一种从柳珊瑚中提取高纯度伪蕨素的方法
【技术领域】
[0001]本发明属于天然产物提取技术领域，涉及一种从柳珊瑚中提取高纯度伪蕨素的方 法。
【背景技术】
[0002] 柳珊瑚为树枝状群体，内部有石灰质或角质的中轴，外部散在有骨片。目前柳珊瑚 的种类约为1200种，含有许多结构新颖、生物活性多种多样的次生代谢产物，具有重要的药 用价值，研究柳珊瑚的化学成分对于寻找新的天然活性成分，丰富海洋药物学和天然产物 化学具有重要的理论价值。
[0003] 伪蕨素(Pseudopterosins)是一类含有三环二砲苷结构的物质，存在26种衍生物， 每一个衍生物都有二萜三环的化学结构，而不同在于糖侧链或者糖苷配基的立体化学结构 差异。伪蕨素被证明是一种稀有的强劲抗炎及止痛物质，应用在化妆品中时，具有其他植物 无可比拟的舒缓修护力，能减少安抚各种刺激现象的产生，并增加皮肤的水分和养分。目前 为止，伪蕨素仅仅能够在少量的在巴哈马群岛的扇柳珊瑚中提取，因此对于天然活性成分 伪蕨素精制提取的技术研究是非常必要的。
[0004] 目前，国内外对于从柳珊瑚中提取伪蕨素的研究还非常少，只有少量文献报道通 过合成法制取伪蕨素。合成法报道，在四氢呋喃-甲醇溶剂中，通过NaH在23°C去质子化反 应，与2，3，4_三乙酰基-α-D-溴代葡萄糖反应，得到9-三乙酰基-β-吡喃木糖，脱去乙酰基和 对甲苯磺酰基，经柱层层析法制取伪蕨素。在论文Corey E. J.，Carpino Ρ. Enantiospecific total synthesis of Pseudopterosins A and E [J]. Journal of the American Chemical Society, 111: 5472 - 5474所记载的方法中，合成步骤多，产率 损失较大;且在合成过程中应用了大量毒性大的有机溶剂，如四氢呋喃、二氯甲烷、氯仿、氯 乙腈等溶剂，溶剂的挥发及回收对环境的破坏大。另外，美国的Lipo Tech公司从海鞭草中 提取伪厥素的提取率为0.5% - 1%，提取率太低，工业化生广成本尚。
[0005] 溶剂提取法是将经过粉碎的天然植物浸泡于溶剂中，使植物中所含的有效成分按 一定的规律，逐渐溶解于溶剂中，从而被提取出来，该法广泛应用于天然产物成分的提取。 该法的关键在于，溶剂的选择及配比，选择合适的溶剂可以获得低成本，高产率;合适的配 比会提高提取效率。且具有工艺操作简单，提取条件温和、生产周期短、能耗小、效率高、绿 色环保等诸多优点。伪蕨素的衍生物有多种，而不同的衍生物的溶解度不同，需要通过配置 不同的溶剂可实现对多种伪蕨素衍生物的同时萃取。
【发明内容】
[0006] 本发明的目的在于提供一种从柳珊瑚中提取高纯度伪蕨素的方法，该法具有操作 简单，成本低，可工业化大规模生产的优点。
[0007] 为解决上述技术问题，本发明采用以下技术方案：一种从柳珊瑚中提取高纯度伪 蕨素的方法，其特征在于:包括以下步骤： A、 称取定量的柳珊瑚样品，清洗、烘干、切碎、过筛，制得60~80目的柳珊瑚粗粉，其中烘 干温度控制在50~60 °C; B、 按体积比1:07~0.95:0.72~0.88量取异十二烷、甲基聚三甲基硅氧烷、C13 - (：15烷 烃，混合后作为提取剂，将步骤A得到的柳珊瑚粗粉浸泡于所述提取剂进行提取，提取温度 为40~50°C，提取时间为0.5~1.5 h，然后进行离心分离，离心转速3500 r/min，分离时 间25 min，取上清液浓缩，即得到柳珊瑚提取物溶液； C、 将步骤B制备的柳珊瑚提取物溶液，采用Ο.?μπι陶瓷微滤膜，并经过3000r/min离心机 离心8~10 min进行微滤，得滤液； D、 将C步骤制备的滤液通过孔径为lOOODa的醋酸纤维超滤膜进行超滤，控制温度在20 ~30°C的条件下，压力为0.2~0.7 MPa，以1.0~2.0 g/L进料浓度对所述滤液进行超滤 分离，得到超滤提取液； E、 将步骤D所得到的超滤提取液，进行减压浓缩，在25~30°C下真空干燥处理，得到含 伪蕨素的固体产物。
[0008] 应用液相色谱-质谱联用仪对固体粉末中伪蕨素的含量进行测定，其伪蕨素纯度 大于98.0%，提取产率为3.05%~4.20%。
[0009] 本发明以柳珊瑚为主要原料，使用异十二烷、甲基聚三甲基硅氧烷、c13 - c15烷烃 混合溶剂提取伪蕨素产率高，成本低。
[0010] 对于步骤B中伪蕨素中的二萜苷衍生物，根据其本身溶解于不同溶剂中的状态，实 验结果如下表1所示： 表1伪蕨素中二萜苷衍生物的溶解状态
根据表1中所示结论，二萜苷A只能被异十二烷溶解;二萜苷B只能被甲基聚三甲基硅氧 烷溶解;二萜苷C只能被C13-C15烷烃溶解。针对这一特点，可单独溶剂提取伪蕨素中二萜苷 衍生物A、B、C，对二萜苷衍生物的提取如下步骤所示： 二萜苷A的单独溶剂提取:向步骤A得到的柳珊瑚粗粉中加入单位体积的异十二烷进行 提取;提取步骤为提取温度为40~50°C，提取时间为0.5~1.5 h。
[0011] 二萜苷B的单独溶剂提取：向步骤A得到的柳珊瑚粗粉中加入单位体积的甲基聚三 甲基硅氧烷进行提取;提取步骤为提取温度为40~50°C，提取时间为0.5~1.5 h。
[0012] 二萜苷C的单独溶剂提取：向步骤A得到的柳珊瑚粗粉中加入单位体积的C13 -C15烷烃进行提取;提取步骤为提取温度为40~50°C，提取时间为0.5~1.5 h。
[0013] 记录单独溶剂提取量:记录利用单位溶剂的异十二烷、甲基聚三甲基硅氧烷、C13 -C15烷烃分别对于二萜苷A、B、C的提取量，并记录数据。以异十二烷、甲基聚三甲基硅氧 烷、Cl3 - C15烷烃为溶剂分别提取二萜苷A、B、C的提取率数值如下表2所示。
[0014] 表2以异十二烷、甲基聚三甲基硅氧烷、C13 - C15烷烃为溶剂提取二萜苷的提取 率数值
配制混合提取浴刑：根据如上步骤得到的二萜苷A、B、C分别被早位小问浴刑提取时的 提取量，对应于特定的柳珊瑚中的伪蕨素的化学成分二萜苷A、B、C的量的要求，设计不同的 最优溶剂组合来提取按量要求的伪蕨素提取物并合并，得到最优提取率，其中最优溶剂组 合指的是获得最优伪蕨素提取率时所使用的溶剂量的组合。通过实验，设计最优溶剂组合 以获得同时提取二萜苷A、B、C的最优提取率，结果如表3所示： 表3最优溶剂组合提取二萜苷的提取率数值
根据表3所示，结果可知，只有异十二烷：甲基聚三甲基硅氧烷：C13 - C15烷烃的量控 制在1: 0.71: 0.72~1: 0.94: 0.87时，可获得高达3.05%~4.20%的伪蕨素提取率。
[0015] 与现有技术相比，本发明具有以下优异的技术效果： 本发明克服了只用单一溶剂提取，一次只能提取一个伪蕨素衍生物所造成的提取效率 低，纯度低，产率低的缺点，首创通过几种溶剂按一定配比混合，在较为经济的前提下，提取 获得相对高产率、高纯度的伪蕨素的方法。经本发明提取的伪蕨素可以直接应用于化妆品 的配方开发中，发挥抗过敏，保湿的功效。本项目所用工艺先进、提取条件温和、生产周期 短、成本低、能耗小、效率高、绿色环保，是从柳珊瑚中提取伪蕨素的有效方法，具有良好的 应用前景。
【具体实施方式】
[0016] 实施例1: 一种从柳珊瑚中提取高纯度伪蕨素的方法，采用如下步骤： A、 首先称取定量的柳珊瑚样品，清洗、50°C恒温烘干、切碎、过筛，制得60目的柳珊瑚粗 粉； B、 配制异十二烷、甲基聚三甲基硅氧烷、C13 - C15烷烃的料液比为1 : 0.70 : 0.72 的提取剂，将步骤A制得的柳珊瑚粗粉浸泡于该提取剂中，提取温度为45°C，提取时间为1 h，将经上述步骤得到的提取液，以3500 r/min的速度离心25 min，