以及甘油在脂肪水解酶和磷脂水解酶的作用下生成的甘油 二酯。该文献采用了磷脂水解酶和脂肪水解酶共同作用，主要发生磷脂基反应和酯交换反 应，且在常压下进行，从反应原理及实现途径有别于本申请所采用的酯化及真空操作。
[0012] CN101157943A公开了一种甘油二酯的制备方法，在PLA1磷脂酶的作用下反应一 定时间，之后真空干燥得到甘油二酯。PLA1催化油脂，并且在水的作用下生成甘油二酯，但 是在这一个过程中同时产生了游离脂肪酸，因此该方法在后续过程中加入了FFA的脱出工 艺。
[0013]CN101845466A公开了一种甘油二酯的制备方法，脂肪酸和甘油在PLA1和水的作 用下，生成甘油二酯，但是，这一反应往往仅适用于脂肪酸，对于稻米油未见得适用。
[0014] 综上所述，仍需要一种富含甘二酯稻米油的加工方法。
【发明内容】
[0015] 本发明将磷脂酶和脂肪酶复配进行酯化反应生成甘油二酯，磷脂酶和脂肪酶的复 配，产生了协同效应，增加了DAG的含量。
[0016] 具体而言，本发明提供一种制备富含甘二酯的油脂的方法，所述方法包括：
[0017] (1)在将甘油加到待加工的油脂之前、之中和/或之后将脂肪酶和磷脂酶加入该 待加工的油脂中；和
[0018] (2)在减压条件下进行酯化反应；
[0019] 从而制备得到富含甘二酯的油脂。
[0020] 本发明还提供一种提高油脂中的甘二酯含量的方法，所述方法包括：
[0021] (1)在将甘油加到待加工的油脂之前、之中和/或之后将脂肪酶和磷脂酶加入所 述待加工的油脂中；和
[0022] (2)在减压条件下进行酯化反应；
[0023] 从而提高该油脂中的甘二酯含量。
[0024] 本发明还提供一种在提高油脂中的甘二酯含量的同时降低该油脂的酸值的方法， 所述方法包括：
[0025](1)在将甘油加到待加工的油脂之前、之中和/或之后将脂肪酶和磷脂酶加入所 述待加工的油脂中；和
[0026](2)在减压条件下进行酯化反应；
[0027] 从而提高该油脂中的甘二酯含量，并降低该油脂的酸值。
[0028] 适用于本发明各方法的脂肪酶包括但不限于以下来源的脂肪酶南极假丝酵母 (Candidaantarctica)脂肪酶A(CALA)、南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)、疏棉状嗜热丝孢菌 (Thermomyceslanuginosus)脂肪酶、疏棉状嗜热丝孢菌脂肪酶变体、Hyphozyma属脂肪酶、 米黑根毛霉（Rhizomucormiehei)脂肪酶，产碱假单胞菌（P.alcaligenes)脂肪酶，假产 碱假单胞菌（P.pseudoalcaligenes)脂肪酶、洋葱假单胞菌（P.cepacia)脂肪酶。
[0029] 适用于本发明的商品化液体酶包括但不限于LIP0ZYMETL100L，LIP0ZYMECaLB L、CALLERAULTRAL和CALLERATRANS(NovozymesA/S，Denmark)〇
[0030] 适用于本发明的商品化固定化酶包括但不限于N0V0ZYME435、LIP0ZYMERM頂和 LIP0ZYMETLIM(NovozymesA/S，Denmark)和AmanoPS(Amano,Japan)。
[0031] 适用于本发明各方法的磷脂酶包括但不限于磷脂酶Al、磷脂酶A2、磷脂酶C、和/ 或磷脂酶酶D。
[0032] 在一【具体实施方式】中，磷脂酶与脂肪酶的用量比为1 :4(1重量份磷脂酶：4重量份 脂肪酶）到1 :2 (1重量份磷脂酶：2重量份脂肪酶）。
[0033] 在一【具体实施方式】中，相对于油脂的重量，磷脂酶液的添加量为小于等于5%，月旨 肪酶液的添加量为小于等于10%。
[0034] 在一【具体实施方式】中，减压条件为将真空度控制在400_800mbar的范围。
[0035] 在一【具体实施方式】中，酯化反应的温度为50 - 100°C。
[0036] 在一【具体实施方式】中，油脂选自：稻米油、葵花籽油、棕榈油、棕榈仁油、花生油、菜 籽油（也称为菜油）、棉籽油、红花籽油、紫苏籽油、茶籽油、棕榈果油、椰子油、油橄榄油、可 可豆油、乌桕籽油、扁桃仁油、杏仁油、油桐籽油、橡胶籽油、米糠油、玉米胚油、小麦胚油、芝 麻籽油、蓖麻籽油、亚麻籽油、月见草籽油、榛子油、胡桃油、葡萄籽油、胡麻籽油、玻璃苣籽 油、沙棘籽油、番茄籽油、南瓜籽油、澳洲坚果油、可可脂、藻类油等中的一种或两种以上的 油脂的任意混合。
[0037] 在一【具体实施方式】中，甘油的添加量按照原料油中游离脂肪酸与甘油的摩尔比 (FFA:GLY= 2:1)以及原料油游离脂肪酸与甘油的摩尔比（FFA:GLY= 3:1)的计算量进 行添加，甘油添加量在二者之间，即所述甘油的添加量与原料油中游离脂肪酸的摩尔比为 1:2-1:3〇
[0038] 本发明还提供采用本发明所述的方法制备得到的油脂。该油脂富含甘二酯，且酸 值低。
[0039] 在一【具体实施方式】中，所述油脂是稻米油。
【附图说明】
[0040] 图1显示N0V0ZYM435在不同真空度下对DAG含量的影响。
[0041] 图2显示PLA1在不同真空度下对DAG含量的影响。
[0042] 图3显示PLA1与N0V0ZYM435复配对DAG含量的影响。
[0043] 图4显示剪切与不剪切操作对DAG含量的影响。
[0044] 图5显示常压操作与800mbar真空度操作对DAG含量的影响。
[0045] 图6显示常压操作与800mbar真空度操作对AV的影响。
[0046] 图7显示甘油添加量对DAG含量的影响。
[0047] 图8显示不同磷脂酶种类PLA1和PLC对生成DAG的影响，其中，对照为仅添加脂 肪酶的实验操作。
[0048] 图9显示磷脂酶和脂肪酶的比例对DAG的影响，其中，对照为仅添加脂肪酶的实验 操作。
【具体实施方式】
[0049] 本发明涉及用脂肪酶和磷脂酶来制备富含甘二酯的油脂、提高油脂中的甘二酯含 量和/或降低富含甘二酯的油脂中酸值的方法，以及由此获得的油脂。本发明的方法通常 在减压条件下进行，优选的酯化反应温度为50 -KKTC。
[0050] 适用于本发明的油脂优选为植物油。植物油脂可以是常规手段获取的各种植物油 月旨，例如可以但不包括为稻米油、葵花籽油、棕榈油、棕榈仁油、花生油、菜籽油（也称为菜 油）、棉籽油、红花籽油、紫苏籽油、茶籽油、棕榈果油、椰子油、油橄榄油、可可豆油、乌桕籽 油、扁桃仁油、杏仁油、油桐籽油、橡胶籽油、米糠油、玉米胚油、小麦胚油、芝麻籽油、蓖麻籽 油、亚麻籽油、月见草籽油、榛子油、胡桃油、葡萄籽油、胡麻籽油、玻璃苣籽油、沙棘籽油、番 茄籽油、南瓜籽油、澳洲坚果油、可可脂、藻类油等中的一种或两种以上的油脂的任意混合。
[0051] 优选是高酸值（AV)的植物油，包括但不限于稻米油。
[0052] 适用于本发明的油脂可以是精炼植物油，也可以是毛油。
[0053]所述精炼的植物油可以是经过脱胶、脱酸、脱蜡或者脱色亦或者其任意组合的植 物油。
[0054] 适用于本发明的脂肪酶可以是各种已知用来实施油脂的酯化反应的脂肪酶，包括 但不限于以下来源的脂肪酶：来自南极假丝酵母（Candidaantarctica)的脂肪酶A(CALA) 和脂肪酶B(CALB)、来自疏棉状嗜热丝孢菌（Thermomyceslan