用于生物芯片的印刷方法及其应用
【技术领域】
[0001]本发明属于生物芯片制备和应用技术领域，涉及一种用于生物芯片的印刷方法及其应用。
【背景技术】
[0002]生物芯片技术是一种用于多指标检测的高通量分子生物学检测技术。生物芯片包括蛋白芯片和基因芯片等。芯片的基质包括玻璃、瓷片、尼龙膜和硝酸纤维素膜等。其中基于玻璃基质的芯片，一般是通过荧光标记来获得芯片检测信号;而基于膜基质的芯片，一般是通过酶促显色的方式，通过肉眼或者机器来判读芯片上不同位置的显色点，从而获得芯片检测结果。
[0003]芯片又称作微阵列，构成阵列的每一个探针都检测不同的指标。为了达到多指标检测的目的，需要对整个芯片进行区域划分，以便制备芯片时，每个区域用于固定特性的探针；以及在判读芯片结果时可以根据不同的位置读出对应的指标信息。其中对于膜基质的芯片，为了让操作者能够清楚有效地区分判读不同探针区域的显色点，目前市场上的芯片产品都是采用油墨印刷的方式，在不同探针之间印出线条，来对不同探针区域进行间隔，以方便肉眼判读。
[0004]油墨印刷存在的问题是:油墨本身含有多种复杂的物理和化学物质，对蛋白芯片所使用的蛋白及酶，对基因芯片所使用的显色酶都可能会有抑制作用；而且在印刷膜的时候，印刷设备产生的高温可能对膜材质产生影响，从而影响膜对探针的吸附固定及其随后的检测性能。
[0005]因此，目前需要研究开发一种用于生物芯片的生物印刷方法，采用该方法印刷生物芯片，不会对蛋白芯片所使用的蛋白及酶，以及对基因芯片所使用的显色酶产生抑制作用，也不会影响膜对探针的吸附固定及其随后的检测性能。
【发明内容】
[0006]本发明所要解决的技术问题是针对现有技术的不足，提供了一种用于生物芯片的印刷方法。采用该方法印刷生物芯片，不会对蛋白芯片所使用的蛋白及酶，以及对基因芯片所使用的显色酶产生抑制作用，也不会影响膜对探针的吸附固定及其随后的检测性能。
[0007]为此，本发明提供了一种用于生物芯片的印刷方法，其包括以图形的形式将待固定物固定到生物芯片的基片上，其中，所述待固定物包括待测样品和标志物;所述标志物为生物分子。
[0008]根据本发明，所述待固定物还包括对待测样品具有质控作用的生物分子;优选对待测样品具有阴性质控作用的生物分子。
[0009]根据本发明，所述图形包括数字、字母、汉字、标志性符号、标志性线条和标志性图案中的一种或几种。
[0010]在本发明的一些优选实施例中，所述标志物的图形在生物芯片的基片上形成分割区域。
[0011 ]本发明中，在同一芯片上，所述标志物包括一种或几种生物分子。
[0012]在本发明的一些优选实施例中，所述标志物为对待测样品具有阳性质控作用的生物分子。
[0013]根据本发明，所述生物分子包括核酸、蛋白质、糖类、酶及其衍生物中的一种或几种。
[0014]本发明中，优选所述蛋白质为抗体、抗原和抗体结合蛋白中的一种或几种。
[0015]在本发明的一些优选实施例中，所述生物分子为核酸和/或抗体。
[0016]根据本发明的一些实施方式，以涂抹、喷射、印刷的方式将待固定物溶液涂覆到生物芯片的基片上，干燥后即将待固定物固定到生物芯片的基片上;所述待固定物溶液包括待测样品溶液和标志物溶液。
[0017]在本发明的一些优选实施例中，采用点样仪将固定物溶液印制到生物芯片的基片上。
[0018]根据本发明的一些优选实施方式，所述待固定物溶液还包括对待测样品具有质控作用的生物分子溶液;优选对待测样品具有阴性质控作用的生物分子溶液。
[0019]本发明中，优选所述标志物溶液的浓度为0.2-10μΜ;更为优选地，所述标志物溶液的浓度为0.2-4μΜ。
[0020]本发明还提供了上述生物印刷方法在基因芯片上的应用。
[0021]本发明还提供了上述生物印刷方法在蛋白芯片上的应用。
【附图说明】
[0022]附图用来提供对本发明的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本发明的实施例共同用于解释本发明，并不构成对本发明的限制。
[0023]图1是实施例1中制备的生物印刷型HPV基因芯片上探针排布图。
[0024]图2是采用实施例1中制备的生物印刷型HPV基因芯片检测HPV16样本前对芯片表面观察结果图。
[0025]图3是采用实施例1中制备的生物印刷型HPV基因芯片检测HPV16样本后芯片表面所显示的检测结果图。
[0026]图4是对比例I中制备的常规HPV基因芯片上探针排布图。
[0027]图5是采用对比例I中制备的常规HPV基因芯片检测HPV16样本前对芯片表面观察结果图。
[0028]图6是采用对比例I中制备的常规HPV基因芯片检测HPV16样本后芯片表面所显示的检测结果图。
[0029]图7是实施例2中制备的生物印刷型蛋白芯片上探针排布图。
[0030]图8是采用实施例2中制备的生物印刷型蛋白芯片检测TOX抗体样本前对芯片表面观察结果图。
[0031]图9是采用实施例2中制备的生物印刷型蛋白芯片检测TOX抗体样本后芯片表面所显示的检测结果图。
[0032]图10是对比例2中制备的常规蛋白芯片上探针排布图。
[0033]图11是采用对比例2中制备的常规蛋白芯片检测TOX抗体样本前对芯片表面观察结果图。
[0034]图12是采用对比例2中制备的常规蛋白芯片检测TOX抗体样本后芯片表面所显示的检测结果图。
【具体实施方式】
[0035]为使本发明更加容易理解，下面将结合实施例和附图来详细说明本发明，这些实施例仅起说明性作用，并不局限于本发明的应用范围，下列实施例中未提及的具体实验方法，通常按照常规实验方法进行。
[0036]如前所述，油墨印刷存在的问题是:油墨本身含有多种复杂的物理和化学物质，对蛋白芯片所使用的蛋白及酶，以及对基因芯片所使用的显色酶都可能会有抑制作用；而且在印刷膜的时候，印刷设备产生的高温可能对膜材质产生影响，从而影响膜对探针的吸附固定及其随后的检测性能。
[0037]本发明的发明人研究发现，以生物分子代替油墨作为标志物固定到生物芯片的基片上，既可以起到标记或指示作用，又不会对蛋白芯片所使用的蛋白及酶，以及对基因芯片所使用的显色酶产生抑制作用，也不会影响膜对探针的吸附固定及其随后的检测性能。
[0038]本发明所涉及的用于生物芯片的印刷方法包括以图形的形式将待固定物固定到生物芯片的基片上，其中，所述待固定物包括待测样品和标志物。所述标志物为带有标记和/或具有指示作用的生物分子，其能够在光照作用下或显色剂的作用下或显色剂和显色酶的作用下显色。
[0039]本发明所述用语“显色酶”是指能够促进待显色生物分子与显色剂进行显色反应的酶。本发明中，所述显色酶，例如优选为碱性磷酸酶或过氧化物酶。
[0040]在本发明的一些优选实施例中，所述待