一种从八角中提取分离莽草酸的方法
【技术领域】
[0001] 本发明涉及生物技术领域的提取方法，具体说是一种从八角中提取分离莽草酸的 方法。
【背景技术】
[0002] 莽草酸分子式为C7H1QO5，相对分子量为174.15，学名是3，4，5-三羟基-1-环己稀-1-羧酸，为白色精细粉末，气微，味辛酸，易溶于水，难容于氯仿、苯和石油醚，熔点为185°C， 旋光度为-180°。莽草酸分子结构中有三个羟基、一个羧基、一个双键，具有手性异构体。它 可以成酯，也可以成盐。莽草酸是合成生物体内、新陈代谢化合物的中间体，也是合成许多 生物碱、芳香氨基酸与吲哚衍生物、手性药物(如抗病毒药)的原料。莽草酸通过影响花生四 烯酸代谢，抑制血小板聚集，抑制动、静脉血栓及脑血栓形成，具有抗炎、镇痛作用。莽草酸 还可作为抗病毒和抗癌药物的中间体，具有一定刺激性。
[0003] 禽流感是禽流行性感冒的简称，是一种由甲型流感病毒的一种亚型引起的传染性 疾病综合症，被国际兽疫局定为A类传染病。自2005年来禽流感在世界传播速度十分惊人， 据世界卫生组织统计的数字，H5N1高治病性禽流感在全球已造成149人感染，其中80人死 亡。
[0004] "达菲"是瑞士罗氏有限公司专为治疗人类感染禽流感研制的药物，也是目前唯一 证实的有效的禽流感资料药物，作为禽流感的治疗用药，达菲的供应量在全球非常紧缺。从 八角提取的莽草酸作为达菲的主要中间体的来源这一方法，是人类抗击禽流感中的巨大动 力。
[0005] 现有提取分离莽草酸采用的传统提取方法，以石油醚为有机溶剂提取，技术条件 原因使得有效成分破坏损失很大、含量指标差异很大等。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的是提供一种从八角中提取分离莽草酸的方法，具有工艺简单，适合 生产，时间短等优点。
[0007] 本发明通过以下技术方案实现，一种从八角中提取分离莽草酸的方法，具体包括 如下步骤：
[0008] 1)前处理:将八角经过提取后得到的浸膏，加入同等重量的纯净水，放入高速分散 乳化机处理，得到高速分散乳化物；
[0009] 2)柱层析:将步骤1)得到的高速分散乳化物，通过阴离子树脂柱，使得莽草酸被交 换吸附后，再用氢氧化钠溶液洗脱，得洗脱液；
[0010] 3)脱盐:将步骤2)得到的洗脱液过阳离子树脂柱脱盐，除去钠盐；
[0011] 4)结晶：将除盐后的洗脱液浓缩后，加入丙酮中，使莽草酸沉淀结晶，再用丙酮进 行重结晶。
[0012] 本发明步骤1)所述的八角经过提取后得到的浸膏，参照现有技术，优选将八角粉 碎后采用纯净水、或者醇提取后浓缩得到或者是八角茴香工业残渣利用石油醚进行脱脂处 理后得到;所述的高速分散乳化处理，优选转速2000-3000r/min、时间5-10min。
[0013] 步骤2)所述的阴离子树脂优选为330弱碱性环氧系阴离子树脂、D-941大孔弱碱阴 离子树脂或D318大孔弱碱阴离子树脂;所述的氢氧化钠溶液，优选1-8% (w/w)的氢氧化钠 溶液；
[0014] 步骤3)所述的阳离子树脂优选732强酸性苯乙烯系阳离子树脂、D001大孔强酸性 苯乙烯系阳离子树脂、强酸1#阳离子树脂或强酸42 #阳离子树脂。
[0015] 步骤2)或者步骤3)所述的在阴离子树脂柱吸附、洗脱以及过阳离子树脂柱时，流 速优选为每小时树脂体积的1/2。
[0016] 本发明得到的莽草酸，含量在99.6% (HPLC)以上。
[0017]与现有技术相比，本发明的优点：
[0018] 1、现有技术提取时，一般是对植物原料进行破碎或粉碎后提取得到浸膏，而本发 明是在在柱层析前前，通过高速分散乳化处理含有莽草酸的浸膏，高速分散乳化机的转子 在高速旋转时，产生很大的离心力使被处理的物料从旋转的细长切口（狭缝）中喷出，并在 定子的共同作用下，使被处理的物料受到两方面的作用力，迫使它通过狭缝的正作用力和 阻止它通过的阻力。同时，被处理的物料从狭缝中喷出时，还受到狭缝的剪切作用，以及由 转定子相对运动而产生的旋转剪切力在多种作用力的作用下使物料得到均质、乳化。处理 过的果肉具有颗粒分布范围窄，均匀度好，无死角，物料100%通过分散乳化的特点。经过高 速分散乳化处理的浸膏，利于后续工序的处理。
[0019] 2、现有技术得到的莽草酸含量一般不超过99%，而本发明得到的莽草酸含量在 99.6%以上。
【具体实施方式】
[0020] 下面以实施例对本发明作进一步说明，但本发明并不局限于这些实施例。
[0021] 实施例1:
[0022] -种从八角中提取分离莽草酸的方法，具体包括如下步骤：
[0023] 1)前处理:将八角粉碎后采用纯净水提取后浓缩得到浸膏，加入同等重量的纯净 水，放入高速分散乳化机处理，转速2500r/min、时间lOmin，得到高速分散乳化物；
[0024] 2)柱层析：将步骤1)得到的高速分散乳化物，通过330弱碱性环氧系阴离子树脂 柱，使得莽草酸被交换吸附后，再用5 %氢氧化钠溶液洗脱，得洗脱液；
[0025] 3)脱盐:将步骤2)得到的洗脱液过732强酸性苯乙烯系阳离子树脂柱脱盐，除去钠 盐；
[0026] 4)结晶：将除盐后的洗脱液浓缩后，加入丙酮中，使莽草酸沉淀结晶，再用丙酮进 行重结晶。
[0027] 实施例2:
[0028] -种从八角中提取分离莽草酸的方法，具体包括如下步骤：
[0029] 1)前处理:将八角粉碎后采用醇提取后浓缩得到浸膏，加入同等重量的纯净水，放 入高速分散乳化机处理，转速2000r/min、时间8min，得到高速分散乳化物；
[0030] 2)柱层析:将步骤1)得到的高速分散乳化物，通过D-941大孔弱碱阴离子树脂柱， 使得莽草酸被交换吸附后，再用8 %氢氧化钠溶液洗脱，得洗脱液；
[0031] 3)脱盐:将步骤2)得到的洗脱液过D001大孔强酸性苯乙烯系阳离子树脂柱脱盐， 除去钠盐；
[0032] 4)结晶：将除盐后的洗脱液浓缩后，加入丙酮中，使莽草酸沉淀结晶，再用丙酮进 行重结晶。
[0033] 实施例3:
[0034] -种从八角中提取分离莽草酸的方法，具体包括如下步骤：
[0035] 1)前处理:将八角茴香工业残渣利用石油醚进行脱脂处理后得到的浸膏，加入同 等重量的纯净水，放入高速分散乳化机处理，转速3000r/min、时间5min，得到高速分散乳化 物；
[0036] 2)柱层析:将步骤1)得到的高速分散乳化物，通过D318大孔弱碱阴离子树脂柱，使 得莽草酸被交换吸附后，再用1 %氢氧化钠溶液洗脱，得洗脱液；
[0037] 3)脱盐:将步骤2)得到的洗脱液过强酸1#阳离子树脂柱脱盐，除去钠盐；
[0038] 4)结晶：将除盐后的洗脱液浓缩后，加入丙酮中，使莽草酸沉淀结晶，再用丙酮进 行重结晶。
[0039] 对比例1:
[0040] 1)前处理:将八角粉碎后加入8倍量纯净水提取后得到提取液；
[0041] 2)柱层析:将步骤1)得到的提取物浓缩后，通过330弱碱性环氧系阴离子树脂柱， 使得莽草酸被交换吸附后，再用5 %氢氧化钠溶液洗脱，得洗脱液；
[0042] 3)脱盐:将步骤2)得到的洗脱液过732强酸性苯乙烯系阳离子树脂柱脱盐，除去钠 盐；
[0043] 4)结晶：将除盐后的洗脱液浓缩后，加入丙酮中，使莽草酸沉淀结晶，再用丙酮进 行重结晶。
[0044] 对比例2:
[0045] 1)前处理:将八角粉碎后加入同等重量的纯净水，放入高速分散乳化机处理，转速 2500r/min、时间8min，得到高速分散乳化物，再加入5倍量纯净水提取后得到提取液；
[0046] 2)柱层析:将步骤1)得到的提取物浓缩后，通过330弱碱性环氧系阴离子树脂柱， 使得莽草酸被交换吸附后，再用5 %氢氧化钠溶液洗脱，得洗脱液；
[0047] 3)脱盐:将步骤2)得到的洗脱液过732强酸性苯乙烯系阳离子树脂柱脱盐，除去钠 盐；
[0048] 4)结晶：将除盐后的洗脱液浓缩后，加入丙酮中，使莽草酸沉淀结晶，再用丙酮进 行重结晶。
[0049] 结果：
【主权项】
1. 一种从八角中提取分离莽草酸的方法，其特征在于，具体包括如下步骤： 1) 前处理:将八角经过提取后得到的浸膏，加入同等重量的纯净水，放入高速分散乳化 机处理，得到高速分散乳化物； 2) 柱层析:将步骤1)得到的高速分散乳化物，通过阴离子树脂柱，使得莽草酸被交换吸 附后，再用氢氧化钠溶液洗脱，得洗脱液； 3) 脱盐:将步骤2)得到的洗脱液过阳离子树脂柱脱盐，除去钠盐； 4) 结晶：将除盐后的洗脱液浓缩后，加入丙酮中，使莽草酸沉淀结晶，再用丙酮进行重 结晶。2. 根据权利要求1所述的一种从八角中提取分离莽草酸的方法，其特征在于:步骤1)所 述的高速分散乳化处理，转速2000_3000r/min、时间5-10min。3. 根据权利要求1所述的一种从八角中提取分离莽草酸的方法，其特征在于:步骤2)所 述的阴离子树脂为330弱碱性环氧系阴离子树脂、D-941大孔弱碱阴离子树脂或D318大孔弱 碱阴离子树脂。4. 根据权利要求1所述的一种从八角中提取分离莽草酸的方法，其特征在于:步骤3)所 述的阳离子树脂为732强酸性苯乙烯系阳离子树脂、D001大孔强酸性苯乙烯系阳离子树脂、 强酸1 #阳离子树脂或强酸42#阳离子树脂。5. 根据权利要求1所述的一种从八角中提取分离莽草酸的方法，其特征在于:步骤2)或 者步骤3)所述的在阴离子树脂柱吸附、洗脱以及过阳离子树脂柱时，流速为每小时树脂体 积的1/2。
【专利摘要】本发明公开了一种从八角中提取分离莽草酸的方法，具体包括如下步骤：1)前处理：将八角经过提取后得到的浸膏，加入同等重量的纯净水，放入高速分散乳化机处理，得到高速分散乳化物；2)柱层析：将步骤1)得到的高速分散乳化物，通过阴离子树脂柱，使得莽草酸被交换吸附后，再用氢氧化钠溶液洗脱，得洗脱液；3)脱盐：将步骤2)得到的洗脱液过阳离子树脂柱脱盐，除去钠盐；4)结晶：将除盐后的洗脱液浓缩后，加入丙酮中，使莽草酸沉淀结晶，再用丙酮进行重结晶。
【IPC分类】C07C51/42, C07C62/32
【公开号】CN105601498
【申请号】CN201610128508
【发明人】杨少凡, 陈思羽, 马创伟, 雷长林, 胡林刚, 赖积南
【申请人】广西万山香料有限责任公司
【公开日】2016年5月25日
【申请日】2016年3月8日