抗坏血酸提高微藻生物量的用图
【技术领域】
[0001] 本发明属于环境保护领域和可再生能源领域，涉及抗坏血酸的新用途，特别涉及 抗坏血酸提高微藻生物量的用途。
【背景技术】
[0002] 能源危机和水体污染是目前可持续发展面临的两大难题。其中，生物柴油具有可 再生、易降解、燃烧后污染物排放低等特点而被认为是理想的可替代能源，但面临原料来源 不足的困境。以微藻为原料制备生物柴油具有油脂含量高、生长周期短、不占用耕地的优 点，不过目前微藻培养的密度较低、培养成本过高。
[0003] 另一方面，随着我们经济的发展，大量富含氮磷等物质的有机废水未经处理就被 排放入公共环境中，引发严重的水环境污染。废水的脱氮除磷是目前废水处理的一大难题， 处理成本较高，并且会造成氮磷等资源的浪费。
[0004] 利用有机废水来培养微藻，既可以降低微藻培养的成本，又可以达到废水资源化 利用的目的，受到越来越多研究者的关注。但是目前市政废水、食品加工废水和养殖废水中 多含有高浓度氨氮等不利于微藻的生长。目前提高废水养殖微藻生物量最常用的方法是用 淡水对废水进行稀释，该方法需要消耗大量的淡水资源，实际应用价值较低，不利于微藻培 养产业的发展。
[0005] 抗坏血酸(L-Ascorbic acid)，又名维生素 C，是一种水溶性维生素，1907年由挪威 化学家霍尔斯特在柠檬汁中发现，1934年获得纯品，现已可人工合成。抗坏血酸具有促进骨 胶原生物合成、促进氨基酸中酪氨酸和色氨酸的代谢、预防心血管病等生物活性。目前未见 抗坏血酸与微藻相关的报道，更未见抗坏血酸提高有机废水中微藻生物量的报道。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的在于提供抗坏血酸或其药学上可接受的盐、酯、水合物、糖苷衍生物 提高微藻生物量的用途和一种微藻培养方法。
[0007] 本发明提供了抗坏血酸或其药学上可接受的盐、酯、水合物、糖苷衍生物提高微藻 生物量的用途。
[0008] 微藻生物量:指微藻在单位体积内的重量。
[0009] 其中，所述微藻为小球藻属（Chlorella)、栅藻属（Scenedesmus)、螺旋藻属 (卩11&6〇(1&(^7111111)、拟小球藻属（？&1&(3111〇^11&)、盐藻（〇1111&1丨611&)、三角褐指藻 (Phaeodactylum tricornutum)或布朗葡萄藻（Botryococcus braunii)。
[0010]本发明还提供了一种微藻培养方法，步骤如下：
[0011]取微藻，接种于氨氮含量为l〇-l〇〇〇mg/L的微藻培养液中，加入抗坏血酸或其药学 上可接受的盐、酯、水合物、糖苷衍生物，培养5-14天，即可。
[0012]微藻培养液:是指能够维持微藻生长繁殖的液体，包括各种废水例如市政废水、生 活污水、食品加工废水、养殖废水包括沼液等和人工配制的培养基。
[0013]氨氮含量为10-1 OOOmg/L的微藻培养液:是指每1L微藻培养液中的氨态氮的重量 为10-1000mg。
[0014] 其中，所述微藻为小球藻属、栅藻属、螺旋藻属、拟小球藻属、盐藻、三角褐指藻或 布朗葡萄藻。
[0015] 其中，每升微藻培养液，接种微藻〇. 1 -2g。
[0016] 接种的微藻是指经过在活化培养基中活化到对数生长期后，离心得到的微藻，离 心的条件可以是4000rpm，2-5min，微藻0· l-2g即为微藻湿重0· l-2g。
[0017] 其中，所述微藻培养液为市政废水、生活污水、食品加工废水、养殖废水。
[0018] 进一步地，所述养殖废水为沼液。
[0019] 沼液是沼气发酵原料经过厌氧发酵生成的发酵液，它富含氮磷等微藻生长所必须 物质，且氨氮等含量高，属于高浓度有机废水。发酵原料多是畜禽粪便。
[0020] 其中，所述沼液在接种微藻前进行了固液分离，收集液体部分；
[0021 ]所述固液分离的方法为静置、絮凝、过滤和/或离心。
[0022] 其中，微藻培养过程中，抗坏血酸在微藻培养液中的浓度维持在50_300mg/L。
[0023] 其中，维持抗坏血酸浓度的方法是:接种微藻后，首次加入抗坏血酸，之后每间隔 2-5天再次加入抗坏血酸；
[0024]其中，首次加入的抗坏血酸用量为每升培养液加入抗坏血酸50-150mg，以后每次 加入的抗坏血酸用量为每升培养液加入抗坏血酸150-300mg。
[0025] 目前提高废水养殖微藻生物量最常用的方法是用淡水对废水进行稀释，以降低废 水中的有机物浓度。本发明在研究中意外发现，抗坏血酸可以显著提高微藻的生物量，可使 高浓度氨氮废水中的微藻生物量提高3.1-6.1倍，取得了完全意料不到的技术效果。
[0026] 另一方面，本发明抗坏血酸可以使有机废水变废为宝，提高了有机废水的利用价 值，有利于生态环境的保护;而且本发明方法简单易行、便于操作，具有良好的应用前景。
[0027] 显然，根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用手段，在不脱离 本发明上述基本技术思想前提下，还可以做出其他多种形式的修改、替换或变更。
[0028] 下面以实施例对本
【发明内容】
作进一步说明，但本发明不局限于这些实施例。凡基 于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
【具体实施方式】
[0029] 本发明所用的试剂及仪器均为市售。
[0030] 所有微藻均购买自中国科学院淡水藻种库。
[0031] 微藻购买后进行活化，活化步骤如下:无菌条件下，将各微藻分别接种于各自培养 基中，25°C培养7d后，离心(4000rpm，2-5min)，收集菌体，称量菌体湿重，备用；
[0032]其中，小球藻和栅藻为BG11培养基，布朗葡萄藻为SE培养基。
[0033]实施例1本发明微藻培养方法
[0034]在四川简阳某养猪场沼液(经测定，氨氮含量为200-350mg/L)中，接种小球藻，每 升沼液接种o.lg小球藻，加入终浓度为ISOmg/l的抗坏血酸培养4d(4天）后，加入终浓度为 200mg/L的抗坏血酸继续培养，然后每隔2d加入终浓度为200π^/1的抗坏血酸继续培养;共 计培养10d后，收集藻体，即可。
[0035]实施例2本发明微藻培养方法
[0036]在四川简阳某养猪场沼液(经测定，氨氮含量为200-350mg/L)中，取沼液4000rpm 离心5min，取液体部分作为微藻培养液。
[0037]在微藻培养液中，接种小球藻，每升微藻培养液接种2g小球藻，加入终浓度为 100mg/L的抗坏血酸培养5d，加入终浓度为250mg//L的抗坏血酸继续培养，然后每隔2d加入 终浓度为250mg/L的抗坏血酸继续培养;共计培养10d后，收集藻体，即可。
[0038]实施例3本发明微藻培养方法
[0039]在四川简阳某养猪场沼液(经测定，氨氮含量为10_200mg/L)中，接种三角褐指藻， 每升沼液接种lg三角褐指藻，加入终浓度为150mg/L的抗坏血酸培养3d，每隔3d加入终浓度 为250mg/L的抗坏血酸继续培养;共计培养7d后，收集藻体，即可。
[0