超声微波协同法提取鹅去氧胆酸的方法
【技术领域】
[0001]本发明的实施方式涉及中药领域，更具体地，本发明的实施方式涉及一种超声微波协同法提取鹅去氧胆酸的方法。
【背景技术】
[0002]现目前，除了从熊胆汁中制备鹅去氧胆酸(CDCA)外，行业内也致力于开发新的胆汁源制备鹅去氧胆酸，并且已经成功的从鹅胆汁、鸡胆汁、鸭胆汁和猪胆汁等家禽家畜胆汁中提取或制备鹅去氧胆酸。
[0003]专利CN201010577847.8公开了一种从禽胆汁中提取鹅去氧胆酸的工艺，向禽胆汁加入烧碱后煮沸水解，水解液中加入有机溶剂和二氧化碳组成的膨胀溶剂，加压搅拌酯化并萃取出鹅去氧胆酸粗品；然后进行纯化，方法是加入钙盐析出胆酸盐，胆酸盐用水洗涤后加盐酸调节PH使鹅去氧胆酸析出，沉淀用氨水中和后真空干燥，再用有机溶剂与二氧化碳组成的膨胀溶剂加压萃取，降压析出，即得鹅去氧胆酸。
[0004]专利CN201110354130.1公开了一种酯化法制备猪胆汁中鹅去氧胆酸的方法，以甲醇、浓硫酸、氢氧化钠进行酯化，以乙酸酐进行酰化，利用石油醚萃取，通过乙醇、石油醚实现一次结晶、二次结晶，利用氢氧化钠水解酸化，得到鹅去氧胆酸粗品;然后进行纯化，方法是利用乙酸乙酯和活性炭进行结晶，干燥得到鹅去氧胆酸。
[0005]专利CN201310160479.0公开了一种从鹅胆汁中分离提纯鹅去氧胆酸的方法，具体是先用氢氧化钠将鹅胆汁皂化，然后加入氯化钙得到总胆酸钙盐，用水搅拌总胆酸钙盐，离心收集上清液，用盐酸调PH获得沉淀即为鹅去氧胆酸粗品;然后进行纯化，方法是用氢氧化钠水溶液溶解鹅去氧胆酸用大孔树脂层析，乙醇溶液洗脱，氢氧化钠溶液洗脱，洗脱液用盐酸调节PH后离心即得鹅去氧胆酸。
[0006]虽然上述个别方法能够获得纯度较高的鹅去氧胆酸精品，但制备鹅去氧胆酸粗品步骤较为简单的技术方案其纯化步骤复杂，而鹅去氧胆酸粗品纯化步骤较为简单的技术方案其鹅去氧胆酸制备步骤又比较复杂，且上述制备方法的产率低，降低了鹅去氧胆酸制备效率。
【发明内容】
[0007]本发明克服了现有技术的不足，提供一种超声微波协同法提取鹅去氧胆酸的方法，以期望简化鹅去氧胆酸的制备步骤，提高生产效率。
[0008]为解决上述的技术问题，本发明的一种实施方式采用以下技术方案:
[0009]—种超声微波协同法提取鹅去氧胆酸的方法，包括以下步骤:
[0010]首先，将胆膏进行皂化后用稀盐酸调节pH至3?4，析出胆汁酸粗品；
[0011 ]然后，将胆汁酸粗品在55?60°C真空干燥，粉碎，得到胆汁酸粉末粗品；
[0012]接着，将胆汁酸粉末粗品和乙酸乙酯按照料液比1:3.0?3.5加入超声微波协同萃取仪，在超声功率100?105W、微波功率145?150W的条件下萃取2.5?3.5min，获得萃取试样；
[0013]再将所述萃取试样离心，收集上清液，沉淀用乙酸乙酯洗涤，将洗涤液与上清液合并后在65?70°C真空浓缩，得到鹅去氧胆酸粗品；
[0014]最后，将鹅去氧胆酸粗品用氯仿结晶精制获得鹅去氧胆酸精品。
[0015]进一步的技术方案是，超声微波协同法提取鹅去氧胆酸的方法包括以下步骤:
[0016]首先，将胆膏进行皂化后用稀盐酸调节pH至3，析出胆汁酸粗品；
[0017]然后，将胆汁酸粗品在60°C真空干燥，粉碎，得到胆汁酸粉末粗品；
[0018]接着，将胆汁酸粉末粗品和乙酸乙酯按照料液比1:3加入超声微波协同萃取仪，在超声功率100W、微波功率150W的条件下萃取3min，获得萃取试样；
[0019]再将所述萃取试样离心，收集上清液，沉淀用乙酸乙酯洗涤，将洗涤液与上清液合并后在70°C真空浓缩，得到鹅去氧胆酸粗品；
[0020]最后，将鹅去氧胆酸粗品用氯仿结晶精制获得鹅去氧胆酸精品。
[0021]上述超声微波协同法提取鹅去氧胆酸的方法中，所述胆膏为鸡胆膏或者猪胆膏。
[0022]上述超声微波协同法提取鹅去氧胆酸的方法中，所述皂化是指将胆膏与氢氧化钠按照质量比100:35投入水中，水与胆膏质量比2:1，密闭升温至120°C，搅拌反应12h，然后降至室温O
[0023]上述超声微波协同法提取鹅去氧胆酸的方法中，所述胆汁酸粗品经真空干燥至干燥失重<3%。
[0024]上述超声微波协同法提取鹅去氧胆酸的方法中，所述粉碎得到的胆汁酸粉末粗品过60目筛网。
[0025]下面对本发明的技术方案进行进一步的说明。
[0026]鸡胆膏和猪胆膏是用鸡胆汁或猪胆汁浓缩而得的膏状物，其鹅去氧胆酸含量通常>20%，本发明先用氢氧化钠与胆膏进行皂化反应，使结合型胆汁酸(牛磺鹅去氧胆酸、牛磺胆酸、牛磺猪去氧胆酸等)转变为游离型胆汁酸(鹅去氧胆酸、胆酸、猪去氧胆酸等)，然后用盐酸调节PH使胆汁酸粗品析出(其中鸡胆膏中胆汁酸主要为鹅去氧胆酸、胆酸等;猪胆膏中胆汁酸主要为鹅去氧胆酸、猪去氧胆酸等)，胆汁酸粗品粉末以乙酸乙酯为溶剂，在超声波和微波的共同作用下，快速的将鹅去氧胆酸萃取出来，然后离心，上清液是鹅去氧胆酸粗品，其中含有杂质通常<15%，且鹅去氧胆酸粗品收率高，将鹅去氧胆酸粗品用氯仿结晶精制即可获得杂质含量<5%的鹅去氧胆酸精品。
[0027]与现有技术相比，本发明的有益效果之一是:本发明的鹅去氧胆酸提取方法结合了超声微波协同法，简化了提取步骤，可以获得杂质含量<5%的鹅去氧胆酸精品，且鹅去氧胆酸精品收率明显提尚，达到20%左右。
【附图说明】
[0028]图1为本发明实施例1胆汁酸粉末粗品的高效液相色谱图。
[0029]图2为本发明实施例1鹅去氧胆酸粗品的高效液相色谱图。
[0030]图3为本发明实施例1鹅去氧胆酸精品的高效液相色谱图。
【具体实施方式】
[0031]为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，以下结合实施例，对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
[0032]实施例1
[0033]将10g鹅去氧胆酸含量27.1%的鸡胆膏投入200mL水中，加入35g氢氧化钠，密闭升温至1