一种海南霉素钠成品的制备方法
【专利摘要】本发明涉及一种海南霉素钠成品的制备方法，包括：以海南霉素钠发酵液为原料，经过固液分离和干燥得干菌丝体、干菌丝体加入溶剂浸提调pH值后固液分离，浸提液在30?70℃条件下浓缩，有机溶剂回收利用，浓缩液放入结晶罐，搅拌降温结晶后抽滤，将得到的滤饼加入溶剂溶解，并加入占溶解液总体积20?50％水，搅拌条件下降温重结晶，抽滤，将得到晶体投入双锥干燥器中，20?70℃真空度?0.09MPa下干燥3?8小时，得到海南霉素钠成品。本发明具有生产工艺简单、操作方便、生产效率高、产品纯度高、经济、环保、溶剂易回收等优点，还可以根据需要将提取的海南霉素钠制备成海南霉素钠原料药或不同规格的海南霉素钠预混剂。
【专利说明】
一种海南霉素钠成品的制备方法
技术领域
[0001]本发明涉及一种海南霉素钠成品的制备方法，属于化学制药领域。
【背景技术】
[0002]海南霉素钠是一种新型消化促进剂或代谢调节剂，主要对革兰氏阳性菌有抑制作用，对革兰氏阴性菌效果较差。他主要用来预防和治疗家禽球虫病和作为牛羊等家禽的饲料添加剂，促进动物生长、改善肉的品质。海南霉素钠属于环保型饲料添加剂。
[0003]1960年，中国人在福建省石马地区的土壤中发现分离得到的一株类霉菌属C-1329产生的一种黄色结晶化合物。在1977年对该菌的继续研究时得到一种白色结晶化合物，经过物理常数、化学性质、结构性质、结构测定、药理和毒理分析研究。证明系一类新的天然活性物质，命名为海南霉素(Hainanmeisu)。
[0004]扈洪波(1994)采用染色体畸变试验和姐妹染色单体变换试验两种测试方法，进行了海南霉素钠的致突变性研究，其所检测的遗传学终点包括染色体畸变和原始性DNA损伤，加之做了Ames试验，在两种测试中，海南霉素钠未显示致突变性。
[0005]2004年，张廷荣对肉仔鸡饲料中添加海南霉素钠的毒性反应及增重效应进行了研究。结果表明在肉仔鸡饲料中添加5-20mg/kg海南霉素钠，没有任何不良反应，可促进肉鸡生长，对肉鸡仔的毒性作用小，在肉仔鸡全价饲料中添加5mg/kg、10mg/kg有促进增重的作用，比对照组增重分别提高10.17%和7.05%。
[0006]1998年，任明强对海南霉素的作用机理做了研究，证明海南霉素钠理论上可以促进牛羊体重的增长。
[0007]2004年，陈杰等系统研究了海南霉素调控反刍动物消化代谢的情况，结果表明，海南霉素能调节瘤胃功能，提高丙酸水平，抑制蛋白质降解，明显提高营养物质的吸收和代谢，促进生长。
【发明内容】
[0008]本发明所要解决的技术问题是提供一种海南霉素钠成品的制备方法，本发明具有生产工艺简单、操作方便、生产效率高、产品纯度高、经济且环保等优点，还可以根据需要将提取的海南霉素钠制备成海南霉素钠原料药或不同规格的海南霉素钠预混剂。
[0009]本发明解决上述技术问题的技术方案如下:一种海南霉素钠成品的制备方法，包括如下步骤:
[0010]I)以海南霉素钠发酵液为原料，经固液分离和干燥得到干菌丝体，加入溶剂浸提，温度控制在20-50°C，以转速50-300转/分钟匀速搅拌2-4小时；
[0011 ] 2)调节步骤I)得到的浸提液的pH至8-9，并分离固体菌渣，浸提液在30-70°C的条件下使用浓缩装置浓缩，得浓缩液；
[0012] 3)将步骤2)得到的浓缩液压入结晶罐中，以转速100-400转/分钟搅拌2-10小时降温至20-40 °C后，抽滤；
[0013]4)将抽滤后得到的滤饼置于双锥干燥机中，20-70 °C真空度-0.09MPa下干燥3-8小时，得海南霉素钠成品。
[0014]在上述制备方法的基础上，本发明还可以有如下进一步具体化或优化:
[0015]具体的，步骤I)中，所述溶剂的用量为干菌丝体质量的3-7倍。
[0016]优选的，步骤2)中，所述浓缩液的体积为浸提液体积的0.1-0.2倍。
[0017]优选的，步骤3)和4)之间还包括一个重结晶过程:向步骤3)得到的滤饼加入溶剂并加热溶解，将溶解液压入重结晶罐，加入占溶解液总体积20-50 %的水，以转速100-400转/分钟搅拌2-10小时降温至25-45°C后，抽滤。
[0018]具体的，重结晶时所述溶剂的用量为滤饼质量的1-2倍。
[0019]优选的，步骤2)中的固体菌渣可按照步骤I)的条件加入溶剂浸提并经历步骤2)、
3)、4)制得海南霉素钠成品。
[0020]具体的，经三次浸提后，干燥的固体菌渣内海南霉素钠的含量〈0.2%。
[0021]具体的，所述溶剂为甲醇或乙醇的水溶液，其中甲醇或乙醇与水的体积比为5-9:1o
[0022]优选的，所述溶剂中甲醇或乙醇与水的体积比为9:1。
[0023]与现有技术相比，本发明提供的海南霉素钠成品的制备方法以海南霉素钠发酵液为原料制备出干菌丝体，用溶剂将海南霉素钠干菌丝体中的海南霉素钠提取出来，然后将溶剂除去，进一步处理后得到海南霉素钠成品，具有生产工艺简单、操作方便、生产效率高、产品纯度高、经济且环保等优点，而且溶剂可以重复利用。根据需要可将提取的海南霉素钠成品进一步纯化，制备成海南霉素钠原料药或不同规格的海南霉素钠预混剂。
【具体实施方式】
[0024]以下对本发明的原理和特征进行描述，所举实例只用于解释本发明，并非用于限定本发明的范围。
[0025]本发明中所用海南霉素钠发酵液来自山东胜利生物工程有限公司生产的产品。其制备方法包括以下步骤:首先将海南霉素钠产生菌接入种子罐，然后经过逐级扩大培养后，按15%的接种量接入发酵罐，然后按照发酵液与空气的体积比1:0.5-1:1.5通气，搅拌的转速为150转/分钟，控制温度为26-30 °C，进行有氧发酵;发酵过程中控制pH = 6.7-7.2，根据菌体形态、糖的含量等补料，发酵周期为220-240小时，得海南霉素钠发酵液。
[0026]实施例1
[0027]将上述海南霉素钠发酵液固液分离和干燥得干菌丝体，称取干菌丝体SOOg，加入400mL水和3600mL甲醇，用速度为50转/分钟的机械搅拌进行匀速搅拌4小时，整个体系的温度控制在20°C;将体系固液分离后，固体菌渣备用，加碱将浸提液调至pH=9，浸提液置于旋转蒸发仪中，在65 °C水浴中将甲醇蒸去3200mL，并将有机溶剂回收，得浓缩液450ml。将浓缩液加入结晶罐中，40°C下保温搅拌2小时，抽滤。抽滤后，滤饼转移至真空干燥箱中，60-70°C真空度-0.09MPa下干燥1-2小时，粉碎后得到海南霉素钠成品119.4g，其中海南霉素钠的含量为90%。本发明制备的海南霉素钠成品可进一步制成各种规格的预混剂或进一步纯化制成含量较高的海南霉素钠原料药。
[0028]实施例2
[0029]将上述海南霉素钠发酵液固液分离和干燥得干菌丝体，称取干菌丝体SOOg，加入500mL水和4500mL甲醇，用速度为150转/分钟的机械搅拌进行匀速搅拌3小时，整个体系的温度控制在50°C;将体系固液分离后，固体菌渣备用，加碱将浸提液调至pH = 9，浸提液置于旋转蒸发仪中，在50 °C水浴中将甲醇蒸去4000mL，并将有机溶剂回收，得浓缩液530mL。将浓缩液加入结晶罐中，30°C下保温搅拌6小时，抽滤。抽滤后，滤饼转移至真空干燥箱中，40-50°C真空度-0.09MPa下干燥4-5小时，粉碎后得到海南霉素钠成品119.9g，其中海南霉素钠的含量为93%。本发明制备的海南霉素钠成品可进一步加工制成各种规格的预混剂或进一步纯化制成含量较高的海南霉素钠原料药。
[0030]实施例3
[0031 ]将上述海南霉素钠发酵液固液分离和干燥得干菌丝体，称取干菌丝体SOOg，加入500mL水和4500mL乙醇，用速度为300转/分钟的机械搅拌进行匀速搅拌2小时，整个体系的温度控制在35°C;将体系固液分离后，固体菌渣备用，加碱将浸提液调至pH = 8，浸提液置于旋转蒸发仪中，在70 °C水浴中将乙醇蒸去4000mL，并将有机溶剂回收，得浓缩液550mL。将浓缩液加入结晶罐中，20°C下保温搅拌10小时，抽滤。抽滤后，滤饼转移至真空干燥箱中，25-35 °C真空度-0.09MPa下干燥7_8小时，粉碎后得到海南霉素钠成品120.4g，其中海南霉素钠的含量为91.5%。本发明制备的海南霉素钠成品可进一步制成各种规格的预混剂或进一步纯化制成含量较高的海南霉素钠原料药。
[0032]实施例4
[0033]将上述海南霉素钠发酵液固液分离和干燥得干菌丝体，称取干菌丝体SOOg，加入500mL水和2500mL乙醇，用速度为300转/分钟的机械搅拌进行匀速搅拌2小时，整个体系的温度控制在35°C;将体系固液分离后，固体菌渣备用，加碱将浸提液调至PH = 9，浸提液置于旋转蒸发仪中，在450C水浴中将乙醇蒸去210mL，并将有机溶剂回收，得浓缩液425ml。将浓缩液加入结晶罐中，30°C下保温搅拌7小时，抽滤。抽滤后，滤饼转移至真空干燥箱中，20-30°C真空度-0.09MPa下干燥7-8小时，粉碎后得到海南霉素钠成品107.4g，其中海南霉素钠的含量为95.2%。本发明制备的海南霉素钠成品可进一步制成各种规格的预混剂或进一步纯化制成含量较高的海南霉素钠原料药。
[0034]实施例5
[0035]将上述海南霉素钠发酵液固液分离和干燥得干菌丝体，称取干菌丝体SOOg，加入500mL水和2500mL乙醇，用速度为300转/分钟的机械搅拌进行匀速搅拌2小时，整个体系的温度控制在35°C;将体系固液分离后，固体菌渣备用，加碱将浸提液调至PH = 9，浸提液置于旋转蒸发仪中，在450C水浴中将乙醇蒸去210mL，并将有机溶剂回收，得浓缩液425ml。将浓缩液加入结晶罐中，30°C下保温搅拌7小时，抽滤。将滤饼加入其质量1-2倍的溶剂并加热溶解，将溶解液压入重结晶罐，加入占溶解液总体积20-50 %的水，以转速100-400转/分钟搅拌2-10小时降温至25-45°C后，抽滤。抽滤后，滤饼转移至真空干燥箱中，40-50°C真空度-
0.09MPa下干燥5-6小时，粉碎后得到海南霉素钠成品105.2g，其中海南霉素钠的含量为97.2%。本发明制备的海南霉素钠成品还可进一步纯化制成各种规格的预混剂或进一步纯化制成含量较高的海南霉素钠原料药。
[0036]实施例6
[0037]上述5个实施例中，固体菌渣经质量检测后仍然含有残留的海南霉素钠，其中，实施例I含1.6 %，实施例2含0.8 %，实施例3含0.8%,实施例4含0.9%,实施例5含0.8 %，收集上述四个实验的固体菌渣混匀后取800g，加入400mL水和3600mL甲醇，用速度为100转/分钟的机械搅拌进行匀速搅拌，搅拌时间3小时，整个体系的温度控制在45°C;将体系固液分离后，固体菌渣备用(干燥后检测残留的海南霉素钠含量降低至0.3%，可再次浸提，则含量可进一步下降)，浸提液置于旋转蒸发仪中，在60°C水浴中将甲醇蒸去3150mL，并将有机溶剂回收，得浓缩液460mL。将浓缩液加入结晶罐中，40°C下保温搅拌5小时，抽滤。抽滤后，滤饼转移至真空干燥箱中，60-70°C真空度_0.09MPa下干燥1-2小时，粉碎后得到海南霉素钠成品7.2g，其中海南霉素钠的含量为92.7%。
[0038]以上所述仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。
【主权项】
1.一种海南霉素钠成品的制备方法，其特征在于，包括: 1)以海南霉素钠发酵液为原料，经固液分离和干燥得到干菌丝体，加入溶剂浸提，温度控制在20-50°C，以转速50-300转/分钟匀速搅拌2-4小时； 2)调节步骤I)得到的浸提液的pH至8-9，并分离固体菌渣，再在30-70°C的条件下使用浓缩装置浓缩，得浓缩液； 3)将步骤2)得到的浓缩液压入结晶罐中，以转速100-400转/分钟搅拌2-10小时降温至20-40 °C后，抽滤； 4)将抽滤后得到的滤饼置于双锥干燥机中，在20-70°C真空度_0.09MPa下干燥3-8小时，得海南霉素钠成品。2.根据权利要求1所述的海南霉素钠成品的制备方法，其特征在于，步骤I)中，所述溶剂的用量为干菌丝体质量的3-7倍。3.根据权利要求1所述的海南霉素钠成品的制备方法，其特征在于，步骤2)中，所述浓缩液的体积为浸提液体积的0.1-0.2倍。4.根据权利要求1所述的海南霉素钠成品的制备方法，其特征在于，步骤3)和4)之间还包括一个重结晶过程:向步骤3)抽滤后得到的滤饼加入溶剂并加热溶解，将溶解液压入重结晶罐，加入占溶解液总体积20-50%的水，以转速100-400转/分钟搅拌2-10小时降温至25-45 °C后，再抽滤。5.根据权利要求4所述的海南霉素钠成品的制备方法，其特征在于，重结晶时所述溶剂的用量为滤饼质量的1-2倍。6.根据权利要求1至5任一项所述的海南霉素钠成品的制备方法，其特征在于，步骤2)中的固体菌渣可按照步骤I)的条件加入溶剂浸提并经历步骤2)、3)、4)制得海南霉素钠成品O7.根据权利要求6所述的海南霉素钠成品的制备方法，其特征在于，经三次浸提后，干燥的固体菌渣内海南霉素钠的含量〈0.2 %。8.根据权利要求1至5任一项所述的海南霉素钠成品的制备方法，其特征在于，所述溶剂为甲醇或乙醇的水溶液，其中甲醇或乙醇与水的体积比为5-9:1。9.根据权利要求8所述的海南霉素钠成品的制备方法，其特征在于，所述溶剂中甲醇或乙醇与水的体积比为9:1。
【文档编号】C07D493/10GK105924452SQ201610279991
【公开日】2016年9月7日
【申请日】2016年4月28日
【发明人】王振华, 胡言峰, 禚长福, 陈宁, 李伟, 黄长冬, 李正峰, 吴海燕
【申请人】山东胜利生物工程有限公司